01-185

Vascular Endothelial Growth Factor human

recombinant, expressed in baculovirus infected Sf9 cells, liquid, suitable for cell culture

• Synonym(e): VEGF Growth Factor
• UNSPSC-Code: 12352202
• eCl@ss: 32160405
• NACRES: NA.75

Eigenschaften

• product name: VEGF-Protein, human, rekombinant, The human recombinant VEGF Protein is available in a 10 µg format.
• Biologische Quelle: human
• Qualitätsniveau: 100
• Rekombinant: expressed in baculovirus infected Sf9 cells
• Form: liquid
• Hersteller/Markenname: Upstate^®
• Methode(n): cell culture | mammalian: suitable
• Aufnahme: sample type neural stem cell(s); sample type hematopoietic stem cell(s); sample type mesenchymal stem cell(s)
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_001025366.1; NM_001025367.1; NM_001025368.1; NM_001025369.1; NM_001025370.1; NM_001033756.1; NM_003376.4
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P15692
• Versandbedingung: dry ice
• Angaben zum Gen: human ... VEGFA(7422)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Produktherkunft: Rekombinante Human-DNA, die in mit Baculovirus infizierten Sf9-Zellen exprimiert wird.

Anwendung

VEGF-Proliferations-Assay

1. Die HUVEC vor der Verwendung in diesem Assay in F-12K-Medium aufbewahren, das mit 10 % (v/v) FBS, 1 % Penicillin-Streptomycin-Glutamin, 0,1 mg/ml Heparin und 0,05 mg/ml Endothelzellwachstumsergänzung (ECGS) ergänzt wurde.

2. HUVEC für den VEGF-Assay mit einer Dichte von 4.000 Zellen je Well über Nacht in einer 96-Well-Mikrotiterplatte in dem Wachstumsmedium subkultivieren.

3. VEGF für eine Endkonzentration im Bereich von 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2; 6,2; 12,5; 25 und 50 ng/ml zugeben. VEGF-Verdünnungsmittel als Negativkontrolle zu einem Satz Wells geben.
4. Vier Tage später 20 μl Promega Substrate Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent zu jedem Well geben.
5. Bei 37 C 2 Std. inkubieren und bei einem OD von 490 nm ablesen.

Qualität

Regelmäßig in einem 5-tägigen Wachstumsassay mit humanen Nabelschnurvenen-Endothelzellen beurteilt

Zellproliferations-Assay: Die biologische Aktivität dieser Charge von VEGF wurde durch ihre mitogene Wirkung auf humane Nabelschnurvenen-Endothelzellen (HUVEC) mit einem ED50 von etwa 1,0 ng/ml bestimmt. Die Ergebnisse können abhängig von der verwendeten Zelllinie variieren. VEGF stimuliert auch Endothelzellen von anderen Spezies.

Physikalische Form

10 µg VEGF-Protein wurden aus Puffer mit 25 mmol/l HEPES und 150 mmol/l NaCl, pH-Wert 7,0 lyophilisiert. Trägerfrei.

10 µg VEGF-Protein, lyophilisiert aus Puffer mit 25 mmol/l HEPES und 150 mmol/l NaCl, pH-Wert 7,0. Trägerfrei.

Durch einen 0,2-μm-Membranfilter sterilisiert

Lagerung und Haltbarkeit

Das lyophilisierte Pulver ist bei Raumtemperatur einige Wochen haltbar, wird aber am besten bei -20 °C bis zu einem Jahr ab Empfangsdatum gelagert. Nach kurzem Schleudern mit sterilem Wasser oder 25 mmol/l HEPES und 150 mmol/l NaCl, pH-Wert 7,0 rekonstituieren. Das rekonstituierte Material kann eine Woche bei 2°–8 °C aufbewahrt werden, allerdings werden unverdünnte Aliquote bei -20 °C empfohlen. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Dieses Produkt ist säurestabil. In entweder 0,1 % TFA oder 4 mmol/l HCl mit 25 μg BSA je μg VEGF verdünnen, um die Stabilität zu erhalten. Reduktionsmittel (wie Dithiothrietol oder 2-Mercaptoethanol) hemmen die VEGF-Aktivität.

Rechtliche Hinweise

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: nwg
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• Flammpunkt (°C): Not applicable