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MABT868

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-alpha-tubuline acétylée, clone 6-11B-1

clone 6-11B-1, from mouse

Synonyme(s) :

Tubulin alpha-1 chain, acetyl-alpha tubulin

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

100

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

6-11B-1, monoclonal

Espèces réactives

sea urchin, bovine, monkey, Chlamydomonas, Drosophila, mouse, rat-kangaroo, human

Technique(s)

dot blot: suitable
electron microscopy: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable

Isotype

IgG2bκ

Numéro d'accès GenBank

AEI99579.1

Numéro d'accès UniProt

P18258

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

acetylation (Lys40)

Informations sur le gène

human ... TUBA1A(7846)

Description générale

Les microtubules sont des filaments cytosquelettiques composés d'hétérodimères d'alpha/bêta-tubuline qui s'auto-assemblent en tête-à-queue pour former des protofilaments et pour former latéralement un tube creux. De nombreuses modifications post-traductionnelles (PTM), notamment l'acétylation, la polyglutamylation, la polyglycylation, la détyrosination, la phosphorylation et la palmitoylation, peuvent réguler les propriétés de polymérisation des tubulines et/ou leurs interactions avec les protéines associées aux microtubules (MAP) et les protéines motrices. Un sous-ensemble de microtubules cytoplasmiques et de microtubules dans le fuseau, l'axone et les cils sont connues pour contenir de l'α-tubuline acétylée sur l'amine epsilon de la lysine-40 (K40). Le membre MEC-17 de la famille de la lysine acétyltransférase GNAT (ou de l'α-tubuline acétyltransférase/alphaTAT) catalyse l'acétylation de la K40, alors que la HDAC6 et la sirtuine 2 (SIRT2) sont connues pour catalyser la désacétylation de la tubuline. Les preuves expérimentales indiquent que l'acétylation de la K40 amorce l'α-tubuline à d'autres PTM, ce qui ne peut pas être inversé par la désacétylation de la K40ac plus tard. Ensuite, l'α-tubuline acétylée et l'α-tubuline désacétylée dans les microtubules natifs sont distinctes de l'α-tubuline non acétylée sur le plan structurel (dont la K40 n'a jamais été acétylée).

Spécificité

Les preuves expérimentales indiquent que l'α-tubuline acétylée et l'α-tubuline désacétylée dans les microtubules natifs sont distinctes de l'α-tubuline non acétylée sur le plan structurel, et que le clone 6-11B-1 reconnaît l'α-tubuline acétylée et désacétylée, mais pas l'α-tubuline non acétylée (jamais acétylée). Bien que le profil d'immunomarquage 6-11B-1 ressemble à celui des anticorps acétyl-Lys40 sur les cellules cyclantes normales, il faut être prudent lorsque l'on interprète les résultats d'immunomarquage à l'aide de cet anticorps monoclonal sur des cellules soumises à des manipulations de désacétylation de la tubuline par expression d'une désacétylase exogène ou par des moyens chimiques.

Immunogène

Fraction de la dynéine 15 S d'axonèmes de sperme d'oursin.

Application

Analyse par western blotting : une concentration de 4,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter l'α-tubuline acétylée dans 10 µg de lysat de tissus cérébraux de souris.
Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter l'α-tubuline acétylée dans des cellules épithéliales rénales humaines normales en culture (avec la permission du Dr Christopher Ward, University of Kansas Medical Center).
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter l'α-tubuline dans des lysats d'axonèmes de sperme d'oursin, mais pas dans les lysats de microtubules stabilisés par taxol d'ovules d'oursins (Piperno, G., et Fuller, M. (1985). J. Cell Biol.101(6):2085-2094).
Analyse par dot blot : un lot représentatif a permis de détecter l'α-tubuline dans les fractions solubles et insolubles dans le détergent ionique Sarkosyl d'extraits d'axonèmes de sperme d'oursin (Piperno, G., et Fuller, M. (1985). J. Cell Biol.101(6):2085-2094).
Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter l'α-tubuline acétylée et l'α-tubuline désacétylée, mais pas l'α-tubuline non acétylée dans des fibroblastes rénaux du singe vert COS-7 et dans des cellules épithéliales de rein du rat-kangourou Ptk2 par immunocytochimie en fluorescence (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).
Analyse par microscopie électronique : il a été démontré que le fragment Fab du clone 6-11B-1 marque les microtubules stabilisés par taxol polarisés in vitro à partir de tubuline de cerveau de bovin purifiée avec ou sans désacétylation catalysée par SIRT2 (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).
Cet anticorps anti-α-tubuline acétylée, clone 6-11B-1 est validé pour une utilisation en western blotting, immunocytochimie, dot blot et microscopie électronique pour la détection d'α-tubuline acétylée.
Domaine de recherche
Structure cellulaire
Sous-domaine de recherche
Molécules d'adhésion cellulaire (CAM)

Qualité

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HeLa.

Analyse par western blotting : une concentration de 4,0 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter l'α-tubuline acétylée dans 10 µg de lysat de cellules HeLa.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 50 kDa

Forme physique

Anticorps IgG2bκ monoclonal de souris purifié, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium.
Format : purifié
Produit purifié sur protéine G

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

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