MABT126

Anticorps anti-obscurine, clone 5H10A

clone 5H10A, from mouse

• Synonyme(s) : EC:2.7.11.1, Obscurin-RhoGEF, Obscurin-myosin light chain kinase, Obscurin-MLCK
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: 5H10A, monoclonal
• Espèces réactives: mouse, rat, human
• Technique(s): immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotype: IgG1κ
• Numéro d'accès NCBI: NP_001092093
• Numéro d'accès UniProt: Q5VST9
• Conditions d'expédition: ambient
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... OBSCN(84033)

Description

Description générale

L'obscurine (UniProt : Q5VST9 ; également appelée EC 2.7.11.1, obscurine-RhoGEF, chaîne de kinase obscurine-myosine ou obscurine-MLCK) est codée par le gène OBSCN (aussi appelé KIAA1556, KIAA1639) (identifiant du gène : 84033) chez l'être humain. L'obscurine appartient à la famille des protéines de signalisation sarcomériques géantes qui comprend la titine et la nébuline. Elle est exprimée dans les muscles cardiaques et squelettiques et joue un rôle dans l'organisation des myofibrilles lors de l'assemblage du sarcomère. L'obscurine contient 68 domaines Ig, 2 domaines de fibronectine, 1 domaine de liaison calcium/calmoduline, 1 domaine RhoGEF avec domaine PH associé et 2 domaines sérine-thréonine kinase. Dans les myofibrilles matures, l'obscurine se trouve principalement à la périphérie des disques Z et des lignes M, où sa position lui permet de communiquer avec le myoplasme environnant. Il est établi que l'obscurine s'associe à l'appareil contractile par le biais de sa liaison à la titine, à la myosine sarcomère et peut-être à d'autres protéines de l'appareil contractile. L'obscurine est étroitement associée à l'appareil contractile mature, ainsi elle ne présente qu'une solubilité limitée dans des conditions non dénaturantes. Cependant, il est possible de l'extraire des fibres musculaires adultes uniquement en présence de 2 % de SDS et de 1 % de bêta-mercaptoéthanol. Il a été établi que les cultures primaires de myotubes squelettiques néonatals contiennent de grandes quantités de l'isoforme obscurine de 800 kDa qui peut être solubilisée avec des détergents neutres pendant les premiers stades de la formation du sarcomère. (réf. : Kontrogianni-Konstantopoulos, A., and Bloch, R.J. (2005). J Muscle Res Cell Motil. 26(6-8):419-26).

Spécificité

Le clone 5H10A détecte l'obscurine dans les muscles cardiaques et squelettiques.

Immunogène

Obscurine recombinante humaine complète avec étiquette GST.

Épitope : extrémité N-terminale

Application

Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter l'obscurine dans des applications de western blotting (Bowman, A.L., et al. (2007). FEBS Lett. 581(8):1549-54 ; Ackermann, M.A., et al. (2014). PLoS One. 9(2):e88162).

Analyse par immunofluorescence : un lot représentatif a permis de détecter l'obscurine dans des applications d'immunofluorescence (Bowman, A.L., et al. (2007). FEBS Lett. 581(8):1549-54).

Analyse par Immunofluorescence : un lot représentatif a permis de détecter l'obscurine dans des échantillons de ventricule gauche de cœur de souris et de muscles quadriceps de souris (avec la permission de Li-Yen R. Hu, Ph.D., et d'Aiketerini Kontrogianni-Konstantopoulos, Ph.D., University of Maryland, School of Medicine, USA).

Analyse par immunohistochimie : un lot représentatif a permis de détecter l'obscurine dans des applications d'immunohistochimie (Kontrogianni-Konstantopoulos, A., et al. (2006). FASEB J. 20(12):2102-11 ; Ackermann, M.A., et al. (2014). PLoS One. 9(2):e88162).

Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter l'obscurine dans des tissus de ventricule gauche de cœur de souris et de muscle tibial antérieur de souris (avec la permission de Li-Yen R. Hu, Ph.D., et d'Aiketerini Kontrogianni-Konstantopoulos, Ph.D., University of Maryland, School of Medicine, USA).

Domaine de recherche
Structure cellulaire

L'utilisation de cet anticorps monoclonal de souris anti-obscurine, clone 5H10A (réf. MABT126) a été testée en immunofluorescence, en immunohistochimie et en western blotting pour la détection de l'obscurine.

Qualité

Tests d'isotypage : Confirmation d'identité par test d'isotypage.

Analyse par isotypage : L'identité de cet anticorps monoclonal a été confirmée par un test d'isotypage comme étant de l'IgG1 de souris.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 800 kDa ; poids théorique (calculé) : 868,48 kDa. Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.

Forme physique

Format : Produit purifié

IgG1 monoclonale de souris purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié sur protéine G

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1