Duolink® Proximity Ligation Assay (PLA)
In jeder Zelle wartet ein Durchbruch darauf, entdeckt zu werden. Um den Ursprung einer Humankrankheit zu ändern oder das Anzeichen einer irregulären Protein-Protein-Wechselwirkung zu entdecken, sind leistungsstarke Arbeitsmittel und ein optimierter Ansatz erforderlich. Verlassen Sie sich auf den Duolink® PLA, der Proteinsignale 1000-fach verstärkt und so die visuelle Detektion von Proteinen und ihren Wechselwirkungen mit einem unkomplizierten Protokoll ermöglicht.
Erschließen Sie neue Möglichkeiten in Ihrer Forschung mit höherer Leistung und den Vorteilen der Duolink® PLA-Technologie:
- Visualisierung von Proteinwechselwirkungen – sowohl stabile als auch transiente
- Detektion endogener Proteine – keine Überexpression oder genetische Manipulation
- Hohe Spezifität – der Einsatz zweier Antikörper/Sonden eliminiert falsch-positive Ergebnisse
- Einzelmolekül-Sensitivität – RCA (Rolling Circle Amplification) macht Proteine sichtbar
- Keine Spezialgeräte erforderlich – Immunfluoreszenz-Standardmethoden
- Publikationsreife Ergebnisse – vergleichen Sie Bildergebnisse von indirekten Methoden (Co-IP/WB)
Detektion und Quantifizierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen
Proteine beeinflussen die Zellfunktion durch Wechselwirkungen mit anderen Proteinen, DNA, Membrankomponenten, Strukturkomponenten usw. Der Duolink® PLA ermöglicht es Ihnen, diese Wechselwirkungen innerhalb der Zelle durch klare, visuelle Signale zu sehen. Das Signal wird nur erzeugt, wenn die Proteine von Interesse innerhalb von 40 nm liegen und dadurch die Wechselwirkung detektiert wird.
Detektion und Quantifizierung posttranslationaler Modifikationen (PTM)
Der zuverlässige Nachweis einer Proteinmodifikation wie Methylierung oder Phosphorylierung kann problematisch sein. Mit dem Duolink® PLA können Sie PTM mit hoher Spezifität und Empfindlichkeit nachweisen. Verwenden Sie dazu zwei Antikörper, einen für das Protein und einen für seine Modifikation von Interesse. Wenn die Modifikation am Protein vorhanden ist, sollte beide Antikörper an das Protein binden und ein Signal erzeugen.
Detektion und Quantifizierung schwach exprimierender Proteine
Schwach abundante Proteine und Biomarker können bei traditionellen Methoden aufgrund mangelnder Detektionsempfindlichkeit übersehen werden. Der Duolink® PLA hingegen ermöglicht die Detektion eines einzelnen Ereignisses. Solange Sie die zielspezifischen Antikörper verwenden, werden Sie das Protein nachweisen. Es ist keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich.
Duolink® Probemaker-Kits
Bei Versuchen, für die Duolink® PLA-Sonden nicht geeignet sind, weil die Wirtsspezies eines primären Antikörpers eine andere als Maus, Kaninchen oder Ziege ist, ermöglichen die Duolink® Probemaker-Kits die Konjugation eines PLA-Oligos (PLUS oder MINUS) an einen Antikörper. Die Antikörperkonjugation mit dem Duolink® Probemaker ist schnell, einfach und erfordert keine anschließende Reinigung. Entdecken Sie den Duolink® Probemaker und stellen Sie Ihre eigenen PLA® Sonden her.
Duolink® PLA Multicolor-Kits
Für Multiplex-Anwendungen zur endogenen, simultanen Detektion von bis zu 4 Proteinwechselwirkungen, posttranslationalen Modifikationen oder Proteinexpressionsgraden (einschließlich von gering abundanten Proteinen) in fixierten Zellen und Gewebeproben sind Duolink® PLA Multicolor Probemaker-Kits in vier verschiedenen Farben erhältlich: Rot, Grün, Orange und Rot. Jedes Multicolor Probemaker-Kit enthält alle notwendigen Reagenzien für die direkte Konjugation spezifischer Oligo-Paare an ein Primärantikörper-Paar. Die resultierenden PLA-Sonden müssen zusammen verwendet werden und können nicht mit anderen Duolink® PLA-Sonden gepaart werden.
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