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Merck

XNATG

Sigma-Aldrich

SYBR® Green Extract-N-Amp Tissue PCR-Kit

sufficient for 100 extractions, sufficient for 100 amplifications

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About This Item

UNSPSC-Code:
41106303
NACRES:
NA.55

Verwendung

sufficient for 100 amplifications
sufficient for 100 extractions
sufficient for 100 reactions

Leistungsmerkmale

dNTPs included
hotstart

Methode(n)

PCR: suitable

Lagertemp.

−20°C

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Allgemeine Beschreibung

Das SYBR® Green Extract-N-Amp Gewebe-PCR-Kit ist ein Kit für die direkte PCR (Polymerase-Kettenreaktion), das alle notwendigen Reagenzien für die schnelle Extraktion, Amplifikation und den Nachweis von genomischer DNA aus den Schwänzen von Mäusen und anderem Tiergewebe, Wangenabstrichen, Haarschäften und Speichel enthält.

Anwendung

Das SYBR® Green Extract-N-Amp Gewebe-PCR-Kit wird zur Extraktion von DNA aus dem Embryonenkopf von männlichen Pmp22-transgenen Sprague-Dawley-Ratten und für die Genotypisierung eingesetzt.
Dieses Kit für die direkte PCR (Polymerase-Kettenreaktion) eignet sich auch für Genkopienzahl-Experimente und zur Amplifikation und zum Quantifizieren von DNA aus mehreren Arten von Gewebeproben.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Neuartig – vollständig flüssige Extraktion von genomischer DNA für die quantitative PCR (qPCR) in einem einzigen Schritt
  • Schnell – vom Gewebe zur qPCR in 15 Minuten
  • Praktisch – keine langen enzymatischen Aufschlüsse oder Säulenaufreinigungen
  • Einfach – schnelles, leicht zu befolgendes Protokoll
  • Sensitiv – speziell formulierter Hot Start® SYBR® Green PCR ReadyMix für die hochspezifische PCR-Amplifikation und Quantifikation genomischer DNA
  • Sicher – keine organische Extraktion mit gefährlichen Chemikalien

Komponenten

Das Kit enthält eine Extraktionslösung, Neutralisierungslösung, Gewebezubereitungslösung und Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix. Der Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix ist ein 2-fach konzentriertes Reaktionsgemisch, das SYBR Green, Puffer, Salze, dNTP, Taq-Polymerase und JumpStart Taq-Antikörper enthält. Es ist insbesondere im Hinblick auf die Verwendung mit Extraktionsreagenzien optimiert und enthält JumpStart Taq-Antikörper für Heißstart-PCR zur Verbesserung der Spezifität und SYBR Green I als unspezifischen Reporter für die Echtzeit-PCR.

Prinzip

Die DNA wird durch 10-minütige Inkubation der Probe in einem Gemisch aus Extraktionslösung und Gewebezubereitungslösung bei Raumtemperatur schnell aus dem Gewebe extrahiert. Nach einer dreiminütigen Denaturierung durch Wärme wird dem Extrakt die gleiche Menge Neutralisierungslösung B hinzugefügt, um die hemmenden Substanzen zu neutralisieren und den Extrakt für die Echtzeit-PCR in einem beliebigen plattenbasierten thermischen Echtzeit-Zyklierungssystem fertigzustellen. Ein Aliquot des neutralisierten Extrakts wird dann mit dem Extract-N-Amp SYBR® Green PCR ReadyMix und den vom Anwender bereitgestellten PCR-Primern kombiniert.

Sonstige Hinweise

Weitere Informationen finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/extract-n-amp.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden US-Patente und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA: 5,994,056 und 6,171,785. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produkts für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit noch durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen (wie z. B. Vorrichtungs- oder Systemansprüche in US-Patent Nr. 6,814,934) oder ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf das Melden der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Anwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Antikörper lizenziert für In-vitro-Forschung unter U.S. Patenten Nr. 5,338,671 und 5,587,287 und den entsprechenden Patenten in anderen Ländern.
Extract-N-Amp is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Aquatic Chronic 2 - Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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Linda Doan et al.
Journal of visualized experiments : JoVE, (11)(11), doi:10-doi:10 (2008-12-11)
Genomic detection of DNA via PCR amplification and detection on an electrophoretic gel is a standard way that the genotype of a tissue sample is determined. Conventional preparation of tissues for PCR-ready DNA often take several hours to days, depending
Haroldo A Toque et al.
PloS one, 8(8), e72277-e72277 (2013-08-27)
Elevated arginase (Arg) activity is reported to be involved in diabetes-induced vascular endothelial dysfunction. It can reduce L-arginine availability to nitric oxide (NO) synthase (NOS) and NO production. Akita mice, a genetic non-obese type 1 diabetes model, recapitulate human diabetes.
Thomas Prukop et al.
Journal of neuroscience research, 98(10), 1933-1952 (2020-06-27)
Charcot-Marie-Tooth disease 1 A (CMT1A) is caused by an intrachromosomal duplication of the gene encoding for PMP22 leading to peripheral nerve dysmyelination, axonal loss, and progressive muscle weakness. No therapy is available. PXT3003 is a low-dose combination of baclofen, naltrexone
Modesto Rojas et al.
PloS one, 8(12), e84357-e84357 (2013-12-21)
Diabetic retinopathy, a major cause of blindness, is characterized by increased expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), leukocyte attachment to the vessel walls and increased vascular permeability. Previous work has shown that reactive oxygen species (ROS) produced by the
Ilya Chumakov et al.
Orphanet journal of rare diseases, 9, 201-201 (2014-12-11)
Charcot-Marie-Tooth disease type 1A (CMT1A) is the most common inherited sensory and motor peripheral neuropathy. It is caused by PMP22 overexpression which leads to defects of peripheral myelination, loss of long axons, and progressive impairment then disability. There is no

Artikel

Die Verfügbarkeit von einfachen Verfahren zum Aufreinigen von DNA und RNA hat die Analyse und Charakterisierung des Genoms und der Genexpression in hohem Maß erleichtert. Es besteht eine Anforderung, DNA und RNA schnell und praktisch aus verschiedenen zellulären Quellen, einschließlich Gewebe aus Tier-, Pflanzen- und Bakterienkulturen, zu isolieren.

The availability of simple methods for purification of DNA and RNA has greatly facilitated the analysis and characterization of the genome and gene expression. There is a demand to isolate DNA and RNA rapidly and conveniently from a variety of cellular sources, including cells and tissues from mammalian, plant and bacterial cultures.

Protokolle

Genomic detection of DNA via PCR amplification and detection on an electrophoretic gel is a standard way that the genotype of a tissue sample is determined. Conventional preparation of tissues for PCR-ready DNA often take several hours to days, depending on the tissue sample. The genotype of the sample may thus be delayed for several days, which is not an option for many different types of experiments. Here we demonstrate the complete genotyping of a mouse tail sample, including tissue digestion and PCR readout, in one and a half hours using our SYBR Green Extract-N-Amp™ Tissue PCR Kit.

The SYBR® Green Extract-N-Amp™ Tissue PCR Kit contains all the reagents needed for rapid extraction, amplification and detection of genomic DNA from mouse tails and other animal tissues, buccal swabs, hair shafts, and saliva.

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