KCQS09

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™, ROX^™

with ROX for ABI instruments

• Synonym(e): RT qPCR, one step RT qPCR, probe PCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 500 reactions
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Lagerbedingungen: protect from light
• Methode(n): RT-qPCR: suitable
• Farbe: light blue
• Aufnahme: purified RNA
• Kompatibilität: ABI 5700; ABI 7000; ABI 7300; ABI 7700; ABI 7900 HT ; ABI 7900 HT Fast; ABI 7900; ABI StepOne; ABI StepOnePlus
• Nachweisverfahren: probe-based
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist ein gebrauchsfertiger, höchst empfindlicher Master-Mix für die quantitative Reverse-Transkription-PCR (RT-qPCR) von RNA-Templates, bei der Hybridisierungssonden als Nachweischemikalien, z. B. TaqMan^® 5′-Hydrolysesonden auf Echtzeit-PCR-Systemen (siehe Abschnitt Instrumentenkompatibilität zur Auswahl des für Ihr Instrument geeigneten Reagenz), eingesetzt werden. Erststrang-cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation finden im selben Röhrchen ohne Öffnen zwischen den Verfahren statt. Er ist zur höchst empfindlichen Quantifizierung von RNA-Viren oder von RNA-Zielen geringer Abundanz sowie für durchsatzhohe Genexpressionsstudien ideal geeignet. Das System wurde im Hinblick auf maximale RT-PCR-Wirksamkeit, Sensitivität und Spezifität bei reduziertem Reaktionsvolumen und schnellen Zykluszeiten optimiert.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ enthält alle erforderlichen Komponenten für die RT-qPCR außer RNA-Template und Sonde. Das System ist mit allen dual-markierten Sondenchemien kompatibel. Die reverse Transkriptase ist ein technisch hergestelltes M-MLV mit reduzierter RNase-H-Aktivität und einer verbesserten Aktivität und Stabilität bei höheren Temperaturen. Durch Einsatz von höheren Temperaturen (50 bis 55 °C) für den Erststrang-Schritt einer einstufigen RT-qPCR wird eine höhere Spezifität für das Primer-Annealing und die Unterbrechung der RNA-Sekundärstruktur erreicht, die die cDNA-Synthese beeinträchtigen kann.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist PCR-Inhibitoren gegenüber höchst resistent. Eine wichtige Komponente des ReadyMix^™ ist eine ultrareine, höchst prozessive, thermostabile DNA-Polymerase, die mit monoklonalen Antikörpern hoher Avidität kombiniert ist. Dadurch wird ein extrem strikter automatischer Heißstart ermöglicht, der das Potenzial für Primer-Dimere und andere unspezifische PCR-Artefakte minimiert. Die hellblaue Farbe des inerten Farbstoffs vereinfacht den Reaktionsaufbau auf weißen oder durchsichtigen Platten und minimiert das Auftreten von Fehlern beim Pipettieren oder Mischen. Der Farbstoff beeinträchtigt weder die qPCR-Leistung noch die Stabilität des Produkts.

Anwendung

Verschiedene Echtzeit-PCR-Systeme nutzen verschiedene Strategien für die Normalisierung von Fluoreszenzsignalen und zur Korrektur optischer Abweichungen zwischen den Wells. Es ist entscheidend, das für Ihr spezifisches Instrument geeignete qPCR-Reagenz zu wählen. KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ enthält keinen internen Referenzfarbstoff. Kompatible Instrumente sind:

• Applied Biosystems^® 5700
• Applied Biosystems 7000
• Applied Biosystems 7300
• Applied Biosystems 7700
• Applied Biosystems 7900
• Applied Biosystems 7900 HT Fast
• Applied Biosystems 7900 HT
• Applied Biosystems StepOnePlus^™
• Applied Biosystems StepOne^™

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Testergebnisse innerhalb von 33 Minuten
• Höchst effiziente und empfindliche PCR-Ergebnisse in Echtzeit
• Wenig/keine Optimierung notwendig

Komponenten

2X Reaktionspuffer mit dATP, dCTP, dGTP, dTTP, Magnesiumchlorid, reverser Transkriptase, RNase-Inhibitor-Protein, Heißstart-DNA-Polymerase, ROX-Referenzfarbstoff, inertem blauem qPCR-Farbstoff und Stabilisatoren

Verpackung:
500 Reaktionen* = 5 X 1-mL-Röhrchen
* Anzahl der Reaktionen auf Grundlage eines Volumens von 20 μL

Rechtliche Hinweise

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

KiCqStart is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.

ROX is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable