ROAPRO

Aprotinin

from bovine lung

• Synonym(e): Aprotinin, Pankreatischer Trypsin-Inhibitor, Trypsin-Inhibitor, pankreatisch (bpti), Trypsin-Kallikrein-Inhibitor
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bovine lung
• Qualitätsniveau: 100
• Form: lyophilized
• Verpackung: pkg of 10 mg (10236624001); pkg of 100 mg (11583794001); pkg of 50 mg (10981532001)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Methode(n): electrophoresis: suitable; tissue culture: suitable
• pH-Bereich: 3-10
• Löslichkeit: water: soluble 10 mg/mL
• Absorption: 0.84 at 280 nm
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Trypsin-Inhibitor, pankreatisch, aus der Rinderlunge. Es ist als pankreatischer Trypsin-Inhibitor (BPTI) bekannt. Aprotinin, auch bekannt als pankreatischer Trypsin-Inhibitor und Trypsin-Kallikrein-Inhibitor, wird in Lunge, Milz, Leber und Bauchspeicheldrüse exprimiert. Es kommt außerdem in freier Form in Kälberserum vor.

Spezifität

Aprotinin hemmt Serinproteasen. Es hemmt Kallikrein, die Protease, die blutdrucksenkende Peptide wie Kallidin und Bradykinin freisetzt (menschliches Plasmakallikrein: K_i = 3 ×10^-8 M bei pH-Wert 8,0, Schweinepankreaskallikrein: (K_i = 1 × 10^-9 M bei pH-Wert 8,0), Trypsin (K_i = 2,8 × 10^-11 M bei pH-Wert 7,8, K_i = 2,6 × 10^-9 M bei pH-Wert 4,0, nicht-kompetitiv), Trypsinogen, Chymotrypsin (K_i = 9 × 10^-9 M bei pH-Wert 8,0), bakterielles Fibrinolysin und Plasmin (K_i = 1 nM bei pH-Wert 7,3).
Cathepsin G, Akrosin, menschliche Leukozytenelastase und menschliche Uokinase werden schwach gehemmt. Faktor Xa, Thrombin, Subtilisin, Papain, Pepsin, Angiotensin-konvertierendes Enzym (ACE), Carboxypeptidase A und B, andere Metallproteasen und Thiolproteasen werden nicht gehemmt.

Anwendung

Aprotinin wird für den Schutz von Proteinen und Enzymen während der Isolation/Aufreinigung eingesetzt. Die Hemmung der Proteaseaktivität erhöht die Lebensdauer von Zellen in Zell- und Gewebekulturstudien.

• Weitere Anwendungen: Aufreinigung von Urokinase, Trypsin und Chymotrypsin auf immobilisiertem Aprotinin
• Quantifizierung der Kallikreinaktivität in Mischungen aus Esterasen und Proteasen
• Kontrollierter Abbau von Substraten durch das Vermeiden von nichtspezifischer Proteolyse in klinisch-chemischen Tests
• Aprotinin ist ein Modellprotein für Proteinfaltungsstudien
• Molekülmassenmarker in SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese

Sequenz

Monomeres Peptid aus 58 Aminosäuren, das von drei Disulfidbindungen in Konformation gehalten wird.

Einheitendefinition

Eine Inhibitoreinheit (IU) ist als die Menge eines Aproteins definiert, welche 1 U Trypsin in < 10 Minuten bei einem pH-Wert von 6 vollständig hemmt.. (Trypsinaktivität bestimmt bei +25 °C, pH-Wert 8,0, BAEE als Substrat.)
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 2,8 Inhibitoreinheiten (+25 °C, Chromozym TRY als Substrat).
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 26 Kallikrein-Inhibitoreinheiten (KIU) (+25 °C).
Eine Inhibitoreinheit (IU) (+25 °C, BAEE als Substrat) entspricht etwa 0,067 Inhibitoreinheiten (+25 °C, Bz-D,L-Arg-4-Na als Substrat, Trypsinbestimmung bei pH-Wert 7,8).
Eine Kallikrein-Inhibtoreinheit = 0,17 μg kristallines Aprotinin.

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: 0,06 bis 2 μg/ml (0,01–0,3 μM)
Arbeitslösung: Wasserlösliche (10 mg/ml) oder wässrige Pufferlösung (z. B. 0,1 M Tris, pH-Wert 8,0).
Hinweis: Um die Adsorption von Aprotinin auf negativ geladene Festphasen, z. B. Chromatographiegele, Ultrafiltrationsmembranen, zu vermeiden, sollte die NaCl-Konzentration oberhalb von 0,1 M liegen, oder es sollten während der Trennung andere geeignete Salze zu allen Puffern hinzugefügt werden.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C

Rekonstituierung

Leicht wasserlösliche (10 mg/ml) oder wässrige Pufferlösung (z. B. Tris, 0,1 M, pH-Wert 8,0). Eine auf pH-Wert 7 bis 8 angepasste Lösung ist bei 2 bis 8 °C etwa 1 Woche haltbar.
Aliquoten, die bei -15 bis -25 °C gelagert werden, sind etwa 6 Monate lang stabil.
Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen sowie das Aussetzen gegenüber stark alkalischen Lösungen ist zu vermeiden (inaktiv bei pH-Wert > 12,8).

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable