MABC604
Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1
clone 3H1, from rat
Synonym(e):
Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
rat
Qualitätsniveau
Antikörperform
purified antibody
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
3H1, monoclonal
Speziesreaktivität
mouse
Methode(n)
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotyp
IgG
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
wet ice
Posttranslationale Modifikation Target
unmodified
Angaben zum Gen
mouse ... Mlkl(74568)
Allgemeine Beschreibung
MLKL (mixed lineage kinase domain-like protein) wird vom Gen MLKL codiert; dieses interessante Protein ist erforderlich für die Ausführung programmierter Nekrose oder Nekroptose, beispielsweise in Reaktion auf TNF-α-induzierte Nekrose. MLKL ist ein Bestandteil des „Nekrosoms“, also des Multiproteinkomplexes, der den Tumornekrosefaktor (TNF)-induzierten Zelltod durch Nekroptose auslöst. Für die von TNF-α induzierte programmierte Nekrose sind auch die Aktivitäten der Rezeptor-interagierenden Serin-/Threonin-Kinasen RIP1 und RIP3 erforderlich, die ebenfalls direkt mit dem Protein MLKL interagieren. Für die Nekroptose ist RIP3 eine essenzielle vorgeschaltete Kinase. Die Pseudokinase MLKL fungiert als Substrat von RIP3 für die Vermittlung nachgeschalteter Signalwege; bei einer Komplexbildung mit MLKL wird der RIP3-MLKL-Komplex mittels AMP-PNP stabilisiert und geht in eine inaktive Konformation über.
Immunogen
Epitop: Brace-Region.
KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz der Helix-Linker-Region (Brace) entspricht, die das N-Terminal mit der Pseudokinase-Domäne von Maus-MLKL verbindet (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Anwendung
Dieser Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1, ist zur Verwendung mit Immunzytochemie, Immunpräzipitation und Western Blot für den Nachweis von MLKL validiert.
Immunzytochemische Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF) des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (mit freundlicher Genehmigung von Prof. James M. Murphy, Walter and Eliza Hall Institute, Australien).
Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde MLKL aus einem löslichen Extrakt dermaler Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen immungefällt, die eine Doxycyclin-induzierbare Maus-MLKL-Expression des Wildtyps nur nach, nicht aber vor der Behandlung mit Doxycyclin enthielten (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde die durch eine Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) induzierte Translokation des N-terminalen MLKL-Fragments von Maus und Pferd (a.a. 1–180 bzw. 1–189) detektiert, das in dermalen Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen exogen exprimiert wird (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. Im Druck).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in menschlichen HT-29- und U937-Zellen nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265).
Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Membrantranslokation in dermalen Fibroblasten von Mäusen (MDF) nach einer Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).
Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Expression in L292-Mausfibroblasten sowie in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF), im embryonalen Fibroblasten der Maus (MEF) und in Knochenmarksmakrophagen (BMDM) von Mäusen des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (Cook, W.D. et al., 2014). Cell Death Differ. 21(10):1600–1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies rekombinantes Maus-MLKL in voller Länge sowie a.a. 1–180 und a.a. 124–464, nicht aber a.a. 1–125 oder a.a. 179–464 MLKL-Fragmente nach (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine MLKL-Expression in allen getesteten Geweben von Wildtyp-Mäusen mit Ausnahme des Gehirns nach, während kein Gewebe von Mlkl-/- Mäusen eine Zielbande ergab (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde MLKL aus einem löslichen Extrakt dermaler Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen immungefällt, die eine Doxycyclin-induzierbare Maus-MLKL-Expression des Wildtyps nur nach, nicht aber vor der Behandlung mit Doxycyclin enthielten (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde die durch eine Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) induzierte Translokation des N-terminalen MLKL-Fragments von Maus und Pferd (a.a. 1–180 bzw. 1–189) detektiert, das in dermalen Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen exogen exprimiert wird (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. Im Druck).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in menschlichen HT-29- und U937-Zellen nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265).
Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Membrantranslokation in dermalen Fibroblasten von Mäusen (MDF) nach einer Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).
Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Expression in L292-Mausfibroblasten sowie in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF), im embryonalen Fibroblasten der Maus (MEF) und in Knochenmarksmakrophagen (BMDM) von Mäusen des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (Cook, W.D. et al., 2014). Cell Death Differ. 21(10):1600–1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies rekombinantes Maus-MLKL in voller Länge sowie a.a. 1–180 und a.a. 124–464, nicht aber a.a. 1–125 oder a.a. 179–464 MLKL-Fragmente nach (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine MLKL-Expression in allen getesteten Geweben von Wildtyp-Mäusen mit Ausnahme des Gehirns nach, während kein Gewebe von Mlkl-/- Mäusen eine Zielbande ergab (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).
Qualität
Beurteilt mittels Western Blot in Herzgewebe-Lysat von Mäusen.
Western-Blot-Analyse: 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wiesen MLKL in 10 µg Herzgewebe-Lysat von Mäusen nach.
Western-Blot-Analyse: 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wiesen MLKL in 10 µg Herzgewebe-Lysat von Mäusen nach.
Zielbeschreibung
~52 kDa gemessen. 54,48/30,28 (Isoform 1/2 des Menschen) und 54,32/53,38 kDa (Isoform 1/2 der Maus) berechnet. In manchen Zelllysaten können uncharakterisierte Bänder auftreten.
Physikalische Form
Aufgereinigtes Ratten-IgG in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4); 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt
Sonstige Hinweise
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
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Empfehlung
Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
Analysenzertifikate (COA)
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The pseudokinase MLKL mediates necroptosis via a molecular switch mechanism.
Murphy, James M, et al.
Immunity, 39, 443-453 (2013)
RIPK1- and RIPK3-induced cell death mode is determined by target availability.
Cook, WD; Moujalled, DM; Ralph, TJ; Lock, P; Young, SN; Murphy, JM; Vaux, DL
Cell Death and Differentiation null
Snahel Patel et al.
Cell death and differentiation, 27(1), 161-175 (2019-05-19)
The kinase RIP1 acts in multiple signaling pathways to regulate inflammatory responses and it can trigger both apoptosis and necroptosis. Its kinase activity has been implicated in a range of inflammatory, neurodegenerative, and oncogenic diseases. Here, we explore the effect
Joseph Sarhan et al.
Cell death and differentiation, 26(2), 332-347 (2018-05-23)
Interferons (IFNs) are critical determinants in immune-competence and autoimmunity, and are endogenously regulated by a low-level constitutive feedback loop. However, little is known about the functions and origins of constitutive IFN. Recently, lipopolysaccharide (LPS)-induced IFN was implicated as a driver
Hayley I Muendlein et al.
Cell reports, 30(3), 699-713 (2020-01-23)
Receptor-interacting protein kinase 1 (RIPK1) and 3 (RIPK3) are well known for their capacity to drive necroptosis via mixed-lineage kinase-like domain (MLKL). Recently, RIPK1/3 kinase activity has been shown to drive inflammation via activation of MAPK signaling. However, the regulatory
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