MAB4155

Anti-BCRP1-Antikörper, Klon 5D3

clone 5D3, Chemicon^®, from mouse

• Synonym(e): ABC transporter, ATP-binding cassette transporter G2, ATP-binding cassette, sub-family G (WHITE), member 2, ATP-binding cassette, sub-family G, member 2, Breast cancer resistance protein, CD338 antigen, Mitoxantrone resistance-associated protein, Placent
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 5D3, monoclonal
• Speziesreaktivität: rat, human
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; western blot: suitable
• Aufnahme: sample type neural stem cell(s); sample type hematopoietic stem cell(s)
• Isotyp: IgG2bκ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_004827.2
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q9UNQ0
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... BCRP1(644079)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das Brustkrebsresistenz-Protein (BCRP1), auch bezeichnet als Plazenta-spezifisches ATP-bindende-Kassette(ABC)-Protein (ABCP), ABC-G-Unterfamilie-Mitglied 2 (ABCG2) oder Mitoxantron-Resistenz-Protein (MXR), gehört zur ATP-bindende-Kassette-Superfamilie von Wirkstofftransportern, die vermutlich an der Multi-Drug-Resistenz bei humanen Neoplasien beteiligt sind. ABCG2 wird bei arzneimittelresistenten Brust-, Kolon- und Magenkarzinomen sowie in Fibrosarkom-Zelllinien und in Blasten von Patienten mit akuter myeloischer Leukämie (AML) exprimiert. Zu den normalen Geweben, die das ABCG2-Protein exprimieren, gehören Plazenta-Synzytiotrophoblasten, Milchgänge und Drüsenlappen in der Brust, das Epithel in Dickdarm und Kolon, das Venen- und Kapillarepithel sowie die Membran der Gallenkanälchen der Leber. Mehrere Studien deuten darauf hin, dass ABCG2 auch in Stammzellen verschiedener Gewebe exprimiert wird und als Stammzellmarker von Nutzen sein könnte. Vermutlich ist ABCG2 dafür verantwortlich, dass eine Population von sehr primitiven hämatopoetischen und nichthämatopoetischen Zellen, die sogenannte Seitenpopulation(SP)-Untergruppe, den Fluoreszenzfarbstoff Hoechst 33342 ausstoßen kann. Ergebnisse einer semiquantitativen RT-PCR zeigen, dass in hämatopoetischen Geweben von Mensch, Javaneraffe und Maus (mit Ausnahme von Erythroblasten und NK-Zellen) ABCG2-mRNA in SP-Zellen stärker exprimiert wird als in Nicht-SP-Zellen. Im Knochenmark des Menschen ist die Expression von ABCG2-mRNA bei phänotypisch definierten Populationen primitiver CD34-positiver/CD38-negativer hämatopoetischer Zellen stärker als bei differenzierteren CD34-positiven/CD38-positiven Vorläuferzellen. BCRP1-mRNA wird auch in SP-Zellen der murinen Skelettmuskulatur, in neuralen Stammzellen und Vorläuferzellen sowie in Nestin-positiven Vorläuferzellen aus Langerhans-Inseln exprimiert. Eine Überexpression des humanen ABCG2-Gens mittels eines retroviral vermittelten Gentransfers verleiht murinen Knochenmarkzellen den SP-Phänotyp. BCRP1-mRNA wird sowohl in SP- als auch in Nicht-SP-Fraktionen embryonaler Stammzellen der Maus exprimiert. Dies deutet darauf hin, dass der mRNA-Spiegel die Menge an BCRP1-Protein ggf. nicht immer widerspiegelt oder dass auch andere Merkmale von Stammzellen, z. B. der Zellzyklusstatus oder die Expression anderer Transporter, zum SP-Phänotyp beitragen.

Spezifität

Erkennt spezifisch ein externes Epitop der humanen Form von ABCG2. Reagiert Berichten zufolge mit Stammzelllinien der Maus (Ginis, et al., 2004), eine Maus-Reaktivität ist bislang jedoch nicht belegt.

Immunogen

3T3-Zellen, die humanes ABCG2 exprimieren

Anwendung

Forschungskategorie
Stammzellenforschung

Forschungsunterkategorie
Neurale Stammzellen

Hämatopoetische Stammzellen

Immunzytochemie:
Zellkulturen, 5–15 Minuten bei Raumtemperatur mit 4 % PFA fixiert. Blockierung mit 10 % NGS, 0,1 % BSA in PBS mit 0,3 % Triton X-100 (Ginis et al., 2004).

Durchflusszytometrie:
Es wurde eine frühere Charge in einer 1:100–1:1000-Verdünnung verwendet.

Inhibitionstest:
Es wurde eine frühere Charge verwendet, um ABCG2 zu hemmen (Watanabe, K. et al., (2004. FEBS Letters 565:6–10). Siehe auch Sarkadi, B., et al., 2004 FEBS 567:116–120. Sarkadi zufolge hängen der Nachweis und die Hemmung durch 5D3 stark von der tatsächlichen Konformation von ABCG2 ab.
Blockierung mit 10 % NGS, 0,1 % BSA in PBS mit 0,3 % Triton X-100 (Ginis, 2004).

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Weisen Sie BCRP1 mit diesem Anti-BCRP1-Antikörper (Klon 5D3) nach, der für die Verwendung in FC, IC, IF, FUNC und WB validiert wurde.

Qualität

Regelmäßig mittels Western Blotting an L6-Lysaten beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
Mit einer 1:500-Verdünnung dieser Charge wurde BCRP1 in 10 μg L6-Lysaten nachgewiesen.

Zielbeschreibung

72 kDa

Physikalische Form

Flüssiges aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG2bκ in Puffer mit PBS, pH-Wert 7,4, mit 0,1 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Mit Protein A aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 ºC 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar. Nicht einfrieren.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
MCF-7-Zellen

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

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