AB5894
Anti-P2X2-Rezeptor-Antikörper
serum, Chemicon®
About This Item
Biologische Quelle
guinea pig
Qualitätsniveau
Antikörperform
serum
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
polyclonal
Speziesreaktivität
rat, human
Hersteller/Markenname
Chemicon®
Methode(n)
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
dry ice
Posttranslationale Modifikation Target
unmodified
Angaben zum Gen
human ... P2RX2(22953)
Spezifität
Immunogen
Kontrollpeptid: Best.-Nr. AG354
Anwendung
Neurowissenschaft
Neurotransmitter & Rezeptoren
Immunhistochemie: 1:500.
Immunzytochemie: 1:500.
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.
ANWENDUNGSHINWEISE FÜR AB5894
IMMUNHISTOCHEMIE
Männliche Sprague-Dawley-Ratten (Körpergewicht 100–150 g) wurden mit Natrium-Pentobarbital betäubt und über die aufsteigende Aorta mit Folgendem perfundiert: 1) 50 ml Ca2+-freie Tyrode-Lösung, gefolgt von 2) einem Formalin-Pikrinsäure-Fixativ (4 % Paraformaldehyd mit 0,4 % Pikrinsäure in 0,16 M Phosphatpuffer, pH 6,9) und 3) 10 % Sucrose in PBS als Frostschutzmittel. Die Gewebe wurden rasch präpariert und über Nacht in 0,1 M Phosphatpuffer (pH 7,4) mit 10 % Sucrose aufbewahrt. Die auf Objektträger aufgebrachten Gewebeschnitte wurden mit Blockierungspuffer 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Der Primärantikörper wurde in Blockierungspuffer auf eine geeignete Arbeitsverdünnung verdünnt. Der Blockierungspuffer wurde entfernt, anschließend wurden die Objektträger bei 2–8 °C für eine Dauer von 18–24 Stunden mit AB5894 (1:500) inkubiert. Nach 3-maligem Spülen in PBS wurden die Schnitte 60 Minuten bei Raumtemperatur mit Cy3-konjugierten Sekundärantikörpern inkubiert. Nach dem Fixieren in einem Gemisch aus PBS und Glycerin (1:3), das 0,1 % p-Phenylendiamin enthielt, wurden die Schnitte mit einem Nikon-Microphot-SA-Epifluoreszenzmikroskop untersucht.
IMMUNZYTOCHEMIE
P2X2-transfizierte Zellen wurden für die indirekte Immunfluoreszenz verarbeitet. Das Medium wurde entfernt und die Zellen wurden vorsichtig 3 Mal mit serumfreiem Medium gewaschen. Nach dem Fixierungsverfahren wurden die Zellen für die indirekte Immunfluoreszenz wie oben beschrieben verarbeitet.
WESTERN BLOTTING
Die Zellmembranextrakte wurden mittels Elektrophorese (8 % Acrylamid) mit SDS unter reduzierenden Bedingungen untersucht und zu einer Nylonmembran übertragen. Die Membranen wurden 1 Stunde bei 2–8 °C mit 0,1 % Tween 20 und 2,5 % Milchpulver (w/v) in PBS blockiert. Die Membranen wurden mit AB5894, im Verhältnis von 1:500 mit demselben Puffer verdünnt, über Nacht bei 2–8 °C inkubiert. Die Membranen wurden gespült und mit HRP-konjugiertem sekundärem Antikörper 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Nach dem Spülen wurden die Membranen mittels erweiterter Chemilumineszenz verarbeitet.
Physikalische Form
Lagerung und Haltbarkeit
Rechtliche Hinweise
Haftungsausschluss
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Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 1
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