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Merck

17-10530

Sigma-Aldrich

ChIPAb+-MED1-Antikörper - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit, purified by affinity chromatography

Synonym(e):

CRSP1, TRAP220, MED1, TRIP-2, ARC205, Mediator of RNA polymerase II transcription subunit 1, Activator-recruited cofactor 205 kDa component, Mediator complex subunit 1, p53 regulatory protein RB18A, Peroxisome proliferator-activated receptor-binding prot

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

Biologische Quelle

rabbit

Qualitätsniveau

Antikörperform

affinity purified immunoglobulin

Klon

polyclonal

Aufgereinigt durch

affinity chromatography

Speziesreaktivität

human, mouse

Hersteller/Markenname

ChIPAb+
Upstate®

Methode(n)

ChIP: suitable
western blot: suitable

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

dry ice

Allgemeine Beschreibung

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-MED1(CRSP1/TRAP220)-Set enthält den MED1-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und positive Kontrollprimer, die eine 85-bp-Verstärkerregion des humanen prostataspezifischen Antigens (PSA) amplifizieren. Der MED1-Antikörper und das Negativkontrolle-IgG werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von MED1-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Spezifität

Aufgrund der Konservierung der Immunogensequenz ist eine weitreichende artenübergreifende Reaktivität zu erwarten.

Immunogen

Epitop: Humanes MED1 (A.S. 1525–1581).
Rekombinantes Protein, das humanem MED1 entspricht (A.S. 1525–1581).

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus hormongehungerten (72 h) LNCaP-Zellen (~1e6 Zelläquivalente je IP), in die anschließend ein Androgenagonist eingebracht wurde (1 µmol/l CI-4AS-1 über Nacht), wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG (Artikelnr. PP64B) oder 2 µg Anti-MED1 (Artikelnr. CS207349) und dem Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10460) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von MED1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für PSA (Artikelnr. CS207340) als positive Stelle und ChIP-Primern für β-Globin (Artikelnr. CS200591) als negative Stelle verifiziert.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf die Protokolle für Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10460) oder EZ-Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10461).

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus hormongehungerten (72 h) LNCaP-Zellen (1e5 und 1e6 Zelläquivalente je IP), in die anschließend ein Androgenagonist eingebracht wurde (1 µmol/l CI-4AS-1 über Nacht), wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG (Artikelnr. PP64B) oder 2 µg Anti-MED1 (Artikelnr. CS207349) und dem Magna ChIP HiSens-Kit (Katalognr. 17-10460) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit MED1 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für PSA (Artikelnr.: CS207340) verifiziert.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10460) oder EZ-Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10461).

Western-Blot-Analyse:
0,04 µg/ml dieses Antikörpers wies MED1 in 5, 15 und 50 µg HeLa-Zelllysat nach.
Forschungs-Unterkategorie
Transkriptionsfaktoren
Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion
Verwenden Sie den durch ChIP validierten polyklonalen ChIPAb+-MED1-Kaninchenantikörper zum Nachweis von MED, auch als Mediator of RNA polymerase II transcription subunit 1 und CRSP1/TRAP220 bekannt.

Verpackung

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: 2,0 μg Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Qualität

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus hormongehungerten (72 h) LNCaP-Zellen (~1e6 Zelläquivalente je IP), in die anschließend ein Androgenagonist eingebracht wurde (1 µmol/l CI-4AS-1 über Nacht), wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG (Artikelnr. PP64B) oder 2 µg Anti-MED1 (Artikelnr. CS207349) und dem Magna ChIP® HiSens-Kit (Katalognr. 17-10460) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit MED1 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für PSA (Artikelnr.: CS207340) verifiziert.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10460) oder EZ-Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10461).

Zielbeschreibung

~168 kDa basierend auf der Sequenz. In Western Blot kann eine höhere Molekülmasse von bis zu 220 kDa gemessen werden.

Physikalische Form

Anti-MED1 (Kaninchen, polyklonal), Artikelnr. CS207349. Ein Fläschchen mit 50 µg affinitätsgereinigtem polyklonalem Kaninchen-Antikörper in 72 μl Puffer mit Tris-Citrat/Phosphatpuffer (pH-Wert 7 bis 8) und 0,09 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 % (0,7 mg/ml Endkonzentration). Bei -20 °C aufbewahren.

Normales Kaninchen-IgG, Artikelnr. PP64B. Ein Fläschchen mit 125 μg aufgereinigtem Kaninchen-IgG in 125 μl Lagerpuffer mit 0,05% Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.

ChIP-Primer, PSA. Artikelnr. CS207340. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für die humane Verstärkerregion von prostataspezifischem Antigen (chr19:51354179-51354263, hg19 build). Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: GCC TGG ATC TGA GAG AGA TAT CAT C
REV: ACA CCT TTT TTT TTC TGG ATT GTT G

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Kontrollen
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für die Verstärkerregion von humanem prostataspezifischen Antigen spezifische Primer.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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Dawei Chen et al.
Cell death & disease, 12(8), 722-722 (2021-07-23)
Emerging evidence has demonstrated that alternative splicing has a vital role in regulating protein function, but how alternative splicing factors can be regulated remains unclear. We showed that the PPM1G, a protein phosphatase, regulated the phosphorylation of SRSF3 in hepatocellular
Yoshimi Yasukawa et al.
Carcinogenesis, 42(2), 180-189 (2020-12-08)
Cancer-associated fibroblasts (CAFs) tend to have tumor-promoting capacity, and can provide therapeutic targets. Even without cancer cells, CAF phenotypes are stably maintained, and DNA methylation and H3K27me3 changes have been shown to be involved. Here, we searched for a potential

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