05-1338
Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper, Klon CMA303
clone CMA303, from mouse
Synonym(e):
H3K4me2, Histone H3 (di methyl K4), H3 histone family, member T, histone 3, H3, histone cluster 3, H3
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
mouse
Qualitätsniveau
Antikörperform
purified immunoglobulin
Antikörper-Produkttyp
primary antibodies
Klon
CMA303, monoclonal
Speziesreaktivität
human, vertebrates
Methode(n)
ChIP: suitable
ELISA: suitable
dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
multiplexing: suitable
western blot: suitable
Isotyp
IgG1κ
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Versandbedingung
wet ice
Posttranslationale Modifikation Target
dimethylation (Lys4)
Angaben zum Gen
human ... H3C1(8350)
Allgemeine Beschreibung
Histone sind hochkonservierte Proteine und dienen bei der Organisation von Zellkern-DNA zu Chromatin als Strukturgerüst. Die vier Haupt-Histone, H2A, H2B, H3 und H4, bilden ein Oktamer (jeweils 2 Moleküle). Anschließend werden 146 DNA-Basenpaare um das Oktamer gewickelt und bilden ein Nukleosom. Histone werden posttranslational modifiziert und diese Modifikationen regulieren die DNA-Transkription, -Reparatur, -Rekombination und -Replikation. Die am häufigsten untersuchten Modifikationen sind Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinylierung. Diese Modifikationen treten überwiegend an N-terminalen und C-terminalen Enden auf, die sich über das Nukleosom-Kernteilchen hinaus erstrecken. Dimethyl-Lysin-4-Histon-H3 (H3K4me2) ist eine transkriptionsaktivierende Chromatinmarkierung und Dimethyl-Histon-H3-Lys4 (H3K4me2) fehlt in Regionen mit DNA-Methylierung. Multipotente hämatopoetische Zellen weisen eine Untergruppe von Genen auf, die differentiell methyliert sind (H3K4me2+/me3-). Diese Gene sind transkriptionell stumm und weisen eine starke Anreicherung bezüglich Linien-spezifischer hämatopoetischer Gene auf, was eine Rolle für die H3K4-Methylierung bei der Differenzierung nahelegt.
Spezifität
Basierend auf der Sequenzhomologie wird eine breite artenübergreifende Kreuzreaktivität erwartet.
Dieser Antikörper erkennt spezifisch das an Lys4 dimethylierte Histon H3. Die Bindungsspezifizität des Antikörpers erlaubt die Phosphorylierung von Thr3 und/oder Modifikationen an Lys91.
Immunogen
Epitop: Dimethyliertes Lys4
Synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–12 von humanem Histon H3 entspricht, an Lys4 dimethyliert, an KLH konjugiert.
Anwendung
Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Maus-IgG oder Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper und dem Magna ChIP G (Art.-Nr. 17-611) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)assoziierten DNA-Fragmenten wurde mittels qPCR unter Verwendung von ChIP-Primern mit GAPDH-kodierender Region verifiziert.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna G ChIP (Art.-Nr. 17-409) oder EZ-ChIP (Art.-Nr. 17-371).
Dot-Blot-Analyse:
Absurance-Histon-H3-Antikörperspezifitäts-Array (Art.-Nr. 16-667) und Absurance-Histon-H2A-, H2B-, H4-Antikörperspezifitäts-Array (Art.-Nr. 16-665), die Histon-Peptide mit verschiedenen Modifikationen enthalten, wurden mit Art.-Nr. 05-1338, Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper, Klon CMA303, bei 2,0 µg/ml (1:500-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit einem Anti-Maus-IgG des Esels, HRP-konjugiert, und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
ChIP-seq-Analyse:
Die Chromatin-Immunpräzipitation wurde mit dem Magna ChIP HiSens-Kit (Art.-Nr. 17-10460), 2 µg Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper (Art.-Nr. 05-1338), 20 µl Protein A/G-Beads und 1e6 vernetztem Chromatin aus HeLa-Zellen durchgeführt, gefolgt von einer DNA-Aufreinigung mit magnetischen Beads. Aus Input- und ChIP-DNA-Proben wurden unter Verwendung von Standardprotokollen mit barcodierten Illumina-Adaptern Bibliotheken erstellt und auf dem Illumina HiSeq-Instrument analysiert. Mehr als sechzehn Millionen Reads von FastQ-Dateien wurden nach der Entfernung von Tags mittels TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/) mit Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) kartiert. Peaks wurden mit MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) identifiziert, wobei Peaks und Reads im UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) von BigWig und BED-Dateien als benutzerdefinierter Track dargestellt werden. Die höchsten 25 % der identifizierten Peaks in den Datensätzen 04-790 und 05-1338 zeigten eine Überlappung von 92 bzw. 90 % mit Peaks, die im Track ENCODE H3K4me2 BROAD Histone für HeLa-S3 identifiziert wurden.
Immunzytochemie:
Die Eignung dieses Antikörpers für die Immunzytochemie wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
Immunpräzipitation:
Die Eignung dieses Antikörpers für die Immunpräzipitation wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
ELISA:
Die Eignung dieses Antikörpers für ELISA wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
Multiplex:
Dieser Antikörper erkennt spezifisch das an Lys4 dimethylierte Histon H3 im Luminex-Assay.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 106 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Maus-IgG oder Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper und dem Magna ChIP G (Art.-Nr. 17-611) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)assoziierten DNA-Fragmenten wurde mittels qPCR unter Verwendung von ChIP-Primern mit GAPDH-kodierender Region verifiziert.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna G ChIP (Art.-Nr. 17-409) oder EZ-ChIP (Art.-Nr. 17-371).
Dot-Blot-Analyse:
Absurance-Histon-H3-Antikörperspezifitäts-Array (Art.-Nr. 16-667) und Absurance-Histon-H2A-, H2B-, H4-Antikörperspezifitäts-Array (Art.-Nr. 16-665), die Histon-Peptide mit verschiedenen Modifikationen enthalten, wurden mit Art.-Nr. 05-1338, Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper, Klon CMA303, bei 2,0 µg/ml (1:500-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit einem Anti-Maus-IgG des Esels, HRP-konjugiert, und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
ChIP-seq-Analyse:
Die Chromatin-Immunpräzipitation wurde mit dem Magna ChIP HiSens-Kit (Art.-Nr. 17-10460), 2 µg Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper (Art.-Nr. 05-1338), 20 µl Protein A/G-Beads und 1e6 vernetztem Chromatin aus HeLa-Zellen durchgeführt, gefolgt von einer DNA-Aufreinigung mit magnetischen Beads. Aus Input- und ChIP-DNA-Proben wurden unter Verwendung von Standardprotokollen mit barcodierten Illumina-Adaptern Bibliotheken erstellt und auf dem Illumina HiSeq-Instrument analysiert. Mehr als sechzehn Millionen Reads von FastQ-Dateien wurden nach der Entfernung von Tags mittels TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/) mit Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) kartiert. Peaks wurden mit MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) identifiziert, wobei Peaks und Reads im UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) von BigWig und BED-Dateien als benutzerdefinierter Track dargestellt werden. Die höchsten 25 % der identifizierten Peaks in den Datensätzen 04-790 und 05-1338 zeigten eine Überlappung von 92 bzw. 90 % mit Peaks, die im Track ENCODE H3K4me2 BROAD Histone für HeLa-S3 identifiziert wurden.
Immunzytochemie:
Die Eignung dieses Antikörpers für die Immunzytochemie wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
Immunpräzipitation:
Die Eignung dieses Antikörpers für die Immunpräzipitation wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
ELISA:
Die Eignung dieses Antikörpers für ELISA wurde von einem externen Labor nachgewiesen.
Multiplex:
Dieser Antikörper erkennt spezifisch das an Lys4 dimethylierte Histon H3 im Luminex-Assay.
Der Anti-Dimethyl-Histon-H3-(Lys4-)Antikörper, Klon CMA303, ist ein monoklonaler Antikörper der Maus zum Nachweis von Dimethyl-Histon-H3 (Lys4), das auch als H3K4me3, Histon H3 (Dimethyl-K4) bekannt ist. Nachgewiesene Leistung in ChIP, DB, ELISA, ICC, IP, WB, Mplex.
Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion
Epigenetik & Zellkernfunktion
Forschungsunterkategorie
Histone
Histone
Qualität
Regelmäßig mittels Western Blot an HeLa-Säureextrakten beurteilt.
Western-Blot-Analyse: Eine 2 μg/ml-Verdünnung (1:500) dieses Antikörpers wies Dimethyl-Histon-H3 (Lys4) in 10 μg HeLa-Säureextrakt nach.
Western-Blot-Analyse: Eine 2 μg/ml-Verdünnung (1:500) dieses Antikörpers wies Dimethyl-Histon-H3 (Lys4) in 10 μg HeLa-Säureextrakt nach.
Zielbeschreibung
Etwa 17 kDa
Physikalische Form
Aufgereinigtes monoklonales IgG1κ der Maus in PBS mit 0,05 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt
Über Protein G aufgereinigt
Lagerung und Haltbarkeit
Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Für maximale Produktrückgewinnung das Fläschchen vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
HeLa-Säureextraktlysat
HeLa-Säureextraktlysat
Sonstige Hinweise
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
Haftungsausschluss
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
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Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
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Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
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DNA methylation dictates histone H3K4 methylation.
Okitsu, Cindy Yen and Hsieh, Chih-Lin
Molecular and cellular biology, 27, 2746-2757 (2007)
Inhibition of lysine-specific demethylase 1 by polyamine analogues results in reexpression of aberrantly silenced genes.
Huang, Yi, et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 104, 8023-8028 (2007)
Lihong Shi et al.
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Enhanced fetal γ-globin synthesis alleviates symptoms of β-globinopathies such as sickle cell disease and β-thalassemia, but current γ-globin-inducing drugs offer limited beneficial effects. We show here that lysine-specific demethylase 1 (LSD1) inhibition by RNAi in human erythroid cells or by
Valentina Karin-Kujundzic et al.
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The Hedgehog (Hh) signaling pathway is essential for normal embryonic development, while its hyperactivation in the adult organism is associated with the development of various cancers. The role of the Hh signaling pathway in ovarian cancer has not been sufficiently
Takashi Miwa et al.
Genes to cells : devoted to molecular & cellular mechanisms, 24(5), 377-389 (2019-04-01)
In Caenorhabditis elegans, germline cells remain transcriptionally silenced during embryogenesis. The transcriptional silencing is achieved by two different mechanisms: One is the inhibition of RNA polymerase II in P2-P4 cells at the establishment stage, and another is chromatin-based silencing in
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