Glycosidases
Les glycosidases, y compris les endoglycosidases et les exoglycosidases, sont principalement utilisées dans la recherche en glycomique pour le séquençage des glycanes, la libération des N et O-glycanes des glycoprotéines et la production de glycoprotéines. Plus précisément :
- Les glycosidases telles que la PNGase Fast, notre peptide-N-glycosidase F recombinante, permettent une déglycosylation complète et rapide des anticorps et des protéines de fusion à immunoglobuline, ainsi que d'autres glycoprotéines, afin de les préparer pour une analyse par chromatographie ou spectrométrie de masse en aval.
- Les polysaccharide lyases et les carbohydrate estérases servent à dégrader les glycosaminoglycanes (mucopolysaccharides) pour préparer des composants polysaccharidiques.
- Les glycosyltransférases sont étudiées pour leur utilisation dans la conception d'une méthode de glycosylation sélective afin d'améliorer les propriétés thérapeutiques des protéines et des anticorps et de réduire l'immunogénicité des tissus xénogéniques.
Pour répondre aux besoins de vos procédures de glycobiologie, nous proposons une large gamme de produits pour l'analyse fonctionnelle et structurale des glycanes, notamment des enzymes de dégradation des glycanes, des glycoprotéines, des protéoglycanes, des glycolipides et des oligosaccharides libres. Notre offre inclut des protéines reconnaissant les glycanes, notamment des lectines et des galectines, et nos enzymes actives sur les sucres, parmi lesquelles vous trouverez des exoglycosidases, des endoglycosidases, des glycosyltransférases et bien d'autres encore. La glycosylation étant l'une des modifications post-traductionnelles les plus courantes et les plus complexes, nos kits GlycoProfile™ ont été mis au point pour le marquage et l'analyse simples et rapides des N-glycanes et O-glycanes des glycoprotéines.
Découvrez ci-dessous des ressources, des kits et des réactifs encore plus innovants pour la glycomique.
Kit de déglycosylation enzymatique des protéines
Les kits de déglycosylation enzymatique des protéines (tels que les produits EDEGLY et NDEGLY) contiennent toutes les enzymes et tous les réactifs nécessaires à l'élimination complète de tous les glucides simples à liaison O et de tous les glucides à liaison N présents dans les glycoprotéines. Cela inclut les glycoformes à liaison O contenant du galactose, de la N-acétylglucosamine et de l'acide sialique. Voici d'autres caractéristiques et avantages de ce kit :
- Déglycosylation de jusqu'à 2 mg de glycoprotéines : suffisant pour un traitement en aval
- Une seule réaction à pH neutre : conservation de la structure peptidique d'origine
- Aucune dégradation des protéines : réalisation de l'étude sur la structure peptidique
- Comprend des exoglycosidases : traitement des O-glycoformes pour libération
- Élimination des sucres liés par des liaisons O contenant de l'acide sialique : analyse plus précise des peptides
- Glycoprotéine témoin fournie : plus grande confiance et meilleure reproductibilité grâce à cette vérification
Kit de N-déglycosylation enzymatique sur gel GlycoProfile™ I
Le kit de N-déglycosylation enzymatique sur gel GlycoProfile™ I élimine les N-glycanes et digère les échantillons de protéines de manière fiable à partir de gels de polyacrylamide unidimensionnels ou bidimensionnels en vue d'une analyse par spectrométrie de masse ou chromatographie liquide haute performance. Ce kit fonctionne bien sur les gels colorés au bleu de Coomassie, au bleu colloïdal et au nitrate d'argent qui ont été correctement décolorés. L'enzyme glycolytique PNGase F (peptide-N-glycosidase F) donne d'excellents résultats lorsqu'elle est utilisée pour la N-déglycosylation sur gel de glycoprotéines et de glycopeptides. La trypsine de qualité protéomique digère efficacement les protéines restantes. Les échantillons dessalés sont ensuite concentrés pour être analysés par spectrométrie de masse, le plus souvent selon des techniques d'ionisation comme la désorption/ionisation laser assistée par matrice (MALDI pour "Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization") ou l'électronébulisation (ESI pour "Electrospray Ionization") et des méthodes d'analyseurs comme le temps de vol (TOF pour "Time of Flight") ou le quadrupôle. Ce kit offre les avantages suivants :
- Déglycosylation et digestion sur gel : réduction de la manipulation des échantillons
- Enzymes ultra pures : sous-produits et activités parasites évités
- Tampon pauvre en sel : suppression des interférences avec l'analyse par spectrométrie de masse
- Réactif de décoloration inclus : gain de temps en évitant la préparation de réactifs supplémentaires
Enzymes supplémentaires pour la glycobiologie
En complément de nos kits de déglycosylation, nous proposons des enzymes glycolytiques pour l'élimination ou la dégradation partielle des glycanes. L'utilisation d'enzymes supplémentaires peut être utile pour certaines structures glycaniques qui résistent aux stratégies de déglycosylation universelles, comme les structures que la PNGase F ne clive pas. En outre, l'hydrolyse séquentielle de chaque monosaccharide des glycanes peut être utilisée dans l'analyse de la structure et de la fonction du composant glycanique.
Ressources apparentées
Informations générales sur la glycobiologie
Glycobiology Brochure
Article : Glycosaminoglycans and Proteoglycans
Article : Glycosyltransferases
Article : Endoglycosidases
Article : What is Hyaluronan?
Article : Sialic Acid
Article : Glycobiology - Carbohydrate Enzymes and Proteins
Article : Glycosphingolipids
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