Marqueurs protéiques

Les marqueurs de poids moléculaire des protéines, parfois appelés étalons de poids moléculaire ("protein ladders" en anglais), permettent d'évaluer le poids moléculaire des protéines d'intérêt et de suivre la progression de la séparation ou du transfert électrophorétique en western blot. Les marqueurs de poids moléculaire non colorés sont généralement constitués d'un mélange de protéines natives ou recombinantes purifiées de poids moléculaire défini. La visualisation de leur emplacement sur un gel ou une membrane nécessite une étape de coloration. Les marqueurs protéiques précolorés permettent de suivre facilement la séparation électrophorétique et l'efficacité du transfert. Il existe également des étalons de poids moléculaire individuels pour les applications d'électrophorèse des protéines, d'électrofocalisation et d'électrophorèse bidimensionnelle sur gel de polyacrylamide.

Étalons de poids moléculaire mPAGE^®

• Les étalons mPage^® Western sont composés de sept protéines recombinantes de 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa et 120 kDa ayant un site de liaison aux IgG qui se lie à la plupart des anticorps. Cela permet de visualiser à la fois le marqueur protéique et les protéines de l'échantillon sur le même western blot sans ajout de réactifs.
• Les étalons mPage^® colorés comprennent un mélange de dix protéines précolorées hautement purifiées, pesant entre 10 kDa et 203 kDa, couplées par liaison covalente à différents chromophores. Les étalons mPage^® colorés sont conçus pour permettre de visualiser la séparation des protéines en électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE), de vérifier l'efficacité du transfert en western blot, et d'évaluer approximativement la taille des protéines.
• Les étalons mPage^® non colorés comprennent un mélange de douze protéines recombinantes non colorées pesant entre 10 kDa et 200 kDa. Les bandes de 85 kDa, 25 kDa et 10 kDa sont plus intenses pour servir de points de référence. Les étalons mPage^® non colorés peuvent être utilisés pour déterminer le poids moléculaire après une électrophorèse SDS-PAGE ou un western blot, ainsi que pour étalonner la mobilité de marqueurs précolorés.

Marqueurs protéiques ColorBurst

Les marqueurs ColorBurst sont composés de huit polypeptides qui ont été réduits chimiquement et conjugués à des colorants brillants. Les marqueurs ColorBurst peuvent être utilisés pour estimer le poids moléculaire d'un échantillon, suivre la progression d'une séparation électrophorétique ou confirmer l'achèvement d'un électroblot.

Marqueurs protéiques SigmaMarker™

Les marqueurs protéiques SigmaMarker™ sont conçus pour être utilisés en SDS-PAGE. Ils couvrent la plage de poids moléculaires communs à la plupart des protéines ou à leurs sous-unités. Ces marqueurs de protéines de poids moléculaire faible ou élevé sont lyophilisés avec un tampon d'échantillon pour être prêts à l'emploi après reconstitution dans de l'eau déionisée. Ces marqueurs sont formulés pour donner une distribution de bandes bien définies, d'intensité approximativement égale après électrophorèse et coloration au bleu de Coomassie.

Marqueurs protéiques Perfect

Les marqueurs protéiques Perfect ont été conçus pour une utilisation de routine en SDS-PAGE afin de permettre une détermination très précise de la taille d'échantillons inconnus. Contrairement à de nombreux marqueurs classiques (comme l'ovalbumine ou la sérum albumine), les marqueurs Perfect ne contiennent pas d'oligosaccharides qui donnent lieu à une migration anormale, à des bandes hétérogènes "floues" ou à une estimation imprécise de la taille. Ces marqueurs sont optimisés pour la coloration au bleu de Coomassie, mais il est également possible de les utiliser en quantités ajustées avec d'autres méthodes de coloration de gel, notamment la coloration argentique et la coloration avec des colorants fluorescents.

Marqueurs de protéines de poids moléculaire ultrafaible

Les marqueurs de protéines de poids moléculaire ultrafaible (poids moléculaire compris entre 1 060 et 26 600) sont utilisés en SDS-PAGE et en western blot. Une fixation est recommandée.

Marqueurs protéiques non dénaturants

Les marqueurs non dénaturants sont utilisés comme étalons pour l'électrophorèse PAGE native. Ils servent également à étalonner les colonnes pour la chromatographie de filtration sur gel.

Marqueurs biotinylés

Ce mélange d'étalons de poids moléculaire biotinylés contient des protéines qui sont conjuguées à la biotine pour servir d'étalons aussi bien en SDS-PAGE qu'en western blot. La visualisation est possible grâce à de la streptavidine/peroxydase, avec un substrat colorimétrique ou luminescent approprié. Ces marqueurs peuvent être détectés simultanément par des techniques d'immunocoloration.