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P6556

Sigma-Aldrich

Protéinase K from Tritirachium album

lyophilized powder, ≥30 units/mg protein

Synonyme(s) :

Endopeptidase K

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About This Item

Numéro CAS:
39450-01-6
Numéro de classification (Commission des enzymes):
3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
Numéro CE :
254-457-8
Numéro MDL:
MFCD00132129
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
32160410
Nomenclature NACRES :
NA.54

Forme

lyophilized powder

Niveau de qualité

300

Activité spécifique

≥30 units/mg protein

Poids mol.

28.93 kDa

Technique(s)

DNA extraction: suitable

Solubilité

H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless

Activité étrangère

Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

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Application

La protéinase K est utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Elle est utilisée pour l′élimination des endotoxines liées aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
Elle est utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo
et elle est utilisée pour la détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
On l′utilise pour le traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps et
pour la digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST). Le produit P6556 est fourni sous forme de poudre lyophilisée. Le produit P6556 a été utilisé pour dégrader la protéine de cristallin humain
Le produit P6556 est fourni sous forme de poudre lyophilisée. Le produit P6556 a été utilisé pour dégrader la protéine de cristallin humain Les essais de « footprinting » à la protéase au moyen de la digestion par la protéinase K peuvent révéler des interactions de surface entre protéines. L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée dans l′étape de pré-hybridation des embryons de poule. Elle a également été employée pour l′enrichissement en PrPSc, une protéine de prion présente dans les échantillons de tremblante du mouton, du hamster et de la souris.
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).

Actions biochimiques/physiologiques

La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp39-His69-Ser224). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.
La protéinase K présente une large gamme de spécificité et dégrade de nombreuses protéines, même dans leur forme native. Elle coupe principalement les liaisons peptidiques au niveau du groupe carboxyle des acides aminés aliphatiques et aromatiques comportant des groupes α-aminés bloqués. Le pH optimal se situe entre 7,5 et 9,0 et le point isoélectrique est 8,9 Ca2+ (1-5 mM)est requis pour l′activation. La protéinase K est inhibée par le diisopropyl fluorophosphate (DIFP) et le fluorure de phényl méthyl sulfonyle (PMSF).

Définition de l'unité

Une unité hydrolyse l′hémoglobine dénaturée par l′urée et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine par min à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).

Souvent commandé avec ce produit

Réf. du produit
Description
Tarif

840857P

16:0-18:1 PA, powder

Pictogrammes

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H315,H319,H334,H335

Classification des risques

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

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Certificats d'analyse (COA)

Lot/Batch Number
118M4089V
50140402
127M4008V
SLCG9189
SLCH0758

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Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists, 229(3), 651-657 (2004-03-03)
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