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P5380

Sigma-Aldrich

Protéase from Bacillus licheniformis

Type VIII, lyophilized powder, 7-15 units/mg solid

Synonyme(s) :

Protéinase from Bacillus licheniformis, Subtilisine A

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About This Item

Numéro CAS:
Numéro de classification (Commission des enzymes):
Numéro CE :
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.54

Source biologique

Bacillus licheniformis

Niveau de qualité

Type

Type VIII

Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

7-15 units/mg solid

Poids mol.

27 kDa

Produit purifié par

crystallization

Solubilité

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble, clear
H2O: soluble, colorless

Activité étrangère

DNase ≤5.0 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.05 Kunitz units/mg solid

Température de stockage

−20°C

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Description générale

Cette enzyme est stable à un pH de 8 à 10 : elle conserve jusqu'à 90 % de son activité pendant 24 heures. Son activité est maximale entre 55 °C et 60 °C.

Spécificité

La subtilisine A fait partie de la famille des endoprotéinases à sérine de type S8. Elle présente une large spécificité, avec une préférence pour un gros résidu non chargé en position P1. Elle hydrolyse les protéines natives et dénaturées et est active en conditions basiques.

Application

Ce produit a été utilisé avec d'autres enzymes pour une protéolyse in situ afin de produire des cristaux appropriés pour une détermination structurelle. Il a également été employé pour l'isolement de mitochondries sous-sarcolemmiques (SS) et intermyofibrillaires (IMF) utilisables dans des études fonctionnelles in vitro.
Il s'agit d'une enzyme protéolytique isolée durant la fermentation de Bacillus licheniformis. C'est une endoprotéinase à sérine qui présente une large spécificité pour les protéines natives et dénaturées et qui est active en conditions basiques.

Actions biochimiques/physiologiques

La protéase dégrade les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Les protéases sont inactivées par des inhibiteurs de site actif à sérine tels que le fluorure de phénylméthylsulfonyle (PMSF) et le diisopropylfluorophosphate. La protéase réf. P5380 est une endoprotéinase à sérine qui présente une large spécificité pour les protéines natives et dénaturées et qui est active en conditions basiques. Elle est active dans certains solvants organiques tels que l'octane anhydre.

Propriétés physiques

La subtilisine est une chaîne polypeptidique simple, non glycosylée, dépourvue de pont disulfure, d'un poids moléculaire de 27 kDa.

Définition de l'unité

Une unité hydrolyse la caséine, produisant une couleur équivalente à 1,0 μmol (181 μg) de tyrosine par minute, à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).

Mention d'avertissement

Danger

Classification des risques

Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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Protocoles

To standardize a procedure for the enzymatic assay of Protease using Casein as a substrate.

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