SCR150
Test de détection d'ALDH AldeRed®
Synonyme(s) :
ALDH Assay, Aldehyde Dehydrogenase Assay, Cancer Stem Cell Assay
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About This Item
Code UNSPSC :
12352207
eCl@ss :
32161000
Nomenclature NACRES :
NA.84
Produits recommandés
Technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
flow cytometry: suitable
Niveau de qualité
Fluorescence
λex 488 nm
λex 532 nm
λem 615 nm
Méthode de détection
fluorometric
Conditions d'expédition
wet ice
Description générale
Le kit de détection d'ALDH AldeRed offre aux chercheurs du cancer et des cellules souches de nouvelles capacités pour l'isolement et la caractérisation des cellules vivantes. Le réactif AldeRed est un substrat de l'aldéhyde déshydrogénase (ALDH) fluorescent et décalé vers le rouge, qui permet d'identifier et d'isoler les cellules par cytométrie en flux avec utilisation simultanée de la fluorescence verte sur des lignées de cellules, des anticorps, des animaux transgéniques et des tests avec rapporteur.
Découvrez-en plus sur AldeRed dans Nature Communications! (En savoir plus maintenant !)
L'activité élevée d'ALDH sert de marqueur universel des cellules souches normales et malignes. Les cellules peuvent être identifiées et isolées en fonction de l'activité enzymatique d'ALDH, une enzyme détoxifiante responsable de l'oxydation de sous-produits d'aldéhyde dangereux. Le marqueur ALDH a été utilisé pour isoler les cellules souches cancéreuses de diverses tumeurs malignes humaines, notamment au niveau de la vessie, du sein, du col de l'utérus, du côlon, de la tête et du cou, du foie, des poumons, du pancréas, de la prostate et des ovaires. Le test AldeRed utilise un substrat de l'ALDH fluorescent et non toxique (AldeRed 588-A), qui diffuse librement dans les cellules intactes et viables, mais reste piégé à l'intérieur des cellules une fois converti par l'ALDH en l'acide correspondant. La quantité de fluorescence produite est proportionnelle à l'activité de l'ALDH dans les cellules et est mesurée par cytométrie en flux, permettant ainsi le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). Ce kit contient du diéthylaminobenzaldéhyde (DEAB), un inhibiteur de l'ALDH utilisé pour le contrôle négatif du test, lui-même nécessaire à l'évaluation du bruit de fond de la fluorescence.
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L'activité élevée d'ALDH sert de marqueur universel des cellules souches normales et malignes. Les cellules peuvent être identifiées et isolées en fonction de l'activité enzymatique d'ALDH, une enzyme détoxifiante responsable de l'oxydation de sous-produits d'aldéhyde dangereux. Le marqueur ALDH a été utilisé pour isoler les cellules souches cancéreuses de diverses tumeurs malignes humaines, notamment au niveau de la vessie, du sein, du col de l'utérus, du côlon, de la tête et du cou, du foie, des poumons, du pancréas, de la prostate et des ovaires. Le test AldeRed utilise un substrat de l'ALDH fluorescent et non toxique (AldeRed 588-A), qui diffuse librement dans les cellules intactes et viables, mais reste piégé à l'intérieur des cellules une fois converti par l'ALDH en l'acide correspondant. La quantité de fluorescence produite est proportionnelle à l'activité de l'ALDH dans les cellules et est mesurée par cytométrie en flux, permettant ainsi le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). Ce kit contient du diéthylaminobenzaldéhyde (DEAB), un inhibiteur de l'ALDH utilisé pour le contrôle négatif du test, lui-même nécessaire à l'évaluation du bruit de fond de la fluorescence.
Application
• Pour une excitation et une émission optimales d'AldeRed 588-A, utilisez une combinaison de laser bleu (488 nm) ou de laser vert (532 nm) avec un détecteur PE-rouge Texas (615 nm). La détection dans les canaux de mesure proximaux (p. ex., PE) est également possible, mais peut affecter le delta d'intensité moyenne de fluorescence (IMF) entre l'échantillon test et l'échantillon témoin traité au DEAB.
• Toutes les cellules vivantes intactes (même avec une faible expression d'ALDH) deviennent fluorescentes après exposition à l'AldeRed 588-A activé. La génération d'un témoin traité au DEAB est nécessaire pour chaque échantillon de cellules afin d'établir le niveau de référence de la fluorescence.
• Manipuler tous les réactifs à l'aide de techniques aseptiques.
• Toutes les cellules vivantes intactes (même avec une faible expression d'ALDH) deviennent fluorescentes après exposition à l'AldeRed 588-A activé. La génération d'un témoin traité au DEAB est nécessaire pour chaque échantillon de cellules afin d'établir le niveau de référence de la fluorescence.
• Manipuler tous les réactifs à l'aide de techniques aseptiques.
Domaine de recherche
Recherche sur les cellules souches
Apoptose et cancer
Recherche sur les cellules souches
Apoptose et cancer
Composants
1. Réactif AldeRed (réf. CS216596) : Un (1) flacon contenant 50 µg de réactif AldeRed en poudre.
2. Réactif DEAB (réf. CS216595) : Un (1) flacon contenant 1 ml de réactif DEAB (diéthylaminobenzaldéhyde).
3. Acide chlorhydrique (2N) (réf. CS216594) : Un (1) flacon contenant 1,5 ml d'acide chlorhydrique 2N.
4. Diméthylsulfoxyde (réf. CS216593) : Un (1) flacon contenant 1,5 ml de diméthylsulfoxyde (DMSO).
5. Tampon de réaction AldeRed (réf. CS216592) : Quatre (4) flacons contenant chacun 25 ml de tampon de réaction AldeRed.
6. Vérapamil (réf. CS220012) : Quatre (4) flacons contenant chacun 615 µg de vérapamil en poudre.
2. Réactif DEAB (réf. CS216595) : Un (1) flacon contenant 1 ml de réactif DEAB (diéthylaminobenzaldéhyde).
3. Acide chlorhydrique (2N) (réf. CS216594) : Un (1) flacon contenant 1,5 ml d'acide chlorhydrique 2N.
4. Diméthylsulfoxyde (réf. CS216593) : Un (1) flacon contenant 1,5 ml de diméthylsulfoxyde (DMSO).
5. Tampon de réaction AldeRed (réf. CS216592) : Quatre (4) flacons contenant chacun 25 ml de tampon de réaction AldeRed.
6. Vérapamil (réf. CS220012) : Quatre (4) flacons contenant chacun 615 µg de vérapamil en poudre.
Qualité
• Chaque lot est testé en mesurant l'activité ALDH dans des cellules SK-BR-3 par cytométrie en flux.
• Le réactif AldeRed® est pur à 95 % (PMR).
• Le réactif AldeRed® est pur à 95 % (PMR).
Stockage et stabilité
• Conserver le kit entre 2 et 8 °C.
• Le réactif AldeRed reconstitué et activé peut être conservé en aliquotes à -20 °C, à l'abri de la lumière, jusqu'à 1 an maximum. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées.
• Le tampon de réaction AldeRed Assay Buffer supplémenté au vérapamil peut être conservé en aliquotes entre 2 °C et 8 °C jusqu'à 3 mois maximum.
• Le réactif AldeRed reconstitué et activé peut être conservé en aliquotes à -20 °C, à l'abri de la lumière, jusqu'à 1 an maximum. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées.
• Le tampon de réaction AldeRed Assay Buffer supplémenté au vérapamil peut être conservé en aliquotes entre 2 °C et 8 °C jusqu'à 3 mois maximum.
Informations légales
ALDERED is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Clause de non-responsabilité
Sauf indication contraire dans notre catalogue ou toute autre documentation associée au(x) produit(s), nos produits sont uniquement destinés à la recherche et ne sauraient être utilisés à d'autres fins, ce qui inclut, sans s'y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations diagnostiques in vitro, les utilisations thérapeutiques ex vivo ou in vivo, ou tout type de consommation ou d'application chez l'être humain ou chez l'animal.
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Met. Corr. 1
Code de la classe de stockage
3 - Flammable liquids
Point d'éclair (°F)
55.4 °F
Point d'éclair (°C)
13 °C
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Articles
AldeRed™ 588-A is a red fluorescent live cell probe that detects ALDH activity used to identify cancer stem cells and progenitor cells in culture. Cancer stem cells (CSCs) are subpopulations of cancer cells that can self-renew, generate diverse cells in the tumor mass, and sustain tumorigenesis. Some researchers believe that cancer arises from cancer stem cells that originate as a result of mutational hits on normal stem cells.
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