CC161-1050UG
Substrat de laminine ECMatrix-511 Silk E8
Xeno-free laminin-511 coating for feeder-free pluripotent stem cell cultures
Synonyme(s) :
ECMatrix E8 Substrate, Laminin Substrate
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About This Item
Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.81
Produits recommandés
Description
1050 μg (Silkworm derived)
Forme
liquid
Conditionnement
pkg of 6 X 175 μg
Technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
Température de stockage
2-8°C
Description générale
"Le substrat ECMatrix permet de mettre en place des procédures de travail plus simples pour le traitement des cellules souches pluripotentes induites (CSPi) humaines. Nous gagnons du temps en n'ayant plus besoin de pré-enduire notre matériel de culture, tout en maintenant des cultures de cellules souches pluripotentes de haute qualité." - Chercheur, groupe Bioprocédés de thérapies cellulaires.
"Les cellules souches embryonnaires (SE) humaines cultivées sur le substrat ECMatrix présentent une grande viabilité cellulaire et une forte prolifération et ont pu se différencier après plusieurs repiquages. De plus, le substrat nous fait gagner du temps car nous n'avons plus besoin de pré-enduire le matériel de culture." - Scientifique sénior spécialiste des cellules souches, groupe Développement de procédés de médecine régénérative.
Les cellules souches pluripotentes humaines (CSE et CSPi) expriment principalement le type d'intégrine α6β1 et peuvent donc être maintenues de manière stable et cultivées efficacement sans cellules nourricières sur des récipients de culture enduits de sa partenaire de liaison, la laminine-511. Toutefois, la laminine-511 n'est pas adaptée à la production à grande échelle en raison de son haut poids moléculaire et de sa nature hétérotrimère. Le groupe du professeur Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) a résolu ce problème en produisant un fragment E8 recombinant de la laminine-511 à grande échelle, conservant la totalité de l'activité de liaison à l'intégrine.
"Les cellules souches embryonnaires (SE) humaines cultivées sur le substrat ECMatrix présentent une grande viabilité cellulaire et une forte prolifération et ont pu se différencier après plusieurs repiquages. De plus, le substrat nous fait gagner du temps car nous n'avons plus besoin de pré-enduire le matériel de culture." - Scientifique sénior spécialiste des cellules souches, groupe Développement de procédés de médecine régénérative.
Les cellules souches pluripotentes humaines (CSE et CSPi) expriment principalement le type d'intégrine α6β1 et peuvent donc être maintenues de manière stable et cultivées efficacement sans cellules nourricières sur des récipients de culture enduits de sa partenaire de liaison, la laminine-511. Toutefois, la laminine-511 n'est pas adaptée à la production à grande échelle en raison de son haut poids moléculaire et de sa nature hétérotrimère. Le groupe du professeur Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) a résolu ce problème en produisant un fragment E8 recombinant de la laminine-511 à grande échelle, conservant la totalité de l'activité de liaison à l'intégrine.
Application
Revêtement de laminine-511 exempt de xéno-contaminants pour cultures de cellules souches pluripotentes sans cellules nourricières, 1050 μg (dérivé du ver à soie)
Caractéristiques et avantages
Le substrat de laminine ECMatrix-511 E8 peut être utilisé pour la culture de cellules souches pluripotentes dans des conditions exemptes de cellules nourricières avec de nombreux avantages supplémentaires par rapport aux méthodes traditionnelles, notamment :
- Format sans contaminants animaux ni xéno-contaminants : uniforme d'un lot à l'autre, sans qu'aucun précriblage ne soit nécessaire.
- Pas besoin de pré-enduire les plaques : gagnez du temps en l'ajoutant simplement lors du repiquage des cellules.
- Permet de repiquer des cellules isolées sans utiliser l'inhibiteur de kinase ROCKi : idéal pour l'édition du type CRISPR ou l'isolement de clones.
- Taux d'adhésion et vitesse de croissance plus élevés : pour démarrer plus rapidement vos expériences.
- Facile à manipuler : pas besoin de refroidir les consommables de culture cellulaire.
Conditionnement
1050 μg (6 x 175 μg)
Composants
6 x 175 μg de substrat de laminine ECMatrix-511 E8 (0,5 mg/ml dans du PBS). Protéine exprimée dans un cocon de ver à soie transgénique.
Qualité
- Pureté (SDS-Page) : > 95 %
- Analyse d'endotoxines : = 750 UE/mg
- Analyse de mycoplasmes : Négatif
- Essai de stérilité : Négatif
- Test de liaison à l'intégrine (kDa) : = 10 nM
Notes préparatoires
En fonction de l'application, les cellules souches pluripotentes peuvent être cultivées selon une méthode avec ou sans pré-enduction.
Méthode sans pré-enduction
1. Détacher les cellules sous forme de petits amas ou de cellules individuelles en utilisant Accutase.
2. Ajouter le substrat ECMatrix-511 à du milieu frais à une concentration finale de 0,25 μg/cm2 (par exemple : pour un puits d'une plaque à 6 puits, ajouter 5 μl de la solution mère à 0,5 mg/ml).
3. Ajouter les cellules au mélange ECMatrix-511/milieu et cultiver les cellules à la densité souhaitée.
Méthode avec pré-enduction
1. Diluer la solution mère à 0,5 mg/ml avec du PBS stérile jusqu'à obtenir une solution de travail à 2,5 μg/ml.
2. Enduire d'ECMatrix-511 les supports à une concentration de 0,25 μg/cm2 (par exemple, pour un puits d'une plaque à 6 puits, ajouter 1 ml de la solution de travail à 2,5 μg/ml).
3. Incuber pendant 1 heure à 37 °C, 3 heures à température ambiante ou toute une nuit à 4 °C.
4. Avant utilisation, retirer de la surface enduite le fluide restant (ne pas rincer).
5. Détacher les cellules sous forme de petits amas en utilisant Accutase.
6. Cultiver les cellules à la densité souhaitée.
Remarque : Ne pas laisser sécher les plaques, centrifuger brièvement tous les liquides dans le tube avant utilisation, et éviter les congélations-décongélations répétées.
Méthode sans pré-enduction
1. Détacher les cellules sous forme de petits amas ou de cellules individuelles en utilisant Accutase.
2. Ajouter le substrat ECMatrix-511 à du milieu frais à une concentration finale de 0,25 μg/cm2 (par exemple : pour un puits d'une plaque à 6 puits, ajouter 5 μl de la solution mère à 0,5 mg/ml).
3. Ajouter les cellules au mélange ECMatrix-511/milieu et cultiver les cellules à la densité souhaitée.
Méthode avec pré-enduction
1. Diluer la solution mère à 0,5 mg/ml avec du PBS stérile jusqu'à obtenir une solution de travail à 2,5 μg/ml.
2. Enduire d'ECMatrix-511 les supports à une concentration de 0,25 μg/cm2 (par exemple, pour un puits d'une plaque à 6 puits, ajouter 1 ml de la solution de travail à 2,5 μg/ml).
3. Incuber pendant 1 heure à 37 °C, 3 heures à température ambiante ou toute une nuit à 4 °C.
4. Avant utilisation, retirer de la surface enduite le fluide restant (ne pas rincer).
5. Détacher les cellules sous forme de petits amas en utilisant Accutase.
6. Cultiver les cellules à la densité souhaitée.
Remarque : Ne pas laisser sécher les plaques, centrifuger brièvement tous les liquides dans le tube avant utilisation, et éviter les congélations-décongélations répétées.
Stockage et stabilité
Les substrats de laminine ECMatrix-511 E8 doivent être conservés entre 2 et 8 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées et protéger de la lumière.
Clause de non-responsabilité
Sauf indication contraire dans notre catalogue ou tout autre document associé au(x) produit(s), nos produits sont uniquement destinés aux activités de recherche et ne sauraient être utilisés à d'autres fins, ce qui inclut, sans toutefois s'y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations diagnostiques in vitro, les utilisations thérapeutiques ex vivo ou in vivo, ou tout type de consommation ou d'application chez l'homme ou l'animal.
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Certificats d'analyse (COA)
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