ABN83
Anticorps anti-transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT)
serum, from guinea pig
Synonyme(s) :
Solute carrier family 17 member 9
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41
Produits recommandés
Source biologique
guinea pig
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
serum
Type de produit anticorps
primary antibodies
Clone
polyclonal
Espèces réactives
mouse, rat
Technique(s)
immunofluorescence: suitable
western blot: suitable
Numéro d'accès NCBI
Numéro d'accès UniProt
Conditions d'expédition
dry ice
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Informations sur le gène
mouse ... Slc17A9(228993)
rat ... Slc17A9(362287)
Description générale
La protéine VNUT (UniProt ; aussi connue sous les noms de transporteur vésiculaire de nucléotides, et "solute carrier family 17 member 9") est codée par le gène Slc17a9 (aussi appelé Vnut) (identifiant du gène : 228993) chez les espèces murines. VNUT fait partie de la famille des transporteurs d'anion, qui médie l'accumulation active de nucléotides (c'est-à-dire ATP, ADP et UTP) dans les vésicules de sécrétion, ainsi que l'exocytose de l'ATP dans divers types de tissu. La protéine VNUT est exprimée par les cellules amacrines/interplexiformes (IPC) dopaminergiques (DA) positives à la tyrosine hydroxylase/TH de la rétine, ainsi que par les neurones DA et non DA du mésencéphale. En plus du produit de transcription de 447 acides aminés du gène Slc17a9 (NM_183161), des isoformes codant pour des protéines putatives ont été prédites par analyse computationnelle automatisée (X1, XM_006500589; X2 , XM_006500590 ; X3, XM_006500591). Deux bandes correspondant à des tailles de protéine de ~75 et ~50 kDa ont été identifiées par immunoblotting dans des tissus rétiniens et corticaux, la bande de 75 kDa représentant l'isoforme de VNUT canonique de 447 a.a. et celle de ~50 kDa représentant probablement l'isoforme X1/X2. Une forme de ~60 kDa, représentant soit une autre forme épissée, soit une forme moins glycosylée, est également signalée. La protéine VNUT murine est une protéine vésiculaire à 11 domaines transmembranaires (a.a. 40-60, 74-94, 103-123, 129-149, 169-189, 192-212, 252-272, 287-307, 327-347, 380-400, 413-433), comportant une extrémité N-terminale extracellulaire/vacuolaire (a.a. 1-39), une queue C-terminale cytoplasmique (a.a. 434-447), ainsi que 5 boucles cytoplasmiques et 5 boucles extracellulaires/vacuolaires entre les deux.
Spécificité
Cet antisérum polyclonal de cochon d'Inde a permis de détecter les bandes cibles de VNUT correspondant à ~75 kDa, ~60 kDa et ~50 kDa (isoformes X1/X2 de VNUT) dans des homogénats rétiniens et corticaux murins. Le blocage du peptide immunogène a supprimé la détection des bandes cibles.
Immunogène
Peptide linéaire conjugué à de la KLH correspondant à une séquence issue de la seconde boucle extracellulaire du transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT) de souris.
Épitope : Seconde boucle extracellulaire.
Application
Analyse par immunofluorescence : Une dilution au 1/1000e d'un lot représentatif a permis d'immunomarquer les cellules du type amacrine/interplexiforme (IPC) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de tissu rétinien vertical de rat et de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et inclus dans du milieu OCT, et de rétines de rat et de souris montées à plat (avec la permission du Dr Erica Fletcher, université de Melbourne, Australie).
Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e d'un lot représentatif a permis de détecter la protéine VNUT complète recombinante ainsi que la protéine VNUT endogène dans un extrait de rétine de souris (avec la permission du Dr Erica Fletcher, université de Melbourne, Australie).
Analyse par immunofluorescence : Une dilution au 1/1000e d'un lot représentatif a permis d'immunomarquer les neurones VNUT-positifs dans la substantia nigra (SN) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de cerveau de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et flottant librement (avec la permission du Dr Erica Fletcher, université de Melbourne, Australie).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis d'immunomarquer les cellules du type amacrine/interplexiforme (IPC) tyrosine hydroxylase/TH-positives dans la couche nucléaire interne (CNI) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de tissu rétinien vertical de rat et de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et inclus dans du milieu OCT, et de rétine de souris montée à plat (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis d'immunomarquer les neurones dopaminergiques tyrosine hydroxylase/TH-positifs dans la substantia nigra (SN) et l'aire tegmentale ventrale (ATV) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de cerveau de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et flottant librement (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter les isoformes de VNUT correspondant à ~75 kDa et ~50 kDa (X1/X2) dans des homogénats rétiniens et corticaux murins, tandis qu'aucune expression de VNUT n'a été détectée dans un homogénat de rein. Le blocage du peptide immunogène a supprimé la détection des bandes cibles (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e d'un lot représentatif a permis de détecter la protéine VNUT complète recombinante ainsi que la protéine VNUT endogène dans un extrait de rétine de souris (avec la permission du Dr Erica Fletcher, université de Melbourne, Australie).
Analyse par immunofluorescence : Une dilution au 1/1000e d'un lot représentatif a permis d'immunomarquer les neurones VNUT-positifs dans la substantia nigra (SN) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de cerveau de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et flottant librement (avec la permission du Dr Erica Fletcher, université de Melbourne, Australie).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis d'immunomarquer les cellules du type amacrine/interplexiforme (IPC) tyrosine hydroxylase/TH-positives dans la couche nucléaire interne (CNI) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de tissu rétinien vertical de rat et de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et inclus dans du milieu OCT, et de rétine de souris montée à plat (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis d'immunomarquer les neurones dopaminergiques tyrosine hydroxylase/TH-positifs dans la substantia nigra (SN) et l'aire tegmentale ventrale (ATV) par coloration immunohistochimique en fluorescence de cryocoupes de cerveau de souris fixé avec 4 % de paraformaldéhyde et flottant librement (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter les isoformes de VNUT correspondant à ~75 kDa et ~50 kDa (X1/X2) dans des homogénats rétiniens et corticaux murins, tandis qu'aucune expression de VNUT n'a été détectée dans un homogénat de rein. Le blocage du peptide immunogène a supprimé la détection des bandes cibles (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Domaine de recherche
Neurosciences
Neurosciences
L'utilisation de cet anticorps anti-transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT) a été validée en WB et IF pour la détection du transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT).
Sous-domaine de recherche
Neurosciences du développement
Neurosciences du développement
Qualité
Produit évalué par western blotting sur du lysat de tissu cérébral de souris.
Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter le transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT) dans 10 µg de lysat de tissu cérébral de souris.
Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter le transporteur vésiculaire de nucléotides (VNUT) dans 10 µg de lysat de tissu cérébral de souris.
Description de la cible
~75/60/50 kDa (poids observés). La taille de la bande cible apparaît plus grande que le poids moléculaire calculé, qui est de 48,48 kDa, en raison de la glycosylation. Une ou plusieurs bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats.
Forme physique
Produit non purifié
Sérum polyclonal de cochon d'Inde contenant 0,05 % d'azoture de sodium.
Stockage et stabilité
Stable pendant 1 an à -20 °C à partir de la date de réception.
Recommandations d'utilisation : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Recommandations d'utilisation : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique correspondant spécifiquement au lot utilisé.
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10 - Combustible liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
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