17-10191
Test de cicatrisation Cell Comb™
Synonyme(s) :
Cell layer wound repair assay
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About This Item
Produits recommandés
Fabricant/nom de marque
Cell Comb™
Chemicon®
QCM
Niveau de qualité
Technique(s)
activity assay: suitable
cell based assay: suitable
western blot: suitable
Conditions d'expédition
ambient
Description générale
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La migration cellulaire peut être étudiée par diverses méthodes, mais le test de cicatrisation reste une méthode très populaire en raison de la simplicité des matériaux requis, de la configuration expérimentale, de la collecte et de l'interprétation des données (Lian, C., et al., 2007; Cory, G., 2011). Le test de cicatrisation est généralement initié en grattant une monocouche de cellules confluentes avec une pointe de pipette pour créer une ouverture étroite ressemblant à une blessure. Peu après la blessure, les cellules situées au bord de la blessure entament un programme de migration dans l'ouverture créée, processus qui se poursuit jusqu'à ce que l'ouverture soit entièrement repeuplée de cellules. L'étendue de la fermeture de la plaie est généralement observée au microscope optique et les modèles d'expression des protéines au cours du processus de cicatrisation peuvent être caractérisés par immunofluorescence.
Les progrès dans la compréhension des mécanismes de réparation des monocouches de cellules blessées ont été facilités par le développement de méthodes permettant d'effectuer les tests dans des plaques multipuits. Ces méthodes consistent notamment à infliger des blessures à des monocouches existantes dans les puits, ou à occlure le centre du puits pendant la formation de la monocouche pour créer une ouverture (Yarrow, J.C., et al., 2004 ; Simpson K.J., et al., 2008 ; Gough, W., et al., 2011). Chaque méthode implique ensuite la quantification de l'étendue de la migration cellulaire dans l'ouverture créée.
Toutefois, ces méthodes ne sont pas optimales pour l'analyse biochimique des événements moléculaires médiateurs de la réparation des plaies. Par exemple, la petite taille d'une blessure engendrée par une pointe de pipette fournit un matériel insuffisant et inadéquat pour l'analyse biochimique. L'utilisation de la même pointe de pipette pour gratter une monocouche de cellules dans une plaque plus grande est fastidieuse et non reproductible, et la proportion de cellules migrantes par rapport aux cellules quiescentes est faible. Plusieurs méthodes ont été décrites pour augmenter l'échelle du test de cicatrisation en créant des blessures multiples dans les monocouches de cellules, mais ces méthodes nécessitent des outils spécialisés (Turchi, L., et al., 2002 ; Lauder, H., et al., 1998).
EMD Millipore a mis au point le test de cicatrisation Cell Comb™ pour répondre au besoin d'un outil facile à utiliser pour créer de multiples blessures par grattage. Le test en instance de brevet Cell Comb<TMSYMBOL></TMSYMBOL> a été optimisé pour appliquer un champ d'éraflures de haute densité afin de maximiser la surface des bords de la blessure, tout en laissant un nombre suffisant de cellules intactes pour migrer dans l'ouverture créée. Cette forme de blessure à haute densité crée une proportion élevée de cellules migrantes par rapport aux cellules monocouches quiescentes, ce qui permet une détection sensible des événements biochimiques qui se produisent, en particulier dans la population de cellules migrantes.
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La migration cellulaire peut être étudiée par diverses méthodes, mais le test de cicatrisation reste une méthode très populaire en raison de la simplicité des matériaux requis, de la configuration expérimentale, de la collecte et de l'interprétation des données (Lian, C., et al., 2007; Cory, G., 2011). Le test de cicatrisation est généralement initié en grattant une monocouche de cellules confluentes avec une pointe de pipette pour créer une ouverture étroite ressemblant à une blessure. Peu après la blessure, les cellules situées au bord de la blessure entament un programme de migration dans l'ouverture créée, processus qui se poursuit jusqu'à ce que l'ouverture soit entièrement repeuplée de cellules. L'étendue de la fermeture de la plaie est généralement observée au microscope optique et les modèles d'expression des protéines au cours du processus de cicatrisation peuvent être caractérisés par immunofluorescence.
Les progrès dans la compréhension des mécanismes de réparation des monocouches de cellules blessées ont été facilités par le développement de méthodes permettant d'effectuer les tests dans des plaques multipuits. Ces méthodes consistent notamment à infliger des blessures à des monocouches existantes dans les puits, ou à occlure le centre du puits pendant la formation de la monocouche pour créer une ouverture (Yarrow, J.C., et al., 2004 ; Simpson K.J., et al., 2008 ; Gough, W., et al., 2011). Chaque méthode implique ensuite la quantification de l'étendue de la migration cellulaire dans l'ouverture créée.
Toutefois, ces méthodes ne sont pas optimales pour l'analyse biochimique des événements moléculaires médiateurs de la réparation des plaies. Par exemple, la petite taille d'une blessure engendrée par une pointe de pipette fournit un matériel insuffisant et inadéquat pour l'analyse biochimique. L'utilisation de la même pointe de pipette pour gratter une monocouche de cellules dans une plaque plus grande est fastidieuse et non reproductible, et la proportion de cellules migrantes par rapport aux cellules quiescentes est faible. Plusieurs méthodes ont été décrites pour augmenter l'échelle du test de cicatrisation en créant des blessures multiples dans les monocouches de cellules, mais ces méthodes nécessitent des outils spécialisés (Turchi, L., et al., 2002 ; Lauder, H., et al., 1998).
EMD Millipore a mis au point le test de cicatrisation Cell Comb™ pour répondre au besoin d'un outil facile à utiliser pour créer de multiples blessures par grattage. Le test en instance de brevet Cell Comb<TMSYMBOL></TMSYMBOL> a été optimisé pour appliquer un champ d'éraflures de haute densité afin de maximiser la surface des bords de la blessure, tout en laissant un nombre suffisant de cellules intactes pour migrer dans l'ouverture créée. Cette forme de blessure à haute densité crée une proportion élevée de cellules migrantes par rapport aux cellules monocouches quiescentes, ce qui permet une détection sensible des événements biochimiques qui se produisent, en particulier dans la population de cellules migrantes.
Application
Domaine de recherche
Structure cellulaire
Structure cellulaire
Le test de cicatrisation Cell Comb a été optimisé pour appliquer un champ d'éraflures de haute densité afin de maximiser la surface des bords de la blessure, tout en laissant suffisamment de cellules intactes pour migrer dans l'ouverture créée.
Le test de cicatrisation en instance de brevet Cell Comb™ d'EMD Millipore a été mis au point pour répondre au besoin d'un outil facile à utiliser pour créer de multiples blessures par grattage. Le test Cell Comb a été optimisé pour appliquer un champ d'éraflures de haute densité afin de maximiser la surface des bords de la blessure, tout en laissant un nombre suffisant de cellules intactes pour migrer dans l'ouverture créée. Cette forme de blessure à haute densité crée une proportion élevée de cellules migrantes par rapport aux cellules monocouches quiescentes, ce qui permet une détection sensible des événements biochimiques qui se produisent, en particulier dans la population de cellules migrantes.
Conditionnement
Suffisamment de matériel pour effectuer 6 tests de cicatrisation
Composants
Cell Comb : quantité de 6 peignes jetables, emballés individuellement.
Plaques de culture cellulaire rectangulaires : quantité de 6 plaques de 86 mm × 128 mm traitées pour la culture cellulaire, emballées individuellement.
Les peignes Cell Comb et les plaques de culture cellulaire ont été soumis à une irradiation par faisceau d'électrons afin de minimiser la possibilité de contamination.
Plaques de culture cellulaire rectangulaires : quantité de 6 plaques de 86 mm × 128 mm traitées pour la culture cellulaire, emballées individuellement.
Les peignes Cell Comb et les plaques de culture cellulaire ont été soumis à une irradiation par faisceau d'électrons afin de minimiser la possibilité de contamination.
Stockage et stabilité
Conserver les peignes Cell Comb et les plaques de culture cellulaire à température ambiante. À utiliser dans un délai de 1 un an à compter de la date de réception.
Informations légales
CELL COMB is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Clause de non-responsabilité
Sauf indication contraire dans notre catalogue ou toute autre documentation associée au(x) produit(s), nos produits sont uniquement destinés à la recherche et ne sauraient être utilisés à d'autres fins, ce qui inclut, sans s'y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations diagnostiques in vitro, les utilisations thérapeutiques ex vivo ou in vivo, ou tout type de consommation ou d'application chez l'être humain ou chez l'animal.
Code de la classe de stockage
10 - Combustible liquids
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The Journal of biological chemistry, 292(16), 6600-6620 (2017-02-27)
Endothelial nitric-oxide synthase (eNOS) and its bioactive product, nitric oxide (NO), mediate many endothelial cell functions, including angiogenesis and vascular permeability. For example, vascular endothelial growth factor (VEGF)-mediated angiogenesis is inhibited upon reduction of NO bioactivity both in vitro and
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