Zellmigrations- & Zellinvasionsassays

Die Krebsmetastasierung ist das kumulative Ergebnis mehrerer Veränderungen in Tumorzellen und ihrer Mikroumgebung, die es den Zellen ermöglichen, in gesundes Gewebe zu migrieren oder einzudringen. Unser Portfolio an Migrations- und Invasionsassays sowie chemotaktischen und haptotaktischen Boyden-Kammer-Assays gibt Forschern die Möglichkeit, die Bedingungen zu simulieren, denen normale und metastasierende Zellen in vivo ausgesetzt sind.

Zellmigrationsassays

Die Zellmigration ist von grundlegender Bedeutung für die Embryonalentwicklung, die Angiogenese, die Wundheilung, die Immunantwort und bei Entzündungen. Da die Metastasierung der Hauptfaktor für die Sterblichkeit bei Krebs ist, ist das Verständnis der Zellmigrationsmechanismen von entscheidender Bedeutung für die Krebsforschung. In vielen Zellmigrationsassays werden qualitative Kratz-Assays oder die quantitativere Boyden-Kammertechnik eingesetzt.

Im Fall der Boyden-Kammer-Methode wird die Zellmigration auf der Grundlage von Chemotaxis und Haptotaxis überwacht. In der Chemotaxis wird die Zellmigration als Reaktion auf extrazelluläre chemische Signale, in der Haptotaxis die Zellmigration in Richtung eines immobilisierten Extrazellularmatrix- (EZM) Proteingradienten beschrieben.

Sowohl Chemotaxis- als auch Haptotaxis QCM™ Migrationsassays sind in verschiedenen Porengrößen und Multiwell-Formaten erhältlich. QCM™-Migrationsassays erfordern keine Zellmarkierung, kein Ausschaben, Waschen und Zählen, wie dies bei anderen Protokollen mit Calcein-AM-Markierung von Zellen der Fall ist.

InnoCyte™ Zellmigrationsassays im Multiwell-Format sind für die Chemotaxis-Zellmigration bestimmt. In diesem Assay wird die Migration von Epithel-, mesenchymalen und Endothelzellen durch eine 8 μm große Pore zu einer Feederschicht unter Verwendung eines zellpermeablen Fluoreszenzfarbstoffs gemessen.

Kratz-Assay für die Zellmigration

Zur Untersuchung der Zellmigration und der Wundheilung wird ein Kratz-Assay durchgeführt. Beim Kratz-Assay wird ein Kratzer auf der Oberfläche einer konfluenten Zellschicht erzeugt, sodass ein schmaler, wundenähnlicher Spalt entsteht. Mit dem Assay wird dann die Migration benachbarter Zellen in den Spalt überwacht, bis der Spalt gefüllt ist. In unserem Cell Comb™ Kratz-Assay wird ein hochdichtes Feld aus Kratzern erzeugt, um die Wundränder zu maximieren, wobei genügend unbeschädigte Zellen übrig bleiben, um in den Spalt zu wandern.

Zellinvasionsassays

Die Fähigkeit eines Tumors, die EZM-Komponenten der Basalmembran und des assoziierten Gewebes abzubauen, ist ein Indikator für sein Metastasierungspotenzial. Unsere QCM™ Boyden-Kammer-Zellinvasionsassays sind ein empfindlicher Ansatz für die In-vitro-Quantifizierung der Zellinvasion bei hohem Durchsatz. Bei diesem Assay dringen Zellen in ein Modell der Basalmembran ein, bei dem die Membranporen mit einer Schicht aus EZM-Proteinen verschlossen sind, die nicht-invasive Zellen blockieren.

Im Chemicon^® Neuritenauswuchsassay wird die mikroporöse Millipore^® Gewebekultureinsatztechnologie, welche die Passage von Neuritenfortsätzen durch 1 µm große Poren ermöglicht, eingesetzt. Ein Durchmesser, der Zellkörper nicht passieren lässt. Dieser Assay ist für PC12-Zellen optimiert.