11635379001
Roche
Kit de ligadura rápida de ADN
Sinónimos:
kit de ligadura de adn, rápido, kit de ligadura, adn rápido
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About This Item
UNSPSC Code:
41106618
Productos recomendados
usage
sufficient for 40 reactions (DNA ligation)
Quality Level
manufacturer/tradename
Roche
storage temp.
−20°C
General description
El kit de ligadura de ADN Rapid contiene todos los reactivos necesarios para la ligadura. No se requieren otros reactivos ni aditivos. El kit puede ligar rápidamente el ADN con extremos romos o cohesivos entre +15 y +25°C. Dependiendo de la concentración de ADN en la reacción, los productos de la ligadura serán circulares (si la concentración de ADN es baja) o concatémeros (si la concentración de ADN es alta). El ADN ligado es adecuado para uso directo en experimentos de transformación.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Specificity
ADN con extremos romos o cohesivos (≤200 ng).
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Application
El kit de ligadura de ADN Rapid une covalentemente fragmentos de ADN de extremo escalonado o fragmentos de extremo romo, por ejemplo, para:
- Clonación en vectores plásmidos o fagos.
- Adición de conectores a plásmidos u otros ADN.
- Recircularización del ADN lineal.
Features and Benefits
- Rápido: la ligadura tarda solo 5 minutos.
- Cómodo: la ligadura se realiza entre +15°C y +25°C.
- Fácil: el kit contiene todos los tampones y enzimas necesarios.
- Flexible: el kit puede utilizarse para todas las reacciones de ligadura habituales.
- Fiable: procedimiento sencillo y reactivos listos para usar que garantizan exactitud y reproducibilidad.
Packaging
1 kit que contiene 3 componentes.
Preparation Note
Tiempo de incubación: 5 minutos
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Other Notes
El nuevo kit Rapid DNA Dephos y ligadura contiene todos los reactivos del kit de ligadura Rapid del ADN además de nuestra nueva fosfatasa alcalina Rapid.
Legal Information
High Pure is a registered trademark of Roche
Solo componentes del kit
Referencia del producto
Descripción
- Dilution Buffer 5x concentrated
- T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
- T4 DNA Ligase 5 U/μl
Storage Class
12 - Non Combustible Liquids
wgk_germany
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
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Protocolos
Rapid DNA Ligation Kit Protocol
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