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Anticuerpo ChiPAb+ FOXA1

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Sinónimos: Forkhead box protein A1, Hepatocyte nuclear factor 3-alpha, HNF-3A, Transcription factor 3A, TCF-3A
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.32

Propiedades

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: mouse, human
• manufacturer/tradename: ChIPAb+; Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_004487
• UniProt accession no.: P55317
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... FOXA1(3169)

Descripción

General description

El HNF-3A, factor nuclear 3-alfa de hepatocitos (también llamado FOXA1) es miembro de la familia Forkhead de factores de transcripción de hélice alada. Esta familia de proteínas consta de unos 50 factores de transcripción conocidos y desempeña un papel importante en la regulación de la diferenciación celular, la organogénesis y la expresión génica. Se han observado elevados niveles de expresión del HNF-3A en tumores de próstata y mama. Aquí se cree que esta proteína interactúa con el receptor de andrógenos en los tumores de próstata y con el receptor de estrógenos α en los tumores de mama. En el caso de los ERα, el HNF-3A interactúa con las regiones reguladoras en cis en la heterocromatina y mejora la interacción de los ERα con la cromatina.

Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para la precipitación de cromatina, en cada lote y en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en su contexto de cromatina. Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP.
El conjunto de ChIPAb+ FOXA1 incluye el anticuerpo anti-FOXA1, una IgG normal de conejo y cebadores de control que amplifican una región de 138 pb de los cebadores de ChIP, el potenciador Hnf4α de ratón. El FOXA1 y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada al FOXA1.

Specificity

Este anticuerpo reconoce el HNF-3A/FOXA1.

Immunogen

Proteína recombinante correspondiente a toda la proteína del FOXA1 humano

Application

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

Este conjunto de cebadores y anticuerpos ChiPAb+ FOXA1 validados con ChIP consiste en el anticuerpo y los cebadores de control específicos para PCR.

Subcategoría de investigación
Factores de transcripción

inmunoprecipitación de la cromatina:
Datos del lote representativo
La cromatina tratada con . ultrasonidos preparada a partir de tejido hepático de ratón (equivalente 1 mg de tejido por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG normal de conejo o 2 µl de anti-FOXA1 (referencia CS207368) y el kit Magna ChIP (Nº de ref. 17-610). Se verificó la inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados al FOXA1 mediante qPCR utilizando cebadores de ChIP, el potenciador Hnf4α de ratón como locus positivo y el promotor Hnf4α de ratón como locus negativo. (Figura 2). Los datos se presentan como porcentaje de entrada de cada muestra IP relativa a la cromatina de entrada para cada muestra de amplicon y chip, tal como se indica.
Consulte los detalles experimentales en el protocolo de EZ-Magna ChIP A (Nº de ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis de Western Blotting:
Datos del lote representativo.
El lisado del tejido pancreático humano se resolvió mediante electroforesis, se transfirió a membranas de PVDF y se probó con Anti-FOXA1 (0,5 µg/ml).
Las proteínas se visualizaron utilizando una IgG de burro anti-conejo conjugada con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia. (Figura 3)
La flecha indica FOXA1 (~51 kDa).
Análisis mediante inmunocitoquímica:
Datos del lote representativo.
Análisis fluorescente confocal de células NIH/3T3 y HeLa utilizando anti-HNF-3A/FOXA1 (Rojo). Los filamentos de actina han sido marcados con colorante Alexa Fluor 488-faloidina (verde). El núcleo se tiñe con DAPI (azul). Este anticuerpo tiñe positivamente el núcleo. (Figura 4)

Packaging

25 ensayos por juego. Uso recomendado: 2 μl de anticuerpo por inmunoprecipitación de la cromatina (dependiente del contexto biológico).

Quality

Inmunoprecipitación de la cromatina:
Datos del lote representativo
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de tejido hepático de ratón (equivalente 1 mg de tejido por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de conejo normal o 2 µl de anti-FOXA1 y el kit Magna ChIP^® (Nº de ref. 17-610). Se verificó la inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados al FOXA1 mediante qPCR utilizando cebadores de ChIP y el potenciador Hnf4α de ratón (Figura 1).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna ChIP A (Nº ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº ref. 17-371).

Target description

~51 kDa

Physical form

Anti-FOXA1 (policlonal de conejo). Un vial que contiene 50 µl de anticuerpo policlonal de conejo purificado en tampón compuesto por Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4, NaCl 150 mM) con azida sódica al 0,05 % antes de añadir glicerol al 30 %. Conservar a -20°C.
Concentración 0,35 mg/ml
IgG normal de conejo. Un vial que contiene 125 µg de IgG de conejo en 125 µl de tampón de almacenamiento que contiene azida sódica al 0,05 %. Conservar a -20°C.
Cebadores ChIP, potenciador Hnf4 de ratónα. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para el potenciador Hnf4α de ratón. Conservar a -20°C.
DIR: TTC CAG CTG CCT TTA TCT CCC TGT
INV: TCT CCA CAC ATG TCC AGC AGC CT

Purificado por afinidad

Storage and Stability

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción. Recomendaciones de manipulación: Tras la primera descongelación, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.
Nota: La variabilidad en las temperaturas del congelador por debajo de -20°C puede hacer que las disoluciones que contienen glicerol se congelen durante el almacenamiento.

Analysis Note

Control
Incluye IgG normal de conejo y cebadores específicos para el potenciador Hnf4α de ratón.

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

Información de seguridad

• Storage Class: 10 - Combustible liquids
• wgk_germany: WGK 2