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Morin hydrate augments phagocytosis mechanism and inhibits LPS induced autophagic signaling in murine macrophage.

International immunopharmacology (2014-07-30)
Rekha Jakhar, Souren Paul, Anil Kumar Chauhan, Sun Chul Kang
RESUMEN

Morin, a natural flavonoid that is the primary bioactive constituent of the family Moraceae, has been found to be associated with many therapeutic properties. In this study, we evaluated the immunomodulatory activities of increasing concentration of morin hydrate in vitro. Three different concentrations of morin hydrate (5, 10, and 15μM) were used to evaluate their effect on splenocyte proliferation, phagocytic activity of macrophages, cytokine secretion and complement inhibition. We also evaluated the role of morin hydrate on lipopolysaccharide (LPS) induced autophagy. Our study demonstrated that morin hydrate elicited a significant increase in splenocyte proliferation, phagocytic capacity and suppressed the production of cytokines and nitric oxide in activated macrophages. Humoral immunity measured by anti-complement activity showed an increase in inhibition of the complement system after the addition of morin hydrate, where morin hydrate at 15μM concentration induced a significant inhibition. Depending on our results, we can also conclude that morin hydrate protects macrophages from LPS induced autophagic cell death. Our findings suggest that morin hydrate represents a structurally diverse class of flavonoid and this structural variability can profoundly affect its cell-type specificity and its biological activities. Supplementation of immune cells with morin hydrate has an upregulating and immunoprotective effect that shows potential as a countermeasure to the immune dysfunction and suggests an interesting use in inflammation related diseases.

MATERIALES
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Sigma-Aldrich
Indomethacin, 98.5-100.5% (in accordance with EP)
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Prostaglandin E2, synthetic, powder, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Rosmarinic acid, ≥98% (HPLC), from Rosemarinus officinalis L.
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Sigma-Aldrich
Rosmarinic acid, 96%
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Morin hydrate, powder
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Sigma-Aldrich
Prostaglandin E2, γ-irradiated, powder, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Prostaglandin E2, ≥93% (HPLC), synthetic
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Sigma-Aldrich
Indomethacin, meets USP testing specifications
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Sigma-Aldrich
Mouse Tumor Necrosis Factor α ELISA Kit, for serum, plasma and cell culture supernatant
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Rat Tumor Necrosis Factor α ELISA Kit, for cell and tissue lysates
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Rat Tumor Necrosis Factor α ELISA Kit, for serum, plasma and cell culture supernatant
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Sigma-Aldrich
Morin hydrate, for microscopy, for the determination of Al, Be, Zn, Ga, In, Sc, 1-2 mol/mol water
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USP
Indomethacin, United States Pharmacopeia (USP) Reference Standard
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Supelco
Indomethacin, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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Sigma-Aldrich
Bovine TNFα / Tumor Necrosis Factor alpha ELISA Kit, for serum, plasma and cell culture supernatants
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Indomethacin, European Pharmacopoeia (EP) Reference Standard
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Rosmarinic acid, primary reference standard
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Rosmarinic acid, European Pharmacopoeia (EP) Reference Standard
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Dinoprostone, European Pharmacopoeia (EP) Reference Standard
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