맞춤형 iScale Oligos™

iScale Oligos DNA 및 siRNA는 맞춤형 DNA 및 siRNA 올리고뉴클레오티드의 밀리그램 및 그램 수량으로 전문적인 요구 사항을 충족하도록 제조되었습니다.

DNA

맞춤형 DNA 올리고의 밀리그램 및 그램 수량은 in vivo, 높은 처리량 및 상업용 과제(생명 과학 연구 도구, 분자 진단 및 실험실 개발 검사)를 위한 것입니다. NGS 어댑터의 iScale 수량을 위해 자사의 차세대 서열분석 올리고 제품을 참조하십시오.

제품 이점

• 귀하의 연구 및 상업적 요구 사항을 충족하도록 이용 가능한 용량
• 귀하의 애플리케이션에 대한 사양을 설정하기 위해 자사 과학팀과 상담
• 고품질의 제품을 보장하는 최첨단 분석 실험실

제품 특징

아래에 '문의'로 표시된 항목에 대해 또는 제시된 다른 일반 사양과 다른 요구사항이 있는 경우 dnaoligos@milliporesigma.com으로 요청을 보내십시오.

iScale Oligos DNA 규격

수량	• 10, 25, 50, 25, 50 및 500 mg • 1 ~ 5 g(더 많은 수량에 대해서 문의 필요)
정제	• 탈염(≤ 5 g), RP-HPLC(≤1 g) 및 In Vivo
염기서열 길이	• 10 ~ 50 염기(더 긴 염기에 대해서 문의 필요)
변형	• 바이오틴, 바이오틴 TEG, 바이오틴 dT, 인산염, 아미노-변형제(C3, C6, C6 dT, C7, C12), TET™, HEX™, 5-Me-dC, 스페이서(12, 18, C3), dSpacer, 티올-변형자-C3 S-S,    2'- OMe 및 포스포로티오에이트 • 미국 이외의 모든 국가에서 사용 가능한잠금 핵산  • 잠금 핵산 및 기타 변형을 위한 가능성 문의 필요
품질 관리	• 100% 질량 분석법 • 분석용 HPLC 이용 가능 • 분석 인증서 이용 가능
형태	• 튜브 또는 플레이트에 건조한 상태로 공급 • 혼합(Pooling), 분주 및 정규화 가능(타당성을 위해 문의 필요)
서비스	• 올리고뉴클레오티드를 in vivo 실험에서 사용할 경우, In Vivo 등급 정제와 함께 다음 서비스를 권장합니다. - 염 교환(합성에서 발생하는 독성 암모늄 이온을 생리학적으로 허용되는 나트륨 이온으로 대체) - 여과(박테리아, 곰팡이 및 기타 오염 물질 최소화) - 내독소 검사(그람 음성 LPS가 허용 가능한 임계값 미만인지 확인하며 그렇지 않으면 면역 캐스케이드에 의해 시작된 독성 쇼크로 숙주가 사망할 수 있음

유용한 애플리케이션

• 안티센스
• 결합 연구
• 고처리량 PCR/qPCR
• Sanger 서열분석 및 NGS(비-어댑터)
• X선 결정학적 구조 분석법
• 면역자극 분석
• 마이크로어레이 생산

품질 보증

자사의 제조 공정 기반은 견고한 품질관리시스템(QMS)이며, 이는 다음과 같은 품질 등록을 위한 자사의 준수성을 주도합니다.

• 연구 등급 올리고뉴클레오타이드 제조를 위한 ISO 9001:2015
• 진단 등급 올리고뉴클레오타이드 제조를 위한 ISO 13485:2016
• 효과적인 환경 관리를 위한 ISO 14001:2015

이러한 품질 문화는 자사 사업의 모든 측면에 통합되어 있습니다. 자사 QMS의 핵심 요소:

• 분석 인증서
• 문서 관리
• 변경 통지
• 업체 관리
• 사업 계약
• 교정 및 예방 조치

각 요소는 품질 보증을 주도하며 검증을 위해 정기적으로 엄격한 등록 기관, 내부 및 고객 감사를 실시합니다.

siRNA

밀리그램 및 그램 수량의 MISSION in-vivo 품질 siRNA는 동물 RNAi 연구에 대해 월등합니다. 추가로 자사는 miRNA 및 단일 가닥 RNA를 포함한 여러가지 유형의 RNA를 제조합니다.

제품 이점

• 표적 검증 및 전임상 실험을 비롯한 in vivo 애플리케이션에 적합
• MISSION 사전설계형 siRNA 또는 맞춤형 siRNA 염기서열에 사용 가능
• 직접적인 유전자 전달이나 귀하의 시약 제조과정 전략에서 필수적인 구성 요소로서 적합

제품 특징

아래에 '문의'로 표시된 항목에 대해 또는 제시된 다른 일반 사양과 다른 요구사항이 있는 경우 sirnarequest@milliporesigma.com으로 요청을 보내십시오.

iScale Oligos siRNA 규격

수량	• 3, 50 및 100 mg • 더 많은 수량에 대해서는 문의 필요
정제	• 탈염, RP-HPLC 및 In Vivo
염기서열 형태	• 19 ~ 50mer 심플렉스 또는 듀플렉스
변형	• 바이오틴, 인산염, 아미노-변형자(C3, C6, C6 dT, C7, C12), 6-FAM™, 시아닌 3, 시아닌 5, 시아닌 5.5, 2'-OMe 및 포스포로티오에이트 • 미국 이외의 모든 국가에서 사용 가능한 잠금 핵산 • 잠금 핵산 및 기타 변형을 위한 타당성 문의 필요
품질 관리	• 100% 질량 분석법* • 분석용 HPLC 이용 가능 • 분석 인증서 이용 가능
형태	• 튜브 또는 플레이트에 건조한 상태로 공급 • 혼합(Pooling) 및 분주 가능(타당성을 위해 문의 필요)
서비스	• 올리고뉴클레오티드를 in vivo 실험에서 사용할 경우, In Vivo 등급 정제와 함께 다음 서비스를 권장합니다. - 염 교환(합성에서 발생하는 독성 암모늄 이온을 생리학적으로 허용되는 나트륨 이온으로 대체) - 여과(박테리아, 곰팡이 및 기타 오염 물질 최소화) - 내독소 검사(그람 음성 LPS가 허용 가능한 임계값 미만인지 확인하며 그렇지 않으면 면역 캐스케이드에 의해 시작된 독성 쇼크로 숙주가 사망할 수 있음

^*제조 현장에 따라 PAGE를 사용하여 siRNA 듀플렉스를 평가할 수도 있습니다.

증명된 In Vivo 사용

자사는 Bioo Scientific(현 PerkinElmer)과 협력하여 자사의 MISSION in vivo 품질 siRNA를 검증했습니다(Drug Discovery & Development - 2008년 8월 1일자 기사 참조).

이러한 실험에서 H1155luc 세포를 NOD/SCID 마우스에 주입했습니다. 종양이 형성되었으며, MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II에서 조제된 발광효소(luciferase)-특이적 siRNA 및 비표적 in vivo 품질 siRNA 주입했습니다. 24시간 경과 후, D-루시페린(D-luciferin) 용액을 주입했으며 Berthold Technologies사의 NightOWL II LB 983 기기를 사용하여 동물 영상을 획득했습니다. 발광효소-특이적 siRNA로 처리된 동물은 발광효소의 활성이 현저히 감소한 것으로 나타난 반면, 비표적 siRNA로 처리된동물들은 발광 반응에서 양성을 나타냈습니다(그림 1). 이러한 데이터는 MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II in vivo 전달 제제에서 조제된 in vivo 품질 siRNA의 효과성을 실증합니다.

그림 1. 왼쪽은 발광효소-특이적 siRNA로 처리한 동물이며 오른쪽은 비표적 siRNA로 처리한 동물

주입 후 72시간이 경과했을 때, 종양을 제거하여 단백질을 추출한 후 Bradford 분석법을 이용해 정규화 데이터를 얻었습니다. 발광효소 농도는 Luciferase ELISA를 이용해 분석했습니다. 비표적 RNAi 제제로 처리한 동물과 비교했을 때, 단백질 감소가 나타났습니다. 발광효소 활성도는 종양 조직에서 2배 감소했습니다(그림 2).

그림 2. 각 반복 실험은 다른 마우스임

추가적인 도움이 필요한 경우, oligotechserv@merckgroup.com으로 자사의 기술 서비스 그룹과 상의하십시오.

MISSION은 독일 담스타트 Merck KGaA및/또는 그 자회사의 상표입니다. 라벨 라이선스.

참고문헌

1. Stany MP, Vathipadiekal V, Ozbun L, Stone RL, Mok SC, Xue H, Kagami T, Wang Y, McAlpine JN, Bowtell D, et al. Identification of Novel Therapeutic Targets in Microdissected Clear Cell Ovarian Cancers. PLoS ONE. 6(7):e21121. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0021121

2. Beghin A, Belin S, Hage-Sleiman R, Brunet Manquat S, Goddard S, Tabone E, Jordheim LP, Treilleux I, Poupon M, Diaz J, et al. 정정: ADP Ribosylation Factor Like 2 (Arl2) Regulates Breast Tumor Aggressivity in Immunodeficient Mice. PLoS ONE. 4(11): https://doi.org/10.1371/annotation/b0d43779-c9aa-44fe-a46d-71d7d2bc4a6a

3. Ramachandran V, Arumugam T, Langley R, Hwang RF, Vivas-Mejia P, Sood AK, Lopez-Berestein G, Logsdon CD. The ADMR Receptor Mediates the Effects of Adrenomedullin on Pancreatic Cancer Cells and on Cells of the Tumor Microenvironment. PLoS ONE. 4(10):e7502. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0007502

4. Brahmamdam P, Watanabe E, Unsinger J, Chang KC, Schierding W, Hoekzema AS, Zhou TT, McDonough JS, Holemon H, Heidel JD, et al. 2009. TARGETED DELIVERY OF siRNA TO CELL DEATH PROTEINS IN SEPSIS. 32(2):131-139. https://doi.org/10.1097/shk.0b013e318194bcee

5. Fitamant J, Guenebeaud C, Coissieux M, Guix C, Treilleux I, Scoazec J, Bachelot T, Bernet A, Mehlen P. 2008. Netrin-1 expression confers a selective advantage for tumor cell survival in metastatic breast cancer. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105(12):4850-4855. https://doi.org/10.1073/pnas.0709810105

6. Watabe M, Aoyama K, Nakaki T. 2008. A Dominant Role of GTRAP3-18 in Neuronal Glutathione Synthesis. Journal of Neuroscience. 28(38):9404-9413. https://doi.org/10.1523/jneurosci.3351-08.2008