L5391

レクチン バンデイラエアシンプリシフォリア(Bandeiraea simplicifolia(Griffonia simplicifolia))由来

Isolectin B₄ (BSI-B₄), peroxidase conjugate, lyophilized powder

• 別名: BS-I, バンデイラエア・シンプリシフォリア凝集素
• UNSPSCコード: 12352202
• NACRES: NA.32

特性

• 由来生物: Bandieraea simplicifolia
• 品質水準: 200
• 結合体: peroxidase conjugate
• アッセイ: ≥90% protein basis (Warburg-Christian)
• 形状: lyophilized powder
• 有効性: <200 μg per mL agglutination activity (using human blood group B erythrocytes)
• peroxidase activity: 40-160 units/mg protein
• 組成: Protein, ~95% modified Warburg-Christian
• テクニック: blood typing: suitable; fractionation: suitable
• 保管温度: −20°C

詳細

アプリケーション

一般的なウェスタンブロットプロトコル：

• 糖タンパク質サンプルサイズ：500 ng
• レクチン濃度： 0.1 ug/mL

1. レーンあたり500 ngの糖タンパク質をサンプルとして添加します
2. 4～20% Bis-Tris SDSページゲル電気泳動を実施します
3. ゲルをPVDFメンブレンに転写します
4. RIPAバッファー（R0278 Sigma）でRTで1時間メンブレンをブロックします
5. RTで2時間、RIPAバッファーで0.1 ug/mLのHRPレクチンをインキュベートします
6. 25 mL RIPAバッファーで膜を5 x 5分間洗浄します
7. 化学発光基質（CPS1-120）を使用して検出します

生物化学的／生理学的作用

BS-Iは、末端のα-D-ガラクトース残基に最も強く、次に末端のN-アセチルα-D-ガラクトース残基に親和性を示します。

その他情報

BS-Iは、A・Bと呼ばれる2種類のサブユニットからなる四量体のレクチンです。BS-Iにはサブユニットの組成が異なる5種類のイソレクチンが存在し、それぞれBSI-B₄, BSI-AB₃, BSI-A₂B₂, BSI-A₃B, BSI-A₄と呼ばれます。BSI-B₄はB型血液に特異的で末端α-D-ガラクトシル残基だけに親和性を示しますが、一方、BSI-A₄はA型血液に特異的で、末端N-アセチル-α-D-ガラクトサミニル残基に主要な親和性を有しています。

単位の定義

1 unitは、pH 6.0、20°C、20秒間に、1 mgのプルプロガリンをピロガロールから生成する酵素量です。

物理的形状

クエン酸ナトリウムバッファ-塩および塩化カルシウム含有

調製ノート

O'Sullivanらの方法を改変して、VI型ペルオキシダーゼから調製しています。共役後にアフィニティークロマトグラフィーにより再精製しています。

アナリシスノート

凝集活性は、μg/mLの単位で表され、レクチン、カルシウム、マグネシウム、およびマンガンをそれぞれ異なる濃度で含むリン酸緩衝生理食塩水(pH  6.8)を用いた1 mg/mL溶液を段階希釈して決定します。凝集活性は、25°Cで1時間インキュベートしたときに、適切な赤血球の2%懸濁液を凝集させる最低濃度として示されます。

安全性情報

• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable
• 個人用保護具 (PPE): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)