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用途
sufficient for 96 tests
品質等級
包裝
pkg of 1 96-well plate(s)
製造商/商標名
Calbiochem®
儲存條件
OK to freeze
avoid repeated freeze/thaw cycles
protect from light
輸入
sample type serum
sample type plasma
sample type cell lysate
檢測方法
fluorometric
運輸包裝
wet ice
一般說明
钙蛋白酶是 Ca2+ 依赖性蛋白酶,其参与正常的细胞过程,包括细胞增殖、凋亡、分化和细胞迁移。需要能够在最大发射波长下测量荧光的荧光计或酶标仪:〜360 nm 和最大发射波长:~460 nm.
成分
校准标准品、阳性对照钙蛋白酶 1、底物、活化缓冲液、抑制缓冲液、还原剂、检测缓冲液、细胞裂解缓冲液、96 孔板、平板密封剂和说明书。
警告
毒性:多个毒性值,请参阅 MSDS(O)
規格
试验时间:1.5 h
準備報告
1.细胞裂解液:用冷的 PBS 洗涤细胞沉淀。b.加入 500-1000 µl 裂解缓冲液(每 1 x 107 细胞约 1 ml)并在冰上孵育 30 分钟。c.涡旋振荡并在预冷的台式微量离心机中以 14,000 x g 离心裂解液。d.立即将上清液转移至新的试管中并弃去沉淀物。e.在使用 BCA 蛋白质测定法测定蛋白质浓度之前,将裂解液至少以 1:10 稀释。2.如有必要,用检测缓冲液稀释样品。通常,蛋白质浓度 > 3 mg/ml 的细胞裂解液应稀释 5 倍。如果测得的 RFU 超过 6000,则应进一步稀释样品。
注意:该试剂盒提供了进行检测所需的所有试剂。使用前,将所有组件(对照钙蛋白酶 1 除外)加热至 15-25°C(室温);将对照钙蛋白酶 1 存放在冰上,直至使用。为了获得最佳结果,仅在需要时才制备试剂稀释液。 • 稀释标准:AMC 标准品以 1 mM 的储备溶液(100X 浓缩溶液)的形式提供。要制备校准曲线,请使用浓度范围为 0.625-10 µM 的标准品进行系列稀释液。示例:标记 6 个 eppendorf 管。用移液器吸取 495 µM 检测缓冲液到第一个试管中,然后将 200 µl 移入其余试管中。在第一个试管中加入 5 µl AMC 标准品。涡旋并从该试管转移 200 µl 至下一个试管。通过将 200 µl 转移到连续的试管中直至试管 5 继续进行连续稀释。标记为 6 的试管仅包含检测缓冲液(空白)。 • 稀释的底物:用检测缓冲液将底物稀释 100 倍。示例:制备足够进行 6 次连续稀的底物,使用 30 µl 底物 ,添加 2.97 ml 检测缓冲液进行稀释 。•活化缓冲液(最终):还原试剂(TCEP)必须在使用前添加到活化缓冲液中。示例:要制备活化缓冲液(最终),添加 20 µl 还原剂,5 ml 活化缓冲液。 • 对照钙蛋白酶 1:按照小瓶标签上的指示使用检测缓冲液稀释对照钙蛋白酶 1。要保持活性,对照钙蛋白酶 1 应该储存于 -70°C 。解冻并稀释后,应立即使用;稀释的酶可以在冰上保存数小时。
儲存和穩定性
自收到之日起,将对照人钙蛋白酶 1 储存于 -70°C,其余组件储存于 -20°C。除了对照人钙蛋白酶 1,所有组件一旦打开,都可以在 4°C 下保存长达 1 个月。
分析報告
阳性对照
钙蛋白酶 1
钙蛋白酶 1
其他說明
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法律資訊
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訊號詞
Danger
危險聲明
危險分類
Repr. 1B
儲存類別代碼
6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
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