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Merck

Glucosidasas

Glucosidasas para sus requisitos de trabajo en glucobiología

Las glucosidasas, endoglucosidasas y exoglucosidasas, se utilizan principalmente en investigación glucómica para la secuenciación de glucanos, la liberación de glucanos ligados a N y O de las glucoproteínas y la producción de glucoproteínas. Específicamente:

  • Las glucosidasas, como nuestra péptido-N-glucosidasa F recombinante, PNGasa Fast, permiten la desglucosilación completa y rápida de los anticuerpos y las proteínas de fusión de inmunoglobulina, así como de otras glucoproteínas, con el fin de prepararlas para la cromatografía o el análisis de espectrometría de masas posteriores.
  • Las liasas de polisacáridos y las esterasas de carbohidratos se utilizan para degradar los glucosaminoglucanos (mucopolisacáridos) y preparar los componentes de los polisacáridos.
  • Se están estudiando las glucosiltransferasas para utilizar en la ingeniería de la glucosilación selectiva con el fin de mejorar las propiedades terapéuticas de las proteínas y los anticuerpos y reducir la inmunogenicidad de los tejidos xenógenos.

Para adaptarse a sus requisitos de trabajo en glucobiología, ofrecemos una amplia gama de productos para análisis funcional y estructural de los glucanos, entre ellos, las enzimas de glucoprocesamiento, las glucoproteínas, los proteoglucanos, los glucolípidos y los oligosacáridos libres. Esto incluye ofertas de proteínas que reconocen glucanos, como las lectinas y las galectinas, y nuestras enzimas activas sobre carbohidratos, que abarcan las exoglucosidasas, las endoglucosidasas, las glucosiltransferasas y muchas más. Como la glucosilación es una de las modificaciones postraduccionales más comunes y complejas, nuestros kits GlycoProfile™ se han desarrollado para el etiquetado y análisis rápidos y sencillos de los N-glucanos y los O-glucanos de las glucoproteínas.

Descubra productos aún más innovadores de reactivos, kits y recursos glucómicos a continuación.


Kit de desglucosilación enzimática de proteínas

Los kits de desglucosilación enzimática de proteínas (como los productos EDEGLY y NDEGLY) contienen todas las enzimas y reactivos necesarios para eliminar por completo todos los carbohidratos unidos por enlaces N y O glucosídicos de las glucoproteínas. Incluye los glucoformas O-ligadas que contienen galactosa, N-acetilglucosamina y ácido siálico. Otras características y beneficios son:

  • Desglucosila hasta 2 mg de glucoproteína, suficiente para el procesamiento posterior
  • Reacción única a pH neutro: conserva la estructura peptídica original
  • Sin degradación de las proteínas: estudios sobre la estructura de los péptidos
  • Exoglucosidasas incluidas: procesa O-glucoformas para su liberación
  • Elimina los azúcares unidos por enlaces O-glucosídicos: que contienen ácido polisiálico: análisis peptídico más preciso
  • Control de la glucoproteína suministrada: la verificación mejora la confianza y la uniformidad

Kit de N-desglucosilación enzimática en gel GlycoProfile™I.

El kit de N-desglucosilación enzimática en gel GlycoProfile I elimina con fuerza los glucanos unidos mediante enlaces N-glucosídicos y digiere muestras de proteínas de geles de poliacrilamida en 1D o 2D para análisis mediante MS o HPLC. El kit funciona bien para los geles teñidos con azul brillante de Coomassie, Coomassie coloidal y teñidos con plata cuando se destiñen correctamente. La enzima glucolítica PNGasa F (péptido-N-glucosidasa F) funciona magníficamente cuando se utiliza para la desglucosilación en gel de las glucoproteínas y los glucopéptidos unidos por enlaces N-glucosídicos. La tripsina de grado proteómico digiere eficazmente la proteína restante. Las muestras desaladas se concentran después para su análisis mediante MS más comúnmente utilizando métodos de ionización como MALDI o ESI y métodos de analizador como TOF o Quodrupole. Este kit ofrece características y ventajas como:

  • Desglucosilación y digestión en gel: minimiza la manipulación de las muestras
  • Enzimas muy purificadas: evita actividades y subproductos no deseados
  • Bajo contenido de sal amortiguadora: elimina las interferencias en el análisis mediante MS
  • Desteñido del reactivo incluido: ahorra tiempo al reducir la preparación añadida del reactivo

Otras enzimas para glucobiología

Como complemento a nuestros kits de desglucosilación, ofrecemos enzimas glucolíticas para la eliminación o degradación parcial de los glucanos. El uso de otras enzimas puede ser útil para ciertas estructuras de glucano que resisten las estrategias de desglucosilación universales, como las estructuras que la PNGasa F no rompe. Además, puede utilizarse la hidrólisis secuencial de monosacáridos individuales de los glucanos en el análisis de la estructura y la función del componente glucano.





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