AB3200
Anticuerpo anti-LIM-1
Chemicon®, from rabbit
Sinónimos:
Anti-Anti-LIM-1, Anti-Anti-LIM1
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Productos recomendados
origen biológico
rabbit
Nivel de calidad
forma del anticuerpo
purified immunoglobulin
tipo de anticuerpo
primary antibodies
clon
polyclonal
reactividad de especies
human, frog, fish, mouse
fabricante / nombre comercial
Chemicon®
técnicas
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry: suitable (paraffin)
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Nº de acceso NCBI
Nº de acceso UniProt
Condiciones de envío
wet ice
modificación del objetivo postraduccional
unmodified
Información sobre el gen
human ... LHX1(3975)
Categorías relacionadas
Especificidad
Reconoce la LIM-1. Este anticuerpo no parece experimentar reacción cruzada con la LIM-5 (el homólogo más cercano de la LIM-1 en rana) en cortes de tejido, pero sí muestra reacción cruzada con LIM-5 en Western blot e inmunoprecipitación.
Inmunógeno
Porción C-terminal de la proteína LIM-1 de rana.
Aplicación
Categoría de investigación
Neurociencia
Neurociencia
El anticuerpo anti-LIM-1 detecta el nivel de LIM-1 y se ha publicado y validado para utilizar en IF, IP, WB, IC e IH(P)
Inmunohistoquímica: 1:200-1:1 000 (pescado y monturas enteras 1:500) Fijador recomendado MEMFA.
Nuestra foto se produjo a partir de fijación por inmersión de embriones de pollo en PFA al 4 % en frío durante 15-30 minutos, luego se realizó el corte en un criostato.
Actúa en cortes incluidos en parafina cuando los cortes están fijados ligeramente con PFA o fijados con acetona, etanol o el fijador que se sugiere a continuación.
PROTOCOLO DE INMUNOHISTOQUÍMICA SUGERIDO PARA AB3200
El mejor fijador es MEMFA. Disolución madre x10 para MEMFA: MOPS 1 M, EGTA 20 MM. MgSO4 10 mM, formaldehído al 38 %. Fijación 1 hora, 2 x 15 min metanol. Siguiendo este protocolo los embriones pueden conservarse en metanol a -20°C indefinidamente o incluirse inmediatamente en paraplast. Los mejores resultados, en cortes de parafina de 6-10 micras de grosor. 2) Tinción tras la desparafinización en xileno y una serie de alcoholes, lavar dos veces en agua.. Bloquee el reactivo Boehringer Mannheim al 2 % en ácido maleico 0,1 M, pH 7,5, NaCl 150 mM durante una hora a temperatura ambiente. 3) Diluya el AB3200 en el mismo reactivo bloqueante e incube durante toda la noche a 4°C o durante al menos 5 horas. Lave tres veces en PBS, 10 min cada una. 4) Incube con anticuerpo secundario conjugado con fosfatasa alcalina (por ejemplo, Chemicon número de referencia AP132A. Revele con BCIP/TNBT (Número de referencia Chemicon ES007-100 ml).5) Para los cortes, utilice siempre los portaobjetos silanizados Digene o Superfrost plus de Fisher, ya que es posible que a veces tenga que hervir los cortes en urea 6 M durante 5-6 min. en el microondas a una potencia del 80 % después de la desparafinización para aumentar la señal. Esto es especialmente útil si los tejidos fueron fijados en PFA. 6) A veces es necesario preagotar el anticuerpo en embriones hiperfijados para reducir el ruido de fondo (en especial para especies de tinción distintas de la rana y para montajes enteros). Procedimiento: hiperfije embriones de rana o de pez en MEMFA durante 36-48 horas en embriones RT 30-50. Lave dos veces en metanol (véase antes). Aplique el anticuerpo en la dilución final en el reactivo bloqueante durante una hora sobre la mesa basculante. Recoja el sobrenadante y aplique a sus embriones o cortes. Para montajes completos, utilice el siguiente procedimiento: después de fijación, metanol y PBS; bloqueo en PBST + suero (PBS + 2 mg/ml BSA + Triton X100 al 0,1 % + 10% de suero animal) una hora a temperatura ambiente. Añada el primer anticuerpo en PBST + suero e incube durante la noche a 4°C. Lave en PBST (sin suero) 4 veces durante 2 horas. Añada el anticuerpo secundario diluido en PBST + suero durante la noche a 4°C. Lave en PBST cuatro veces durante 2 horas. Revele la tinción.
No utilice tejidos fijados durante la noche en PFA. El anticuerpo no actuará.
Inmunocitoquímica: 1:500 en línea de células P19, ligeramente fijada (PFA al 2 %) durante 5-15 minutos, permeabilizada con triton X-100 al 0,1 % o metanol (5 ′ g secado al aire).
Inmunotransferencia Western: 1:3 000-1:6 000
Inmunoprecipitación. 1:200
Inmunofluorescencia 1:100
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Nuestra foto se produjo a partir de fijación por inmersión de embriones de pollo en PFA al 4 % en frío durante 15-30 minutos, luego se realizó el corte en un criostato.
Actúa en cortes incluidos en parafina cuando los cortes están fijados ligeramente con PFA o fijados con acetona, etanol o el fijador que se sugiere a continuación.
PROTOCOLO DE INMUNOHISTOQUÍMICA SUGERIDO PARA AB3200
El mejor fijador es MEMFA. Disolución madre x10 para MEMFA: MOPS 1 M, EGTA 20 MM. MgSO4 10 mM, formaldehído al 38 %. Fijación 1 hora, 2 x 15 min metanol. Siguiendo este protocolo los embriones pueden conservarse en metanol a -20°C indefinidamente o incluirse inmediatamente en paraplast. Los mejores resultados, en cortes de parafina de 6-10 micras de grosor. 2) Tinción tras la desparafinización en xileno y una serie de alcoholes, lavar dos veces en agua.. Bloquee el reactivo Boehringer Mannheim al 2 % en ácido maleico 0,1 M, pH 7,5, NaCl 150 mM durante una hora a temperatura ambiente. 3) Diluya el AB3200 en el mismo reactivo bloqueante e incube durante toda la noche a 4°C o durante al menos 5 horas. Lave tres veces en PBS, 10 min cada una. 4) Incube con anticuerpo secundario conjugado con fosfatasa alcalina (por ejemplo, Chemicon número de referencia AP132A. Revele con BCIP/TNBT (Número de referencia Chemicon ES007-100 ml).5) Para los cortes, utilice siempre los portaobjetos silanizados Digene o Superfrost plus de Fisher, ya que es posible que a veces tenga que hervir los cortes en urea 6 M durante 5-6 min. en el microondas a una potencia del 80 % después de la desparafinización para aumentar la señal. Esto es especialmente útil si los tejidos fueron fijados en PFA. 6) A veces es necesario preagotar el anticuerpo en embriones hiperfijados para reducir el ruido de fondo (en especial para especies de tinción distintas de la rana y para montajes enteros). Procedimiento: hiperfije embriones de rana o de pez en MEMFA durante 36-48 horas en embriones RT 30-50. Lave dos veces en metanol (véase antes). Aplique el anticuerpo en la dilución final en el reactivo bloqueante durante una hora sobre la mesa basculante. Recoja el sobrenadante y aplique a sus embriones o cortes. Para montajes completos, utilice el siguiente procedimiento: después de fijación, metanol y PBS; bloqueo en PBST + suero (PBS + 2 mg/ml BSA + Triton X100 al 0,1 % + 10% de suero animal) una hora a temperatura ambiente. Añada el primer anticuerpo en PBST + suero e incube durante la noche a 4°C. Lave en PBST (sin suero) 4 veces durante 2 horas. Añada el anticuerpo secundario diluido en PBST + suero durante la noche a 4°C. Lave en PBST cuatro veces durante 2 horas. Revele la tinción.
No utilice tejidos fijados durante la noche en PFA. El anticuerpo no actuará.
Inmunocitoquímica: 1:500 en línea de células P19, ligeramente fijada (PFA al 2 %) durante 5-15 minutos, permeabilizada con triton X-100 al 0,1 % o metanol (5 ′ g secado al aire).
Inmunotransferencia Western: 1:3 000-1:6 000
Inmunoprecipitación. 1:200
Inmunofluorescencia 1:100
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Subcategoría investigación
Neurociencia del desarrollo
Marcadores neuronales y de la glía
Neurociencia del desarrollo
Marcadores neuronales y de la glía
Forma física
Inmunoglobulina purificada
Presentación: Purificada
Almacenamiento y estabilidad
Mantener a 2-8°C en alícuotas no diluidas durante un máximo de 6 meses.
Información legal
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Cláusula de descargo de responsabilidad
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Código de clase de almacenamiento
10 - Combustible liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 2
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
Not applicable
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