17-622
ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27): Conjunto de anticuerpo y cebador validado para CHIP
from rabbit, purified by using Protein A
Sinónimos:
Chip Antibody and primer set, H3K27me3 ChIP, H3K27me3, Histone H3 (tri methyl K27), Histone H3K27me3, Histone H3K27me3 ChIP
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Productos recomendados
origen biológico
rabbit
Nivel de calidad
clon
polyclonal
purificado por
using Protein A
reactividad de especies
human, mouse
fabricante / nombre comercial
ChIPAb+
Upstate®
técnicas
ChIP: suitable
western blot: suitable
Nº de acceso NCBI
Nº de acceso UniProt
Condiciones de envío
dry ice
Información sobre el gen
human ... H3F3B(3021)
Descripción general
La metilación de las histonas puede ocurrir en dos residuos diferentes: arginina o lisina. La metilación de la histona puede estar asociada con la activación o la represión de la transcripción, dependiendo del residuo metilado. La lisina 27 de la histona H3 puede estar mono, di o trimetilada (histona H3 monometil Lys27, histona H3 dimetil Lys27 o histona H3 trimetil Lys27) por diferentes histona metiltransferasas como la EZH2 o la NSD3. La metilación de este residuo se asocia principalmente con la represión de la transcripción.
Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para precipitación de la cromatina, en cada lote
en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en el contexto de su cromatina.
Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP. El conjunto de ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27) incluye el anticuerpo anti-trimetil-histona H3 (Lys27), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y cebadores para qPCR que amplifican una región de 139 pb del satélite alfa humano. Los anticuerpos anti-trimetil-histona H3 (Lys27) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la trimetil-histona H3 (Lys27).
en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en el contexto de su cromatina.
Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP. El conjunto de ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27) incluye el anticuerpo anti-trimetil-histona H3 (Lys27), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y cebadores para qPCR que amplifican una región de 139 pb del satélite alfa humano. Los anticuerpos anti-trimetil-histona H3 (Lys27) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la trimetil-histona H3 (Lys27).
Especificidad
Se prevé amplia reactividad cruzada entre especies.
trimetil-histona H3 (Lys27).
Inmunógeno
Epítopo: Trimetil Lys27
Péptido sintético 2X-ramificado, conjugado con KLH que contiene la secuencia ...AR(me3K)SAP... en la que me3K corresponde a la trimetil-lisina en el resto 27 de la histona H3 humana.
Aplicación
Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo anti-trimetilhistona H3 (Lys27) purificado o IgG de conejo normal y el kit Magna ChIP A (Nº ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3 (Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores GAPDH para ChIP que flanquean el promotor de GAPDH humano y los cebadores dirigidos al promotor de MyoD humano.
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP A (Nº de ref. 17-408) o EZChIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis mediante Western Blot:
La histona H3 recombinante (carril 2) y los extractos ácidos de las células HeLa (carril 1) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a nitrocelulosa y se probaron con una dilución 1:5000 de anti-trimetil histona H3 Lys27 (0,4 μg/ml).
Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de cabra anti- conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (consulte las figuras).
La cromatina tratada con ultrasonidos a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo anti-trimetilhistona H3 (Lys27) purificado o IgG de conejo normal y el kit Magna ChIP A (Nº ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3 (Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores GAPDH para ChIP que flanquean el promotor de GAPDH humano y los cebadores dirigidos al promotor de MyoD humano.
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP A (Nº de ref. 17-408) o EZChIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis mediante Western Blot:
La histona H3 recombinante (carril 2) y los extractos ácidos de las células HeLa (carril 1) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a nitrocelulosa y se probaron con una dilución 1:5000 de anti-trimetil histona H3 Lys27 (0,4 μg/ml).
Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de cabra anti- conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (consulte las figuras).
Juego de anticuerpos y cebadores validados para ChIP de trimetil-histona H3 (Lys27), que incluye el anticuerpo de calidad ChIP y cebadores de PCR de control específicos utilizados para la inmunoprecipitación de cromatina de H3K27Me3.
Subcategoría de investigación
Histonas
Histonas
Envase
25 ensayos por kit, ~4μl por inmunoprecipitación de la cromatina.
Componentes
Anti-trimetil histona H3(Lys27) policlonal, 1 vial
Suero policlonal de conejo de control, 1 vial
Conjunto de cebadores del satélite alfa humano, 1 vial
Suero policlonal de conejo de control, 1 vial
Conjunto de cebadores del satélite alfa humano, 1 vial
Calidad
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina preparada a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo purificado o IgG normal de conejo y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3
(Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores para ChIP del satélite alfa humano (consulte las figuras).
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP A (Nº de ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº de ref. 17-371).
La cromatina preparada a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo purificado o IgG normal de conejo y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3
(Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores para ChIP del satélite alfa humano (consulte las figuras).
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP A (Nº de ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº de ref. 17-371).
Descripción de destino
17 kDa
Forma física
Anti-trimetil-histona H3 (Lys27) (IgG policlonal de conejo). Un vial que contiene 100 μg de IgG purificada en proteína A en tampón de 100 μl que contiene Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 0,15 M con azida sódica al 0,05 %. Líquido a -20°C.
IgG normal de conejo. Un vial que contiene 125 μg de IgG purificada de conejo en 125 μl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,1 %. Almacenar a -20°C.
Cebadores para CHIP de satélite alfa humano. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
IgG normal de conejo. Un vial que contiene 125 μg de IgG purificada de conejo en 125 μl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,1 %. Almacenar a -20°C.
Cebadores para CHIP de satélite alfa humano. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Almacenamiento y estabilidad
1 año a -20°C desde la fecha de envío.
Nota de análisis
Control
1 vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
INV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
1 vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
INV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Información legal
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Cláusula de descargo de responsabilidad
Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.
Código de clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
¿Ya tiene este producto?
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Long noncoding RNA-mediated maintenance of DNA methylation and transcriptional gene silencing.
Mohammad, F; Pandey, GK; Mondal, T; Enroth, S; Redrup, L; Gyllensten, U; Kanduri, C
Development null
Transgene- and locus-dependent imprinting reveals allele-specific chromosome conformations.
Lonfat, N; Montavon, T; Jebb, D; Tschopp, P; Nguyen Huynh, TH; Zakany, J; Duboule, D
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Genome-wide bovine H3K27me3 modifications and the regulatory effects on genes expressions in peripheral blood lymphocytes.
He, Y; Yu, Y; Zhang, Y; Song, J; Mitra, A; Zhang, Y; Wang, Y; Sun, D; Zhang, S
Testing null
Extensive co-operation between the Epstein-Barr virus EBNA3 proteins in the manipulation of host gene expression and epigenetic chromatin modification.
White, RE; Groves, IJ; Turro, E; Yee, J; Kremmer, E; Allday, MJ
Testing null
Temporal dynamics and developmental memory of 3D chromatin architecture at Hox gene loci.
Noordermeer, D; Leleu, M; Schorderet, P; Joye, E; Chabaud, F; Duboule, D
eLife null
Nuestro equipo de científicos tiene experiencia en todas las áreas de investigación: Ciencias de la vida, Ciencia de los materiales, Síntesis química, Cromatografía, Analítica y muchas otras.
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