Inmunohistoquímica diagnóstica

La inmunohistoquímica diagnóstica (IHC) consiste en un conjunto de técnicas diferentes pensadas para identificar anomalías en los tejidos, establecer pronósticos e indicar opciones terapéuticas. El principio básico de la IHC diagnóstica es una reacción de unión antígeno-anticuerpo en la que se utiliza un anticuerpo marcado con una enzima o un colorante fluorescente para visualizar la localización y la distribución de un antígeno específico en tejidos o cortes de tejido. La tinción histológica ha sido la principal herramienta analítica durante más de un siglo, pero diversas mejoras en la inmunohistoquímica (IHC) diagnóstica y en el análisis molecular han revolucionado el campo de la biología clínica moderna.

IHC diagnóstica y biología clínica

La IHC está disponible como parte del servicio habitual en los laboratorios de análisis clínicos generales proporcionando una cómoda herramienta de diagnóstico y análisis. Mucho del diagnóstico clínico sigue basado en gran medida en la tinción convencional de los tejidos, como la hematoxilina y la eosina (HyE), pero hay muchas formas mediante las cuales la IHC ayuda a los anatomopatólogos en la detección de los casos problemáticos. La inmunotinción diagnóstica se utiliza regularmente para identificar sutiles cambios celulares morfológicos o de desarrollo precoces, como la proliferación o la apoptosis. Los anticuerpos clínicos pueden identificar linajes celulares individuales mediante su unión a proteínas marcadoras específicas. Esta especificidad de anticuerpo también puede producir resultados falsos positivos o falsos negativos, porque la inmunotinción es sensible a la manipulación y la conservación de los tejidos, y a la calidad de los reactivos. Los laboratorios de anatomía patológica minimizan los errores analíticos trabajando bajo protocolos establecidos y programas de capacitación mientras utilizan anticuerpos diagnósticos, tinciones y reactivos clínicamente validados. En particular, el desarrollo de anticuerpos monoclonales muy específicos frente a marcadores celulares clave ha llevado al uso de paneles de IHC diagnóstica en investigación e identificación clínica de enfermedades y en la orientación de patologías quirúrgicas.

IHC diagnóstica y cánceres

La mayor parte de los cánceres puede identificarse mediante una combinación de tinción histológica e inmunohistoquímica diagnóstica mediante la localización de antígenos específicos en el tejido de la biopsia. La determinación de un tipo de tumor exacto utilizando tinción convencional con hematoxilina y eosina de tejidos fijados en formol puede ser compleja, en especial con tumores metastásicos o poco diferenciados. La IHC proporciona un método relativamente rápido y sencillo para determinar mejor el origen del tejido neoplásico e investigar el comportamiento o la progresión de una neoplasia determinada. El cáncer de primario desconocido (CUP) es una enfermedad en la cual se observan metástasis cancerosas pero se desconoce la ubicación del cáncer primario. Se estima que de todos los cánceres, el 3-5% de los casos pertenece a un CUP. Para los CUP críticos y otros casos atípicos en los que hay un desacuerdo en los datos morfológicos y clínicos, se ha demostrado que la IHC es importante para estrechar el intervalo de alternativas diagnósticas. En algunos casos, proporciona información significativa sobre un diagnóstico provisional concerniente al fenotipo del cáncer y la ubicación del tumor primario. En la IHC, la inmunotinción demuestra ser una cómoda herramienta de diagnóstico para detectar muchos tipos de cáncer, entre ellos, adenocarcinomas (colon, mama, próstata) y piel. Suele utilizarse en el diagnóstico del cáncer de colon (HNPCC/síndrome Lynch) para complementar métodos de detección clásicos como la inestabilidad de los microsatélites (MSI), que se caracteriza por numerosas alteraciones en un tipo de ADN repetitivo. En los cánceres de piel, no es fiable la identificación de melanocitos intraepidérmicos en cortes teñidos con HyE convencional, en especial en la piel dañada por el sol. Incluso la inspección de cerca puede no ayudar a diferenciar con claridad los queratinocitos pigmentados de los melanocitos o a delinear claramente la densidad de los melanocitos. Por tanto, muchos anatomopatólogos recomiendan la IHC para diferenciar el melanoma in situ de sus imitadores.

IHC diagnóstica y agentes infecciosos

La inmunohistoquímica diagnóstica proporciona en la actualidad un diagnóstico diferencial morfológico rápido de infecciones en las muestras de tejido de los pacientes y facilita la toma de decisiones diagnósticas rápidas en la atención al paciente. Se han utilizado anticuerpos marcados con isotiocianato de fluoresceína (FITC) para detectar antígenos neumocócicos en tejidos infectados. En la detección de enfermedades infecciosas, la IHC ha sido muy útil para identificar microorganismos que:

• son difíciles de detectar mediante tinciones sistemáticas o especiales
• se tiñen poco
• aparecen en pequeña cantidad
• no son cultivables

Algunos métodos de IHC diagnóstica se aplican en casos de hepatitis B, hepatitis C o infecciones por citomegalovirus para confirmar la presencia de los agentes infecciosos en los tejidos utilizando anticuerpos específicos producidos frente al ADN o el ARN microbianos. Además, la IHC se utiliza en la detección de diversas infecciones cutáneas para identificar infecciones víricas y bacterianas específicas que son difíciles de detectar con certeza utilizando sólo las tinciones microscópicas habituales. La inmunofluorescencia (IFA) se ha utilizado mucho en medicina humana y veterinaria para la detección de patógenos (virus, bacterias o protozoos) en tejidos no fijados.