Cromatografía en capa fina (TCL)
La cromatografía en capa fina (TLC) es un método de afinidad que se utiliza para separar los compuestos de una mezcla. La TLC es un método de separación muy versátil que se utiliza ampliamente para el análisis cualitativo y cuantitativo de las muestras. La TLC puede utilizarse para analizar prácticamente cualquier clase de sustancia: plaguicidas, esteroides, alcaloides, lípidos, nucleótidos, glucósidos, carbohidratos y ácidos grasos.
En la TLC, la fase estacionaria es una fina capa de material adsorbente, normalmente gel de sílice u óxido de aluminio, que recubre una superficie de placa inerte, normalmente vidrio, plástico o aluminio. Se deposita una pequeña cantidad de la muestra en un extremo de la placa de TLC, que se coloca verticalmente en una cámara cerrada con un disolvente orgánico (fase móvil). La fase móvil se desplaza hacia arriba por la placa por capilaridad y los componentes de la muestra migran distancias variables en función de sus afinidades diferenciales por las fases estacionaria y móvil. Cuando el disolvente llega a la parte superior de la placa, ésta se retira de la cámara de desarrollo y se seca. Los componentes separados aparecen como puntos en la placa, y se evalúa el factor de retención (RF) de cada componente.
Artículos técnicos relacionados
- In this article we present several HPTLC applications and analytical standards for ginsenosides.
- Thin layer chromatography
- HPTLC-MS was used to analyze stevioside and rebaudioside in artificial sweeteners, stevia plants, cola and isotonic drinks with a minimum of sample preparation.
- Thin layer chromatography (TLC), an analytical technique often used to separate and identify compounds present in a given mixture, can also be used to determine the purity of a particular substance within that mixture
- TLC plates, with silica gel, gypsum as binder, International Pharmacopoeia compliant, for identification of Atenolol and Chlorthalidone in tablets
- Ver todo (6)
Protocolos relacionados
- What causes a dissolved mixture to separate when applied to a TLC plate? The thin-layer chromatography process relies on capillary forces. During development of the chromatogram, the mixture of substances is first transported by the mobile phase, then resides on the stationary phase for a while, and is carried along again.
- Boiled coffee samples were extracted and filtered with a 0.45 μm Millex syringe filter.
- Powdered black pepper was chosen as example for dietary supplements, being a source for pierine. It is tested according to the current United States Pharmacopeia (USP) guidelines using HPTLC and HPLC.
- HPTLC was used to analyze caffeine in coffee. Filtration of coffee through a PTFE syringe filter was the only sample preparation. Quantitation was conducted with a TLC scanner.
- Silica gel G 254 plates are suitable for analysis of Dextromethorphan following the European pharmacopeia monograph.
- Ver todo (16)
Proceso y principios de la TLC
La TLC se basa en el principio clásico de la cromatografía según el cual, los componentes de una mezcla se separan entre una fase fija estacionaria y una fase móvil líquida por afinidades diferenciales entre las dos fases.
Factor de retención de la TLC (Rf)
El factor de retención (Rf) se utiliza para medir el movimiento de los compuestos a lo largo de la placa de TLC. Rf se define como la distancia recorrida por un componente dividida por la distancia total recorrida por el disolvente. Su valor se encuentra siempre entre cero y uno.
| Rf = | distancia recorrida por el componente |
| distancia recorrida por el disolvente |
En general, cuanto más fuerte se une un compuesto a la fase estacionaria adsorbente, más despacio migra hacia arriba en la placa de la TLC. Como los adsorbentes de la TLC son normalmente polares, los compuestos no polares tienden a subir más deprisa por la placa, lo que produce mayores valores de Rf, mientras que los compuestos polares tienden a moverse más despacio e y tienen menores valores de Rf.
Aplicaciones de la TLC
La TLC se utiliza ampliamente en muchas industrias y campos de investigación, como los farmacéuticos, los ensayos clínicos, la toxicología medioambiental, los alimentos, los análisis del agua y los plaguicidas pesticidas, y los cosméticos. Las aplicaciones habituales de la TLC son:
- Análisis de residuos farmacológicos y de antibióticos en muestras alimentarias y medioambientales
- Identificación y cuantificación de colores, ingredientes, conservantes y edulcorantes en alimentos y cosméticos
- Control de calidad y ensayos de pureza de formulaciones farmacéuticas
- Cribado rápido, de gran rendimiento antes de la HPLC
- Examen de finalización de reacciones químicas
Para seguir leyendo, inicie sesión o cree una cuenta.
¿No tiene una cuenta?