S7803

CpG WIZ^™ MGMT – methylierungsspezifischer PCR-Assay

The components of the CpG WIZ MGMT Amplification Kit include those required for PCR amplification after bisulfite modification of DNA samples. Sufficient reagents are provided to analyze 25 samples.

• Synonym(e): MGMT Methylation Assay, Methylation PCR Kit
• UNSPSC-Code: 12161503
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.31

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Speziesreaktivität: human
• Hersteller/Markenname: CPGWIZ^™; Chemicon^®
• Methode(n): PCR: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_002412.2
• Anwendung(en): genomic analysis

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Methylierung von Cytosinen am 5′ an Guanosin hat eine weitreichende Wirkung auf die Expression verschiedener eukaryotischer Gene (Bird, 1992). In gesunden Zellen tritt die Methylierung überwiegend in CG-armen Regionen auf, während CG-reiche Regionen (CpG-Inseln genannt) unmethyliert bleiben. Die aberrante Methylierung von normalerweise unmethylierten CpG-Inseln wurde in immortalisierten und transformierten Zellen als relativ häufiges Ereignis dokumentiert (Antequera, 1990) und mit der transkriptionalen Inaktivierung von definierten Tumorsupressorgenen in humanen Krebsarten assoziiert (Merlo, 1995). O(6)-Methylguanin-DNA-Methyltransferase (MGMT) ist ein Beispiel für ein Gen, das eine charakteristische Hypermethylierung aufweist.



Methylierungsspezifische PCR (MSP) ist eine neue Technik für den sensitiven Nachweis von abnormaler Genmethylierung, die kleine Mengen DNA nutzt (Herman, 1996). Das Verfahren nutzt eine anfängliche Bisulfit-Reaktion, um die DNA zu modifizieren, gefolgt von einer PCR-Amplifikation mit bestimmten Primern, die zum Unterscheiden von methylierter und unmethylierter DNA konzipiert sind.

Anwendung

Die Komponenten des CpG WIZ MGMT-Amplifikations-Kits beinhalten jene, die nach einer Bisulfit-Modifikation von DNA-Proben für die PCR-Amplifikation erforderlich sind. Es werden ausreichend Reagenzien zur Analyse von 25 Proben bereitgestellt.

Prinzip der Methode

Die Verwendung von entweder dem CpGenomeDNA-Modifikations-Kit (Katalognr. S7820) oder dem CpGENOME Fast DNA-Modifikations-Kit (Katalognr. S7824) erleichtert die anfänglichen Bisulfit-Reaktionen, während das CpG WIZ MGMT-Amplifikations-Kit die erforderlichen Reagenzien für genspezifische PCR-Amplifikationsreaktionen enthält.

Komponenten

Die Komponenten des CpG WIZ MGMT-Amplifikations-Kits beinhalten jene, die nach einer Bisulfit-Modifikation von DNA-Proben für die PCR-Amplifikation erforderlich sind. Es werden ausreichend Reagenzien zum Analysieren von 25 Proben mit geeigneten Kontrollen bereitgestellt.

U Primer-Set 5 μmol/l je Primer (25 X) 35 μl (neutrale Kappe) 90513 -15 °C bis -25 °C

M Primer-Set 5 μmol/l je Primer (25 X) 35 μl (rote Kappe) 90514 -15 °C bis -25 °C

W Primer-Set 5 μmol/l je Primer (25 X) 35 μl (grüne Kappe) 90515 -15 °C bis -25 °C

U Kontrolle DNA 0,1 μg/μl 50 μl (weiße Kappe) 90393 -15 °C bis -25 °C

M Kontrolle DNA 0,1 μg/μl 50 μl (rote Kappe) 90394 -15 °C bis -25 °C

W Kontrolle DNA 0,05 μg/μl 50 μl (grüne Kappe) 90395 -15 °C bis -25 °C

Universeller 10 X PCR-Buffer 265 μl (blaue Kappe) 90396 -15 °C bis -25 °C

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

CPGWIZ is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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