MAB1615

Anti-Neurofilament 70-kDa-Antikörper, Klon DA2

culture supernatant, clone DA2, Chemicon^®

• Synonym(e): Anti-CMT1F, Anti-CMTDIG, Anti-NF-L, Anti-NF68, Anti-NFL, Anti-PPP1R110
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: culture supernatant
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: DA2, monoclonal
• Speziesreaktivität: mouse, bovine, rat, human, pig
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG1
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_006158.2
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P07196
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... NEFL(4747)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Neurofilamente sind eine Art von Intermediärfilamenten, die als wichtige Elemente des Zytoskeletts zur Unterstützung des Zytoplasmas von Axonen dienen. Sie sind die am häufigsten vertretenen fibrillären Komponenten des Axons und durchschnittlich 3–10 Mal häufiger als dessen Mikrotubuli. Neurofilamente (Durchmesser 10 nm) sind aus drei verschlungenen Protofibrillen aufgebaut, die wiederum aus jeweils zwei tetrameren Protofilamentkomplexen aus monomeren Proteinen bestehen. Die Neurofilament-Triplett-Proteine (68/70, 160 und 200 kDa) treten im zentralen wie im peripheren Nervensystem auf und sind gewöhnlich Neuronen-spezifisch. Das 68/70-kDa-NF-L-Protein kann sich selbst zu einer filamentösen Struktur assemblieren, für die Co-Assemblierung der 160-kDa-NF-M und 200-kDa-NF-H-Proteine muss jedoch das 68/70-kDa-NF-L-Protein vorhanden sein. Neurome, Ganglioneurome, Gangliogliome, Ganglioneuroblastome und Neuroblastome färben positiv auf Neurofilamente. Auch wenn Neurofilamente typischerweise auf Neuronen beschränkt sind, wurden sie auch in Paragangliomen sowie in Phäochromozytomen inner- oder außerhalb der Nebenniere nachgewiesen. Karzinoide, neuroendokrine Karzinome der Haut und Haferzellkarzinome der Lunge exprimieren ebenfalls Neurofilamente. Weitere Informationen zu Neurofilamenten finden Sie in der Tabelle mit Zelltyp-spezifischen Markern für das Nervensystem im Abschnitt CHEMICON Technischer Kundendienst.

Spezifität

Erkennt die Untereinheit mit niedriger Molekülmasse (68–70 kDa) von Neurofilament-Triplet (NF-L). Das Epitop ist phosphatunabhängig. Reagiert mit Mensch und höheren Wirbeltieren.

Immunogen

Enzymatisch dephosphorylierte Schweine-Neurofilamente.

Anwendung

Dieser Anti-Neurofilament-70-kDa-Antikörper, Klon DA2 ist zur Verwendung in WB, IC und IH für den Nachweis von Neurofilament 70 kDa validiert.

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Forschungsunterkategorie
Neurofilament & Neuronaler Stoffwechsel

Neuronen- & Gliale Marker

Immunblot und Immunhistochemie (Schnellschnitte, wenig Reaktivität auf formalinfixierten Paraffinschnitten). Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.

IMMUNHISTOCHEMIE-PROTOKOLL FÜR MAB1615

Dieser Antikörper wurde erfolgreich mit freischwebenden, in 4%igem Paraformaldehyd fixierten 30-mm-Hirngewebeschnitten von Ratten verwendet. Alle Schritte werden unter konstantem Rühren durchgeführt. Im Folgenden ist das empfohlene Protokoll aufgeführt.

1) 3 Waschvorgänge von 10 Minuten in TBS (mit oder ohne 0,25 % Triton).

2) 30 Minuten in TBS mit 3 % Serum (vom gleichen Wirt wie der Sekundärantikörper) inkubieren.

3) Den ordnungsgemäß in TBS mit 1 % Serum (vom gleichen Wirt wie der Sekundärantikörper) verdünnten Primärantikörper (mit oder ohne 0,25 % Triton) 2 Stunden bei Raumtemperatur und anschließend 16 Stunden bei 4 °C inkubieren.

4) 3 Waschvorgänge von 10 Minuten in TBS.

5) Mit dem ordnungsgemäß in TBS mit 1 % Serum (vom gleichen Wirt wie der Sekundärantikörper) verdünntem Sekundärantikörper inkubieren.

6) 3 Waschvorgänge von 10 Minuten in TBS.

7) ABC Elite (1:200 Vector Labs) in TBS.

8) 2 Waschvorgänge von 10 Minuten in TBS.

9) 1 Waschvorgang von 10 Minuten in Phosphatpuffer (keine Kochsalzlösung)

10) DAB-Reaktion mit zur Intensivierung zugegebenem 0,06 % NiCl.

11) 2 Waschvorgänge von 10 Minuten in PBS.

12) 1 Waschvorgang von 10 Minuten in Phosphatpuffer (keine Kochsalzlösung)

Verlinkung

Ersetzt: 04-1112

Physikalische Form

Flüssig. Enthält keine Konservierungsmittel.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C in unverdünnten Aliquoten bis zu 12 Monate haltbar. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable