Kit per ELISA (saggio di immunoadsorbimento enzimatico)
Un saggio ELISA (saggio di immunoadsorbimento enzimatico) è un saggio immunologico che viene eseguito su di una piastra multipozzetto nel quale uno dei componenti del saggio, in genere un anticorpo o il campione, viene adsorbito sulla superficie della piastra. Offrendo una rilevazione degli analiti rapida, quantitativa e sensibile a un costo relativamente basso, gli ELISA rappresentano uno dei saggi più semplici da eseguire. Inoltre, la facilità di adattamento del test ELISA a metodi di screening ad alta efficienza consente ai ricercatori di testare un gran numero di campioni in un singolo esperimento.
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Saggi ELISA a sandwich, diretti e competitivi
I nostri saggi ELISA rappresentano un metodo comodo e di facile utilizzo per studiare i biomarcatori proteici solubili in una varietà di matrici tra cui siero, plasma, surnatante di colture cellulari o lisati cellulari. La nostra offerta di prodotti per ELISA comprende più di 1.000 saggi per scopi di ricerca, per un'ampia varietà di specie tra cui uomo, topo, ratto e vari altri modelli animali (sia d'allevamento che di compagnia). Ogni saggio viene fornito con un protocollo specifico e i reagenti necessari per una piastra a 96 pozzetti. Gli ELISA vengono comunemente forniti nel formato a 96 pozzetti con i reagenti necessari per rilevare e quantificare il bersaglio. Esistono diversi metodi per effettuare un saggio ELISA tra cui a sandwich, diretto e competitivo.
Il saggio con metodo a sandwich utilizza una coppia di anticorpi monoclonali (mAb) per epitopi diversi dello stesso bersaglio. L'mAb primario, legato alla piastra, cattura la proteina dalla soluzione che la contiene, mentre il secondo mAb completa il “sandwich” e fornisce il segnale che rileva la presenza del target. Con il kit viene fornita una quantità nota della versione ricombinante della proteina, che consente all'utilizzatore di disegnare una curva standard rispetto alla quale verrà interpretato il segnale di ciascun campione. La maggior parte dei nostri saggi ELISA utilizza la modalità a sandwich.
I saggi ELISA diretti e competitivi sono meno usati. Il saggio diretto utilizza un singolo mAb per rilevare il campione che si è legato alla piastra. L'mAb viene quindi legato da un anticorpo secondario reporter che fornisce il segnale.
Nel saggio competitivo una quantità nota del biomarcatore viene pre-legata alla piastra. Il campione viene co-incubato con un anticorpo marcato che viene quindi "sequestrato" in misura proporzionale alla concentrazione del bersaglio presente. L'anticorpo libero può quindi legarsi all'antigene sulla piastra e fornire un segnale, dopo che il campione è stato lavato via. In questo caso, il segnale è inversamente proporzionale alla concentrazione del biomarcatore bersaglio.
Software Conferma™ ELISA e Belysa® per l’interpolazione delle curve di saggi immunologici
Il marchio Conferma™ ELISA contraddistingue saggi in modalità a sandwich progettati per ridurre al minimo la variabilità da lotto a lotto a livello del reagente critico, un aspetto fondamentale per gli utilizzatori. La valutazione dei singoli lotti dei reagenti critici con una gamma di tecniche analitiche nell'ambito di un dettagliato protocollo di controllo della qualità (QC) ci consente di controllare e limitare la variabilità nel tempo.
Per consentire agli scienziati di valutare la riproducibilità del loro metodo, abbiamo inoltre progettato il software Belysa® per l’interpolazione delle curve di saggi immunologici. Con questo strumento, l’utilizzatore può esaminare il proprio saggio immunologico in formato sandwich per verificare che parametri come CV% (coefficiente di variazione) e recupero % siano quelli attesi. Può quindi procedere al confronto tra curve standard di più piastre per avere conferma della riproducibilità del metodo.
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