D8276

DNA Polymerase I, Klenow Fragment from Escherichia coli

buffered aqueous glycerol solution

• Numero CAS: 9012-90-2
• Numero MDL: MFCD00283091
• Codice UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.53

Proprietà

• Grado: for molecular biology
• Forma fisica: buffered aqueous glycerol solution
• PM: 103 kDa
• Concentrazione: ~3,000 units/mL
• N° accesso UniProt: P00582
• Attività estranea: Endonuclease, none detected
• Condizioni di spedizione: wet ice
• Temperatura di conservazione: −20°C
• Informazioni sul gene: Escherichia coli K12 ... polA(948356)

Descrizione

Descrizione generale

DNA polymerase I yields two fragments (small and large) upon protease digestion. The large fragment (Klenow fragment) loses the 5′ exonuclease activity that is present in the intact holoenzyme. However, it retains both the polymerase 5′→3′ activity and the 3′→5′ exonuclease activity of the native enzyme.

Applicazioni

Suitable for:

• DNA sequencing by the Sanger dideoxy method
• Synthesis of the complementary strand of cDNA
• Filling in 5′-overhangs in double stranded DNA to form blunt ends
• Mutagenesis of DNA with second strand synthesis using oligonucleotides
• Labeling DNA by the random primer method

Componenti

DNA Polymerase I is supplied as a solution in 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM EDTA, 5 mM dithiothretol, and 50% glycerol (v/v) .

Definizione di unità

One unit converts 10 nanomoles of deoxyribonucleoside triphosphates into acid insoluble material in 30 min. at 37 °C.

Ricostituzione

The enzyme solution may be diluted with 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM ammonium sulfate, 10 mM 2-mercaptoethanol, and 1 mg/ml bovine serum albumin.

Risultati analitici

The activity is assayed in a reaction mixture containing 50 mM potassium phosphate (pH 7.5), 3 mM MgCl₂, 1 mM 2-mercaptoethanol, 32.5 μM ³²P-dATP, 32.5 μM dTTP, 62.5 μg/ml poly(dA-dT) and 0.01-1 unit enzyme.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS08
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H334
• Consigli di prudenza: P261 - P284 - P501
• Classi di pericolo: Resp. Sens. 1
• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable
• Dispositivi di protezione individuale: Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)