MAB369

Anticorpo anti-trasportatore della dopamina, NT, clone DAT-Nt

culture supernatant, clone DAT-Nt, Chemicon^®

• Sinonimo/i: DAT
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: rat
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: culture supernatant
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: DAT-Nt, monoclonal
• Reattività contro le specie: rat, human, mouse, monkey
• Produttore/marchio commerciale: Chemicon^®
• tecniche: immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2aκ
• N° accesso NCBI: NM_001044.3
• N° accesso UniProt: Q01959
• Condizioni di spedizione: dry ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... SLC6A3(6531)

Descrizione

Descrizione generale

Il trasportatore transmembrana della dopamina (DAT) è localizzato a livello del bottone assonale ed è responsabile dell′interruzione della trasmissione dopaminergica in quanto trasporta la dopamina dallo spazio sinaptico all′interno del neurone dopaminergico (reuptake). È stato dimostrato che i pathway della dopamina sono fortemente implicati nei sistemi di ricompensa, dipendenza, motivazione, alcolismo, ADHD e nelle malattie motorie degenerative quali morbo di Parkinson e corea di Huntington.

Specificità

Riconosce il trasportatore della dopamina, N-terminale. Non mostra reattività crociata per i trasportatori della serotonina e della noradrenalina, strettamente correlati (Miller, 1997). L'immunolocalizzazione di DAT su sezioni congelate di cervello umano fissate con paraformaldeide utilizzando MAB369 mostra una intensa colorazione punteggiata in tutto il caudato, il putamen e l'accumbens (Miller, 1997).

Immunogeno

Epitopo: N-terminale

Porzione N-terminale del trasportatore della dopamina umana fuso con la glutatione S-transferasi.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Neuroscienze

L′anticorpo anti-trasportatore della dopamina, regione N-terminale, clone DAT-Nt, è validato per la rivelazione del trasportatore della dopamina in IC, IH e WB.

Sottocategoria di ricerca
Canali ionici & trasportatori

Western blotting: in Western blotting su estratto proteico da caudato, putamen e nucleus accumbens umani (20 ug di proteine totali), riconosce una banda diffusa attorno ai 70-85 kDa

Immunoistochimica: tessuto fissato in paraformaldeide 4% (fare attenzione a non fissare eccessivamente il tessuto), perfusione seguita da post-fissazione per un tempo inferiore a 90 minuti, poi crioprotezione. Diluizione di lavoro consigliata 1:1,000-1:10,000. Se usato su tessuto di ratto, si raccomanda l′uso di anticorpi secondari pre-adsorbiti contro il ratto e l'uso di sistemi di rilevamento PAP (perossidasi-antiperossidasi) o ABC (Avidin–Biotin Complex) per aumentare la sensibilità.

Immunocitochimica: 1:5,000 - 1:10,000.

Immunoblotting (non raccomandato per l'uso sul ratto)

Le diluizioni e i protocolli di lavoro ottimali devono essere determinati dall'utente finale.



IMMUNOISTOCHIMICA - PROTOCOLLO PER MAB369

Questo anticorpo è stato utilizzato con successo su 30 μm di tessuto cerebrale di topo flottante fissato con paraformaldeide al 4%. Tutti i passaggi vengono eseguiti in condizioni di agitazione continua. Protocollo suggerito.

1) 3 lavaggi da 10 minuti in TBS (con o senza Triton 0,25%).

2) Incubare per 30 minuti in TBS con siero al 3% (della specie ospite dell'anticorpo secondario).

3) Incubare l'anticorpo primario diluito opportunamente in TBS con l'1% di siero (della specie ospite dell'anticorpo secondario), con o senza Triton 0,25%, per 2 ore a temperatura ambiente, seguite da 16 ore a 4°C.

4) 3 lavaggi da 10 minuti in TBS.

5) Incubare con l'anticorpo secondario opportunamente diluito in TBS con 1% di siero (della specie ospite dell'anticorpo secondario).

6) 3 lavaggi da 10 minuti in TBS.

7) ABC Elite (1:200 Vector Labs) in TBS.

8) 2 lavaggi da 10 minuti in TBS.

9) 1 x 10 minuti di lavaggio in tampone fosfato (non salino).

10) Reazione con cromogeno DAB, aggiungendo NiCl 0,06% per l′intensificazione.

11) 2 lavaggi da 10 minuti in PBS.

12) 1 x 10 minuti di lavaggio in tampone fosfato.

Descrizione del bersaglio

~ 70-85 kDa

Stato fisico

Non purificato

Surnatante di coltura tissutale non purificato, filtrato attraverso una membrana da 0,2 μm prima del confezionamento. Il prodotto contiene FBS al 20% e ciprofloxacina alla concentrazione finale di 10 μg/mL.

Stoccaggio e stabilità

Si conserva per 1 anno dalla data di spedizione a -20°C. Suddividere in aliquote per evitare di scongelare/ricongelare ripetutamente Per massimizzare il recupero del prodotto, centrifugare il flaconcino dopo lo scongelamento e prima di togliere il tappo.

Risultati analitici

Controllo
Controllo positivo: tessuto cerebrale (nucleo caudato, putamen e nucleus accumbens)

Altre note

Vincitore del CiteAb Award 2024 per i fornitori che hanno conseguito risultati nella ricerca sul Parkinson

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable