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Mechanistic evaluation of Ginkgo biloba leaf extract-induced genotoxicity in L5178Y cells.

Toxicological sciences : an official journal of the Society of Toxicology (2014-03-07)
Haixia Lin, Xiaoqing Guo, Suhui Zhang, Stacey L Dial, Lei Guo, Mugimane G Manjanatha, Martha M Moore, Nan Mei
RÉSUMÉ

Ginkgo biloba has been used for many thousand years as a traditional herbal remedy and its extract has been consumed for many decades as a dietary supplement. Ginkgo biloba leaf extract is a complex mixture with many constituents, including flavonol glycosides and terpene lactones. The National Toxicology Program 2-year cancer bioassay found that G. biloba leaf extract targets the liver, thyroid gland, and nose of rodents; however, the mechanism of G. biloba leaf extract-associated carcinogenicity remains unclear. In the current study, the in vitro genotoxicity of G. biloba leaf extract and its eight constituents was evaluated using the mouse lymphoma assay (MLA) and Comet assay. The underlying mechanisms of G. biloba leaf extract-associated genotoxicity were explored. Ginkgo biloba leaf extract, quercetin, and kaempferol resulted in a dose-dependent increase in the mutant frequency and DNA double-strand breaks (DSBs). Western blot analysis confirmed that G. biloba leaf extract, quercetin, and kaempferol activated the DNA damage signaling pathway with increased expression of γ-H2AX and phosphorylated Chk2 and Chk1. In addition, G. biloba leaf extract produced reactive oxygen species and decreased glutathione levels in L5178Y cells. Loss of heterozygosity analysis of mutants indicated that G. biloba leaf extract, quercetin, and kaempferol treatments resulted in extensive chromosomal damage. These results indicate that G. biloba leaf extract and its two constituents, quercetin and kaempferol, are mutagenic to the mouse L5178Y cells and induce DSBs. Quercetin and kaempferol likely are major contributors to G. biloba leaf extract-induced genotoxicity.

MATÉRIAUX
Référence du produit
Marque
Description du produit

Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, Hybri-Max, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7%
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Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, ACS reagent, ≥99.9%
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, for molecular biology
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, suitable for HPLC, ≥99.7%
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, sterile-filtered, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for hybridoma
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, ReagentPlus®, ≥99.5%
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, ≥99.5% (GC), suitable for plant cell culture
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Bleu de trypan solution, 0.4%, liquid, sterile-filtered, suitable for cell culture
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, puriss. p.a., ACS reagent, ≥99.9% (GC)
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Quercetin, ≥95% (HPLC), solid
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Benzo[a]pyrène, ≥96% (HPLC)
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Kaempferol, ≥97.0% (HPLC)
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Trypan Blue, powder, BioReagent, suitable for cell culture
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Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
4-Nitroquinoline 1-oxide, ≥98%
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Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, PCR Reagent
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Kaempferol, ≥90% (HPLC), powder
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, puriss. p.a., dried, ≤0.02% water
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Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Isorhamnetin, ≥95.0% (HPLC)
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Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Diméthylsulfoxyde, anhydrous, ≥99.9%
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Disponibilité
Prix
Quantité
Supelco
Benzo[a]pyrène, analytical standard, for environmental analysis
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Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
USP
Quercetin dihydrate, United States Pharmacopeia (USP) Reference Standard
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Trypan Blue, Dye content 60 %, ≥80% (HPLC)
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Trifluorothymidine, ≥99% (HPLC)
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Disponibilité
Prix
Quantité
USP
Diméthylsulfoxyde, United States Pharmacopeia (USP) Reference Standard
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Prix
Quantité
Supelco
Benzo[a]pyrene solution, certified reference material, TraceCERT®, 1000 μg/mL in acetone
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Prix
Quantité
Supelco
Benzo[a]pyrene solution, certified reference material, TraceCERT®, 200 μg/mL in methylene chloride
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Bleu de trypan solution, 0.4%, for microscopy
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Disponibilité
Prix
Quantité
Supelco
Quercetin, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
(−)-Bilobalide from Ginkgo biloba leaves, ≥93% (HPLC)
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Prix
Quantité