C8649

Cholesterin-Oxidase aus Streptomyces sp.

lyophilized powder, ≥20 units/mg protein

• Synonym(e): Cholesterin:Sauerstoff-Oxidoreduktase
• CAS-Nummer: 9028-76-6
• EC-Nummer: 1.1.3.6 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-842-1
• MDL-Nummer: MFCD00130783
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Streptomyces sp.
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥20 units/mg protein
• Mol-Gew.: ~34 kDa
• Zusammensetzung: protein, 55-65% biuret
• Löslichkeit: 50 mM potassium phosphate buffer, pH 7.0: soluble (Cold)
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Von Streptomyces sp. produzierte Cholesterinoxidase entspricht einem Molekulargewicht von 62 kDa. Der optimale pH-Wert liegt bei 7, die optimale Temperatur bei 37 °C. Cholesterinoxidase besitzt eine FAD-bindende und eine Steroid-bindende Domäne.

Anwendung

Cholesterinoxidase von Streptomyces wurde in einer Studie zur Beziehung zwischen der mizellären Struktur von Modellgalle und der Aktivität von Esterase verwendet. Cholesterinoxidase von Streptomyces wurde außerdem in einer Studie verwendet, in der die Auswirkungen des Sphingomyelinabbaus auf die Oxidierbarkeit des Cholesterins der Zellen und auf die stationäre Verteilung zwischen Zelloberfläche und Zellinnerem untersucht wurden.

Cholesterinoxidase wird zur Bestimmung des Serumcholesterins eingesetzt. Außerdem findet das Enzym Anwendung in der Mikroanalyse von Steroiden in Lebensmittelproben und für die Unterscheidung von 3-Ketosteroiden und 3β-Hydroxysteroiden. Transgene, Cholesterinoxidase exprimierende Pflanzen werden auf ihre Eignung im Kampf gegen den Baumwollkapselkäfer untersucht. Daneben wird CHOD als molekulare Sonde zur Erforschung der Struktur von Zellmembranen verwendet.

Biochem./physiol. Wirkung

Cholesterinoxidase (CHOD) ist ein monomeres Flavoprotein, das FAD enthält und den ersten Schritt im Katabolismus von Cholesterin katalysiert. Unter Beteiligung von FAD oxidiert dieses bifunktionale Enzym Cholesterin zu Cholest-5-en-3-on, welches dann zu Cholest-4-en-3-on isomerisiert wird; dabei wird H₂O₂ freigesetzt.

Cholesterinoxidase wird von Mikroorganismen genutzt, um aus Cholesterin Kohlenstoff und Energie zu erzeugen. Sie ist nützlich in diagnostischen Assays mit Cholesterinbeteiligung, besonders bei Fettstoffwechselstörungen. Cholesterinoxidase hat insektizide Eigenschaften und unterstützt den Schutz vor den Larven des Baumwollkapselkäfers. Cholesterinoxidase von Streptomyces sp. ist lange haltbar bei guter Leistung.

Physikalische Eigenschaften

Isoelektrischer Punkt: 5,1 ± 0,1 und 5,4 ± 0,1
Michaelis-Konstante: 4,3 x 10‾⁵M(Cholesterin)
Inhibitoren: Ionische Reinigungsmittel, Hg⁺⁺, Ag⁺
Optimaler pH-Wert: 6,5−7,0
Optimale Temperatur: 45–50 °C
pH-Stabilität: pH 5,0–10,0 (25 °C, 20 h)
Wärmestabilität: Unter 45 °C (pH 7,0, 15 min)

Einheitendefinition

Eine Einheit wandelt bei 25 °C und pH-Wert 7,5 pro Minute 1,0 μmol Cholesterin in 4-Cholesten-3-on um. Hinweis: 4-Cholesten-3-on kann eine Isomerisierung erfahren.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver mit bovinem Serumalbumin und Aminosäuren als Stabilisatoren

Angaben zur Herstellung

CHOD ist löslich in kaltem 50-mM-Kaliumphosphatpuffer, pH-Wert 7,0. Lösungen unmittelbar vor Gebrauch herstellen.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H334
• P-Sätze: P261 - P284 - P501
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)