FSUPMMRO

FastStart Universal Probe Master (Rox)

sufficient for 250 reactions, sufficient for 1250 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for 1250 reactions; sufficient for 250 reactions; sufficient for 5000 reactions
• Qualitätsniveau: 100
• Leistungsmerkmale: dNTPs included: no; hotstart
• Hersteller/Markenname: Roche
• Verpackung: pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001); pkg of 250 x 20 μL reactions (04913949001); pkg of 5000 x 20 μL reactions (04914058001)
• Methode(n): RT-qPCR: suitable; qPCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Nachweisverfahren: probe-based

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Gebrauchsfertiges Heißstart-Reaktionsgemisch für die qPCR und RT-qPCR auf allen Echtzeit-PCR-Systemen, die eine Normalisierung mit ROX erfordern.

FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) enthält einen neuartigen Referenzfarbstoff, der seine Verwendung auf allen Echtzeit-PCR-Systemen ermöglicht, die eine Normalisierung mit ROX erfordern, ohne dass das spezifische Gerät oder Protokoll modifiziert oder angepasst werden muss. Dieser gebrauchsfertige, 2x-konzentrierte Master-Mix enthält alle Reagenzien (außer Primer, Sonde und Template), die für die Durchführung quantitativer Echtzeit-DNA-Detektionsassays, einschließlich qPCR und zweistufiger qRT-PCR, im Hydrolyse-Sondennachweisformat benötigt werden. FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) liefert hervorragende Ergebnisse bei Systemen wie dem 7900 HT Fast Real-Time PCR-System oder dem 7500 Real-Time PCR-System von Applied Biosystems. Dieses Produkt ist nicht zur Verwendung mit den LightCycler^® Geräten vorgesehen.

Heißstart-Protokolle verbessern die Spezifität, Sensitivität und Ausbeute der PCR erheblich. Hitzelabile Blockiergruppen auf einigen der Aminosäurereste der FastStart^™ Taq DNA-Polymerase inaktivieren das modifizierte Enzym bei Raumtemperatur. Daher findet während der Zeit, in der Primer unspezifisch binden können, keine Verlängerung statt. FastStart^™ Taq DNA-Polymerase wird durch Entfernung der Blockiergruppen bei hohen Temperaturen (z.B. einem Vorinkubationsschritt bei +95 °C) aktiviert.

Anwendung

FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) wurde verwendet für:

• TaqMan^® quantitative Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktionen (qRT-PCR) zur Quantifizierung endogener miRNA wie MIR376B, MIR376A und MIR181A
• reverse Transkriptase (RT-PCR) zur Untersuchung der Expression des Tumornekrosefaktors (TNF) in ganzem Synovialgewebe von Patienten mit undifferenzierter peripherer inflammatorischer Arthritis (UPIA)
• die Amplifikation und Detektion beliebiger DNA- oder cDNA-Targets, einschließlich GC- oder AT-reicher Targets, mittels quantitativer PCR

Durch Kombination dieses Mastermixes mit dem Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit (Roche) erzielen Sie ausgezeichnete Ergebnisse bei der zweistufigen qRT-PCR.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Steigerung der qPCR-Sensitivität und -Spezifität.

Erzeugung niedrigerer Ct (Schwellenwertzyklus)-Werte.

• Verwendung der Master-Mischung mit jedem sondenbasierten Assay.

Erreichen empfindlicher, spezifischer Ergebnisse in Assays mit den Universal ProbeLibrary-Sonden oder jeder anderen Hydrolyse-Sonde.

• Amplifizieren und Nachweis eines breiten Spektrums von DNA- oder cDNA-Targets.

Amplifizieren von Fragmenten mit einer Länge bis zu 500 bp, einschließlich derjenigen, die GC- oder AT-reich sind.

• Visualisierung von Amplifikationsprodukten auf Agarosegelen.

• Verwenden von automatisierten Pipettierstationen zum Vorbereiten von qPCR-Reaktionen.

Verwendung einer Master-Mischung, die bei Raumtemperatur während längerer Reaktionseinrichtzeiten stabil ist.

• Vermeidung falsch-positiver Ergebnisse durch Kontaminationsübertragung.

Verwendung dieser dUTP enthaltenden Mischung mit Uracil-DNA-Glycosylase zur Eliminierung von kontaminierender DNA, die von früheren PCR-Reaktionen übertragen wurde.

Komponenten

FastStart Universal Probe Master (ROX), doppelt konzentrierte Master-Mischung, die FastStart Taq DNA Polymerase, Reaktionspuffer, Nukleotide (dATP, dCTP, dGTP, dUTP) und einen Referenzfarbstoff enthält.

Qualität

Funktionstest: Jede Charge wird mit drei Templates auf ihre Leistung in der qPCR getestet: ein GC-reiches Template, ein AT-reiches Template und ein langes Template (ca. 440 bp).

Sonstige Hinweise

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Rechtliche Hinweise

FastStart is a trademark of Roche

LightCycler is a registered trademark of Roche

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash