17-10191
Cell Comb™ Scratch-Assay
Synonym(e):
Cell layer wound repair assay
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352207
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Empfohlene Produkte
Hersteller/Markenname
Cell Comb™
Chemicon®
QCM
Qualitätsniveau
Methode(n)
activity assay: suitable
cell based assay: suitable
western blot: suitable
Versandbedingung
ambient
Allgemeine Beschreibung
Lesen Sie unseren Anwendungshinweis in Nature Methods!
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Die Zellmigration kann durch eine Reihe von Verfahren untersucht werden, doch der Scratch-Assay ist durch die Einfachheit der erforderlichen Materialien, des Experimentenaufbaus, der Datensammlung und -interpretation weiterhin ein beliebtes Verfahren (Lian, C., et al., 2007; Cory, G., 2011). Der Scratch-Assay wird in der Regel durch das Ankratzen einer konfluenten Zellmonoschicht mit einer Pipettenspitze, um einen schmalen, wundenähnlichen Spalt zu erzeugen, gestartet. Kurz nach dem Verletzen initiieren die Zellen am Rand der Wunde ein Programm zum Migrieren in den Spalt, ein Prozess, der so lange läuft, bis der Spalt vollständig neu mit Zellen besiedelt ist. Das Ausmaß der Wundschließung wird in der Regel durch Lichtmikroskopie beobachtet und Proteinexpressionsmuster, die während des Wundheilungsprozesses auftreten, können mittels Immunfluoreszenz charakterisiert werden.
Fortschritte beim Verstehen der Reparaturmechanismen von verletzten Zellmonoschichten wurden durch die Entwicklung neuer Verfahren zum Durchführen des Assays in Multiwell-Platten erleichtert. Zu diesen Verfahren zählen das Zufügen von Wunden an existierenden Monoschichten in Wells oder das Verdecken der Mitte des Wells bei der Monoschichtbildung, um einen Spalt zu erzeugen (Yarrow, J.C., et al., 2004; Simpson K.J., et al., 2008; Gough, W., et al., 2011). Jedes Verfahren involviert die Quantifizierung des Ausmaßes der Zellmigration in den Spalt.
Diese Verfahren sind jedoch nicht optimal für die biochemische Analyse der molekularen Ereignisse, welche die Wundreparatur vermitteln. Zum Beispiel kann die geringe Größe einer grundlegenden durch Pipettenspitzen erzeugten Wunde unzureichendes und mangelhaftes Material für die biochemische Analyse bereitstellen. Das Verwenden derselben Pipettenspitze zum Ankratzen einer Zellmonoschicht in einer größeren Platte ist aufwendig und nicht reproduzierbar und der Anteil von migrierenden Zellen gegenüber ruhenden Zellen ist gering. Mehrere Verfahren zum Aufskalieren des Scratch-Assays durch das Erzeugen mehrerer Wunden in Zellmonoschichten wurden beschrieben, doch diese Verfahren erfordern spezielle Werkzeuge (Turchi, L., et al., 2002; Lauder, H., et al., 1998).
EMD Millipore hat den Cell Comb™ Scratch-Assay entwickelt, um die Notwendigkeit für ein einfach zu verwendendes Werkzeug zum Erzeugen mehrerer Kratzwunden zu adressieren. Das angemeldete Patent für den Cell Comb<TMSYMBOL></TMSYMBOL> wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten. Diese Form der Wunden mit hoher Dichte erzeugt einen hohen Anteil migrierender Zellen gegenüber ruhenden Monoschichtzellen, was einen sensitiven Nachweis der auftretenden biochemischen Ereignisse, insbesondere das Migrieren der Zellpopulation, ermöglicht.
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Die Zellmigration kann durch eine Reihe von Verfahren untersucht werden, doch der Scratch-Assay ist durch die Einfachheit der erforderlichen Materialien, des Experimentenaufbaus, der Datensammlung und -interpretation weiterhin ein beliebtes Verfahren (Lian, C., et al., 2007; Cory, G., 2011). Der Scratch-Assay wird in der Regel durch das Ankratzen einer konfluenten Zellmonoschicht mit einer Pipettenspitze, um einen schmalen, wundenähnlichen Spalt zu erzeugen, gestartet. Kurz nach dem Verletzen initiieren die Zellen am Rand der Wunde ein Programm zum Migrieren in den Spalt, ein Prozess, der so lange läuft, bis der Spalt vollständig neu mit Zellen besiedelt ist. Das Ausmaß der Wundschließung wird in der Regel durch Lichtmikroskopie beobachtet und Proteinexpressionsmuster, die während des Wundheilungsprozesses auftreten, können mittels Immunfluoreszenz charakterisiert werden.
Fortschritte beim Verstehen der Reparaturmechanismen von verletzten Zellmonoschichten wurden durch die Entwicklung neuer Verfahren zum Durchführen des Assays in Multiwell-Platten erleichtert. Zu diesen Verfahren zählen das Zufügen von Wunden an existierenden Monoschichten in Wells oder das Verdecken der Mitte des Wells bei der Monoschichtbildung, um einen Spalt zu erzeugen (Yarrow, J.C., et al., 2004; Simpson K.J., et al., 2008; Gough, W., et al., 2011). Jedes Verfahren involviert die Quantifizierung des Ausmaßes der Zellmigration in den Spalt.
Diese Verfahren sind jedoch nicht optimal für die biochemische Analyse der molekularen Ereignisse, welche die Wundreparatur vermitteln. Zum Beispiel kann die geringe Größe einer grundlegenden durch Pipettenspitzen erzeugten Wunde unzureichendes und mangelhaftes Material für die biochemische Analyse bereitstellen. Das Verwenden derselben Pipettenspitze zum Ankratzen einer Zellmonoschicht in einer größeren Platte ist aufwendig und nicht reproduzierbar und der Anteil von migrierenden Zellen gegenüber ruhenden Zellen ist gering. Mehrere Verfahren zum Aufskalieren des Scratch-Assays durch das Erzeugen mehrerer Wunden in Zellmonoschichten wurden beschrieben, doch diese Verfahren erfordern spezielle Werkzeuge (Turchi, L., et al., 2002; Lauder, H., et al., 1998).
EMD Millipore hat den Cell Comb™ Scratch-Assay entwickelt, um die Notwendigkeit für ein einfach zu verwendendes Werkzeug zum Erzeugen mehrerer Kratzwunden zu adressieren. Das angemeldete Patent für den Cell Comb<TMSYMBOL></TMSYMBOL> wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten. Diese Form der Wunden mit hoher Dichte erzeugt einen hohen Anteil migrierender Zellen gegenüber ruhenden Monoschichtzellen, was einen sensitiven Nachweis der auftretenden biochemischen Ereignisse, insbesondere das Migrieren der Zellpopulation, ermöglicht.
Anwendung
Der Cell Comb Scratch-Assay wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten.
EMD Millipores angemeldetes Patent für den Cell Comb™ Scratch-Assay adressiert die Notwendigkeit für ein leicht zu verwendendes Werkzeug zum Erzeugen mehrerer Kratzwunden und der Cell Comb wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten. Diese Form der Wunden mit hoher Dichte erzeugt einen hohen Anteil migrierender Zellen gegenüber ruhenden Monoschichtzellen, was einen sensitiven Nachweis der auftretenden biochemischen Ereignisse, insbesondere das Migrieren der Zellpopulation, ermöglicht.
Forschungskategorie
Zellstruktur
Zellstruktur
Verpackung
Ausreichend Materialien zum Durchführen von 6 Scratch-Assays
Komponenten
Cell Combs: 6 einzeln verpackte Einweg-Combs.
Rechteckige Zellkulturplatten: 6 einzeln verpackte, Zellkultur-behandelte Platten zu 86 mm x 128 mm.
Die Cell Combs und Zellkulturplatten wurden einer Elektronenstrahlbestrahlung unterzogen, um die Möglichkeit einer Kontamination zu minimieren.
Rechteckige Zellkulturplatten: 6 einzeln verpackte, Zellkultur-behandelte Platten zu 86 mm x 128 mm.
Die Cell Combs und Zellkulturplatten wurden einer Elektronenstrahlbestrahlung unterzogen, um die Möglichkeit einer Kontamination zu minimieren.
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie Cell Combs und Zellkulturplatten bei Raumtemperatur. Innerhalb von 1 Jahr nach Empfang verwenden.
Rechtliche Hinweise
CELL COMB is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Haftungsausschluss
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
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Richard L Klemke et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 1046, 203-218 (2013-07-23)
The cytoskeleton is fundamental to many cellular functions including cell proliferation, differentiation, adhesion, and migration. It is composed of actin, microtubules, intermediate filaments, and integrin cell surface receptors, which form focal adhesions with the extracellular matrix. These elements are highly
Shreeta Chakraborty et al.
The Journal of biological chemistry, 292(16), 6600-6620 (2017-02-27)
Endothelial nitric-oxide synthase (eNOS) and its bioactive product, nitric oxide (NO), mediate many endothelial cell functions, including angiogenesis and vascular permeability. For example, vascular endothelial growth factor (VEGF)-mediated angiogenesis is inhibited upon reduction of NO bioactivity both in vitro and
Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..
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