HPLC Analysis of Amphetamines in Urine on Discovery® HS F5 after SPE using Discovery® DSC-MCAX and Standard C18
CONDITIONS
sample preparation
SPE (Solid Phase Extraction)
sample/matrix
human urine spiked amphetamine and methylamphetamine at with 2 mg/mL
SPE tube/cartridge
Discovery DSC-MCAX, 100 mg/3mL (52783-U)
condition
DSC-MCAX SPE tube: 1 mL methanol; 1 mL 50 mM ammonium acetate, pH 6.0; C-18 SPE tube: 1 mL methanol; 1 mL DI water
sample addition
1 mL
washing
DSC-MCAX SPE tube: 1 mL 50 mM ammonium acetate, pH 6.0; 1 mL 1M acetic acid; 1mL methanol; C-18 SPE tube: 1 mL DI water; 1 mL 20% methanol
elution
DSC-MCAX SPE tube: 1 mL 5% ammonium hydroxide in methanol; C-18 SPE tube: 1 mL methanol
eluate post-treatment
evaporate to dryness with nitrogen at room temperature, reconstitute in mobile phase
column
Discovery HS F5, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (567516-U)
mobile phase
[A] 10 mM ammonium acetate, pH 4.5: [B] methanol; (35:65, A:B)
flow rate
2 mL/min
column temp.
40 °C
detector
UV, 210 nm
injection
10 μL
Description
Application
Pré-traitement de l′échantillon:
1mL d′urine humaine a été dopée avec 2μg/mL d′amphétamine et de méthylamphetamine. L′échantillon dopé a été dilué à 1:1 avec 50mM d′ammonium
acétate, PH 6.0.
Conditionnerle tube SPE DSC-MCAX avec 1mL de méthanol puis 1mL d′acétate d′ammonium 50mM, pH 6.0
Charger1mL d′urine dopée diluée
Laveravec 1mL d′acétate d′ammonium 50mM, pH 6.0, 1mL d′acide acétique 1M, et 1mL de méthanol
Elueravec 1mL de NH4OH à 5% dans le méthanol
Evaporerà sec avec N2à température ambiante
Reconstituerdans la phase mobile
Conditionnerle tube SPE DSC-18 de poids de phase et dimensions équivalentes avec 1mL de méthanol, puis 1mL d′H2O bi-distillée
Charger1mL d′urine dopée diluée
Laveravec 1mL d′H2O DI et 1mL de méthanol 20%
Elueravec 1mL de méthanol
Evaporerà sec avec N2à température ambiante
Reconstituerdans la phase mobile
Informations légales
Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany