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Merck

Wide injection zone compression in gradient reversed-phase liquid chromatography.

Journal of chromatography. A (2015-03-10)
Martin Gilar, Thomas S McDonald, Jay S Johnson, James P Murphy, James W Jorgenson
RÉSUMÉ

Chromatographic zone broadening is a common issue in microfluidic chromatography, where the sample volume introduced on column often exceeds the column void volume. To better understand the propagation of wide chromatographic zones on a separation device, a series of MS Excel spreadsheets were developed to simulate the process. To computationally simplify these simulations, we investigated the effects of injection related zone broadening and its gradient related zone compression by tracking only the movements of zone boundaries on column. The effects of sample volume, sample solvent, gradient slope, and column length on zone broadening were evaluated and compared to experiments performed on 0.32mm I.D. microfluidic columns. The repetitive injection method (RIM) was implemented to generate experimental chromatograms where large sample volume scenarios can be emulated by injecting two discrete small injection plugs spaced in time. A good match between predicted and experimental RIM chromatograms was observed. We discuss the performance of selected retention models on the accuracy of predictions and use the developed spreadsheets for illustration of gradient zone focusing for both small molecules and peptides.

MATÉRIAUX
Référence du produit
Marque
Description du produit

Sigma-Aldrich
Acétonitrile, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, HPLC Plus, ≥99.9%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, reagent grade, ≥95%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, ACS reagent, ≥96%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, puriss. p.a., ACS reagent, reag. Ph. Eur., ≥98%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, ACS reagent, ≥99.5%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, puriss., meets analytical specifications of DAC, FCC, 98.0-100%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, ACS reagent, ≥88%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Uracile, ≥99.0%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, suitable for HPLC-GC, ≥99.8% (GC)
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Indole, ≥99%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Valerophenone, 99%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, biotech. grade, ≥99.93%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, anhydrous, 99.8%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acetophenone, ≥98%, FG
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acide formique, ≥95%, FCC, FG
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Uracile, BioReagent, suitable for cell culture
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Reserpine
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, ReagentPlus®, 99%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Butyrophenone, ≥99%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acetophenone, ReagentPlus®, 99%
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, electronic grade, 99.999% trace metals basis
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Indole, ≥99%, FG
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, suitable for DNA synthesis, ≥99.9% (GC)
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Supelco
Acétonitrile, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acétonitrile, ≥99.5% (GC)
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
USP
Residual Solvent Class 2 - Acetonitrile, United States Pharmacopeia (USP) Reference Standard
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Acetophenone, natural, 98%, FG
Référence
Conditionnement
Disponibilité
Prix
Quantité