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MilliporeSigma

Milieux de séparation cellulaire

Un flacon contenant un milieu à gradient de densité Histopaque® qui fonctionne avec le système de séparation cellulaire à centrifuger ACCUSPIN™.

La centrifugation à gradient de densité sépare des populations de cellules spécifiques pour des particules biologiques sur la base de la plage de densité du milieu en gradient et des particules de l'échantillon.

Nous proposons une large gamme de milieux à gradient de densité pour la séparation ou l'extraction de leucocytes, de virus, d'ADN, d'ARN, d'organites et pour de nombreuses autres applications. Notre gamme de produits est composée de milieux à gradient de densité iodés Histopaque® pour la séparation des leucocytes, de polysaccharides pour l'isolement des cellules de mammifères, de milieux à base de silice colloïdale pour l'isolement d'organites et de cellules de mammifères, et de sels inorganiques pour l'isolement d'ADN, de virus et de protéines.


Ressources produits apparentées



Séparation cellulaire avec le système ACCUSPIN™ et les milieux Histopaque®

Le très prisé système ACCUSPIN™ avec Histopaque®-1077 utilise des tubes à centrifuger stérilisés par rayonnement pour créer deux chambres distinctes avec une barrière en polyéthylène haute densité poreux (le "fritté"). Ce système permet l'ajout de sang total anticoagulé dans la chambre supérieure sans risque qu'il soit mélangé avec le milieu de séparation Histopaque® qui se trouve dans la chambre inférieure. Le milieu à gradient de densité Histopaque® permet une séparation claire des lymphocytes et des cellules mononucléaires (à savoir des monocytes). Les agrégats d'érythrocytes et les granulocytes deviennent légèrement hypertoniques, ce qui augmente leur vitesse de sédimentation et se traduit par la formation de granulés au fond du tube ACCUSPIN™.

Milieux à gradient de densité iodés Histopaque®

Les milieux Histopaque® sont des solutions stériles de polysaccharose et de diatrizoate de sodium, de densité ajustée avec précision et ayant fait l’objet d'analyses pour vérifier l'absence d'endotoxines. Ces milieux de séparation prêts à l'emploi facilitent la récupération rapide et optimale des cellules viables à partir de petits volumes de sang total.

Produits sous un management de la qualité ISO 13485, les produits Histopaque® soumis à des tests de performance spécifiques de chaque lot permettent une séparation uniformément sélective des lignées de cellules sanguines, une séparation optimale des cellules non déformées viables et une interférence cellulaire externe minimale.

Milieux à base de silice colloïdale Percoll®

Les milieux à base de silice colloïdale sont des suspensions colloïdales de particules de silice revêtues de polyvinylpyrrolidone (PVP) d'un diamètre de 15-30 nm. La PVP réduit les interactions des particules avec le matériel biologique et stabilise le colloïde. Notre milieu colloïdal Percoll® possède une force osmotique extrêmement faible qui change peu avec la densité. De plus, l'osmolalité des gradients formés par centrifugation est facilement ajustée en ajoutant la quantité appropriée de saccharose ou de solution tampon. Les gradients Percoll® sont parfaits pour les séparations isopycniques de cellules, d'organites, de vésicules membranaires et même de certains virus.

Sels inorganiques

Nos milieux en gradient ioniques, composés de sels de métaux lourds concentrés, sont exclusivement utilisés pour les séparations isopycniques d'acides nucléiques. Le chlorure de césium et le sulfate de césium sont les sels de métaux lourds avec des densités en gradient jusqu'à 1,91 g/cm3 les plus largement utilisés. Parmi les autres sels utilisés, citons l'iodure de sodium, le bromure de sodium et les sels de rubidium.

Milieux à gradient de densité iodés non ioniques

Les structures de la plupart des composés iodés utilisés dans les milieux à gradient de densité s'appuient sur l'acide tri-iodobenzoïque avec un groupe hydrophile fixé pour améliorer leur solubilité. Nous fournissons des solutions de iohexol plus denses (par exemple, Nycodenz® et Histodenz™) qui minimisent la déshydratation des particules biologiques. L'iohexol est non toxique et non métabolisé par les cellules mammifères.

Alcools polyhydriques

Notre offre de médias en gradient non ionique à base d'alcool polyhydrique comprend des gradients de saccharose qui sont largement utilisés dans les séparations de macromolécules par zone de taux et pour la séparation isopycnique de virus et d'organites cellulaires. Leurs avantages sont leur nature stable, leur inertie et leur faible coût, et leurs inconvénients incluent la nature concentrée et hypertonique de la solution. Nous proposons également une solution de glycérol ayant une densité inférieure aux solutions de saccharose correspondantes, empêchant ainsi l'activité de certaines enzymes tout en étant facilement éliminée sous vide.

Polysaccharides

Nous fournissons le milieu polysaccharide le plus couramment utilisé, Ficoll®, pour contourner les problèmes de force osmotique élevée liés à l'utilisation des solutions de saccharose. Il est produit par la polymérisation de molécules de saccharose avec de l'épichlorhydrine pour donner un polysaccharide avec un poids moléculaire moyen de 400 000. Les solutions Ficoll® en dessous de 20 % (p/v) ont une densité de 1,07 g/cm3 et sont considérées comme inertes sur le plan osmotique. Le principal inconvénient de la solution Ficoll® tient dans sa nature plus visqueuse que celle des solutions de saccharose comparables.




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