MABE1016
Réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose
from Escherichia coli
Synonyme(s) :
pan-ADP-ribose binding reagent
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160405
Nomenclature NACRES :
NA.41
Produits recommandés
Source biologique
Escherichia coli
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
purified antibody
Type de produit anticorps
primary antibodies
Espèces réactives
human, mouse
Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)
all
Technique(s)
dot blot: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Conditions d'expédition
dry ice
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Description générale
Le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose (réf. MABE1016) est une protéine recombinante avec étiquette His fusionnée à une étiquette Fc de lapin, exprimée dans une souche Rosetta(DE3)pLysS de E. coli et purifiée à partir de celle-ci (réf. 70956). Le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose est utile dans la détection par affinité des protéines mono et poly-ADP-ribosylées sur des membranes de manière similaire à l'analyse par western blotting ou dot blot basée sur des anticorps. L'étiquette Fc de lapin permet de visualiser la liaison avec des anticorps secondaires anti-lapin conjugués. L'étiquette Fc permet de capturer le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose sur des résines à protéine A pour les applications de "pull-down" (interactions protéine/protéine) d'affinité.
Spécificité
poly(ADP-ribose) et mono(ADP-ribose)
Application
Analyse de la spécificité par dot blot : Ce réactif a permis de détecter un mono(ADPR) sur une protéine PARP3 recombinante, ainsi qu'un mono(ADPR) et un poly(ADPR) sur une protéine PARP1 recombinante (Lee Kraus, centre médical de l'Université du sud-ouest du Texas).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif du réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose a permis d'immunoprécipiter des protéines ADP-ribosylées à partir d'un extrait nucléaire (Lee Kraus, Université du sud-ouest du Texas).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'activité d'auto-ADP-ribosylation de PARP1/2/3 et de mutants en présence de NAD+ ou de divers analogues de NAD+ (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E catalysée par PARP1 dans des réactions enzymatiques sans cellule ainsi que l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E avec étiquette FLAG exprimé de façon exogène dans des cellules HEK293T. Un traitement au flavopiridol (inhibiteur de P-TEFb/CDK9) et au PJ34 (inhibiteur de PARP) a permis d'abaisser le niveau d'ADP-ribosylation de NELF-E (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif du réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose a permis d'immunoprécipiter des protéines ADP-ribosylées à partir d'un extrait nucléaire (Lee Kraus, Université du sud-ouest du Texas).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'activité d'auto-ADP-ribosylation de PARP1/2/3 et de mutants en présence de NAD+ ou de divers analogues de NAD+ (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E catalysée par PARP1 dans des réactions enzymatiques sans cellule ainsi que l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E avec étiquette FLAG exprimé de façon exogène dans des cellules HEK293T. Un traitement au flavopiridol (inhibiteur de P-TEFb/CDK9) et au PJ34 (inhibiteur de PARP) a permis d'abaisser le niveau d'ADP-ribosylation de NELF-E (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).
Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire
Épigénétique et fonction nucléaire
Le réactif de liaison anti-poly-ADP-ribose est un réactif qui se lie sélectivement au mono et au poly-ADP-ribose et qui est destiné aux analyses par western blotting, immunocytochimie et dot blot.
Sous-domaine de recherche
Modifications post-traductionnelles générales
Modifications post-traductionnelles générales
Qualité
Évaluée par western blotting sur des protéines PARP1 et PARP3 recombinantes ADP-ribosylées.
Analyse par western blotting : Ce réactif a permis de détecter un mono(ADPR) sur une protéine PARP3 recombinante, ainsi qu'un mono(ADPR) et un poly(ADPR) sur une protéine PARP1 recombinante (Lee Kraus, centre médical de l'Université du sud-ouest du Texas).
Analyse par western blotting : Ce réactif a permis de détecter un mono(ADPR) sur une protéine PARP3 recombinante, ainsi qu'un mono(ADPR) et un poly(ADPR) sur une protéine PARP1 recombinante (Lee Kraus, centre médical de l'Université du sud-ouest du Texas).
Description de la cible
Variable en fonction des protéines ciblées et de l'ampleur de l'ADP-ribosylation.
Forme physique
Agarose Ni-NTA
Format : Purifié
Produit purifié à partir de E. coli par de l'agarose Ni-NTA. Produit fourni dans un tampon contenant du Tris 10 mM à pH 7,5, du NaCl 0,2 M, 10 % de glycérol, de l'imidazole 10 mM, du PMSF 1 mM et du β-mercaptoéthanol 1 mM, sans conservateurs.
Stockage et stabilité
Stable pendant 1 an à -80 °C à partir de la date de réception.
Recommandations d'utilisation : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -80 °C. Éviter les cycles répétés de congélation/décongélation qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Recommandations d'utilisation : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -80 °C. Éviter les cycles répétés de congélation/décongélation qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique correspondant spécifiquement au lot utilisé.
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Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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