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Culture de cellules de mammifères

Applications, principes et méthodes de la culture de cellules de mammifères

La culture de cellules de mammifères est un outil important pour de nombreuses applications de recherche, cliniques et pharmaceutiques. Des cellules isolées à partir de tissus animaux peuvent proliférer en culture pour étudier la biologie et la pathologie cellulaires ou être utilisées pour la production d'anticorps, de protéines et de vaccins. Des lignées cellulaires de mammifères immortalisées peuvent être cultivées in vitro pendant des périodes prolongées ; elles sont couramment utilisées comme modèles simples de biologie complexe.

Cultiver des cellules de mammifères in vitro

La croissance cellulaire requiert un mélange complexe de nutriments, incluant des sucres, des acides aminés, de l'albumine, des vitamines, des minéraux et des facteurs de croissance. Les milieux de culture cellulaire fournissent ces nutriments essentiels pour la culture de cellules de mammifères in vitro. Ces cultures sont réalisées dans des incubateurs qui offrent un environnement stérile pour une croissance à température optimale (37 °C) avec 5 % de CO2 afin de maintenir des niveaux de pH similaires à celui du sang de mammifère.

À l'exception de certains types de cellules sanguines qui peuvent être cultivés en suspension, la plupart des cellules dérivées de tissus de mammifères ont besoin d'adhérer à une surface pour assurer une division et une croissance cellulaires adéquates. Les surfaces de culture cellulaire sont fournies par des flacons ou des plaques en verre ou en polystyrène traité, ou par des filtres conçus pour l'adhérence cellulaire. L'adhérence cellulaire peut être facilitée par l'utilisation de polymères de synthèse tels que la poly-D-lysine (PDL) et de protéines de matrice extracellulaire, notamment le collagène, qui constituent une structure de fixation pour l'adhérence.

Techniques de culture de cellules de mammifères

Des techniques aseptiques sont utilisées pour prévenir toute contamination des cellules cultivées in vitro. Les cultures de cellules de mammifères requièrent des passages ou repiquages (ce qui implique une dilution des cellules qui arrivent à confluence et le remplacement des milieux de culture appauvris) pour garantir la santé des cellules et leur propagation. Pour repiquer des cultures de cellules adhérentes, les cellules doivent être dissociées des surfaces de culture à l'aide de méthodes enzymatiques, telles que la trypsinisation, ou mécaniques, telles que le raclage, avant d'être transférées dans de nouveaux flacons ou sur de nouvelles plaques en vue de leur ré-adhérence. Les méthodes de comptage cellulaire utilisant des hémacytomètres et des compteurs de cellules automatisés permettent d'évaluer la viabilité cellulaire et contribuent à déterminer les densités d'ensemencement pour le repiquage ainsi que les densités cellulaires nécessaires aux processus en aval. Les cellules cultivées peuvent être cryoconservées par stockage dans de l'azote liquide, d'où des stocks à ensemencer peuvent être prélevés et décongelés lorsque les stocks de travail doivent être reconstitués.

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Conseils d'expert permettant de corriger les problèmes courants en culture cellulaire, notamment concernant la contamination bactérienne et fongique, les débris dans les milieux de culture, le détachement ou l'agglutination des cellules, la croissance lente et la faible viabilité.
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La culture cellulaire est utilisée dans la fabrication de composés biologiques tels que les protéines et les anticorps thérapeutiques, dans les thérapies cellulaires et les vaccins. Les lignées cellulaires et les milieux de culture destinés à la production sont développés de façon à garantir un rendement maximum, et les bioréacteurs ont un rôle à jouer dans les procédés en amont.
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La préparation des milieux de culture pour la culture cellulaire in vitro englobe la préparation des différentes formes de milieux, les méthodes de stérilisation, les suppléments de croissance et de régulation cellulaires, ainsi que le stockage et l'utilisation des milieux de culture.
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Aperçu des outils et réactifs actuellement utilisés dans l'imagerie et l'analyse des cellules vivantes, avec des applications dans le trafic cellulaire, la santé des cellules, l'analyse de l'expression génique, la migration cellulaire, la culture de cellules en 3D, la dynamique cytosquelettique, etc.
Comptage des cellules et analyse de la santé cellulaire
Techniques de comptage cellulaire et de surveillance de la santé et de la viabilité des cellules en culture, notamment tests de viabilité et de prolifération cellulaire par calorimétrie et fluorescence. Méthodes de comptage manuel ou automatisé, y compris appareils Coulter.
Catégories de produits apparentées
Lignées de cellules de mammifères
Les lignées cellulaires d'être humain et autres espèces de mammifères sont indispensables à la modélisation de maladies et de systèmes biologiques. Ce sont aussi des outils précieux pour la production de protéines, d'anticorps, de virus et de vaccins. Nous fournissons des lignées cellulaires authentifiées exemptes de contaminants, dont un grand nombre provient de l'ECACC.
Cellules primaires
Les cellules primaires sont directement issues de tissus vivants et reproduisent fidèlement la physiologie des systèmes biologiques. Notre collection comprend du sang, des xénogreffes de tumeur de patient et des hépatocytes indispensables au criblage de médicaments et aux études ADME/tox.
Milieux et tampons classiques
Les formulations des milieux de culture cellulaire ont été optimisées durant des dizaines d'années de recherche pour répondre à diverses physiologies cellulaires. Vous trouverez ici des milieux du type DMEM, MEM, RPMI-1640, formulations F-10 et F-12 de Ham, ainsi que des solutions sans sérum telles que M199.
Suppléments pour la culture cellulaire
Les suppléments pour culture cellulaire permettent de personnaliser les milieux avec des caractéristiques définies afin d'accompagner certaines applications particulières et de répondre aux besoins de la culture sans sérum. Nos suppléments de qualité "culture cellulaire" englobent des formulations d'ITS, des acides aminés, des vitamines, des antibiotiques et des réactifs qualifiés pour la culture de cellules d'hybridomes et d'insectes.
Sérum humain
Le sérum humain permet de cultiver des cellules humaines. Il est disponible sous forme de sérum humain AB dérivé du plasma, de sérum humain AB issu de sang total coagulé, de préparations inactivées par la chaleur et de préparations appauvries en complément.
Sérum de veau fœtal (FBS)
Le FBS, ou sérum de veau fœtal (aussi appelé FCS), est l'un des suppléments les plus importants pour la culture de cellules de mammifères. Vous pouvez choisir la qualité de FBS qu'il vous faut en vous basant sur vos besoins en termes de documentation et sur les spécificités de votre application.
Facteurs d'adhérence
Les facteurs d'adhérence qui imitent la matrice extracellulaire (MEC) constituent pour les cellules en culture des éléments importants qui stimulent la croissance et le comportement physiologiques. Vous pouvez choisir parmi un large éventail de polymères biologiques et de synthèse pour améliorer vos conditions de culture cellulaire.
Réactifs de congélation de cellules
Protégez vos précieux stocks de lignées cellulaires en choisissant des réactifs conçus pour protéger les cellules lors du stockage à ultra basse température. Notre sélection de DMSO est testée en contexte applicatif, et nos milieux de congélation cellulaire prêts à l'emploi sont disponibles avec plusieurs concentrations de DMSO ou sans DMSO.
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