Cultivo celular microbiológico

Los cultivos microbiológicos se utilizan en biología molecular para la clonación y la expresión de las proteínas recombinantes. También se utilizan en aplicaciones clínicas para aislar, detectar e identificar microbios que producen enfermedades. Los cultivos microbiológicos permiten el crecimiento y la división celulares bajo condiciones controladas de laboratorio. Las bacterias y otros microbios pueden crecer en caldos líquidos o en medios de cultivo nutritivos en agar sólido utilizando técnicas asépticas para evitar la contaminación.

Clonación y expresión de proteínas recombinantes

Los cultivos de bacterias se utilizan para la expresión de proteínas recombinantes, la clonación y la amplificación de plásmidos, y para la clonación de cromosomas bacterianos artificiales (BAC) y de cósmidos. Las células bacterianas pueden ser alteradas para que capten e incorporen genes y plásmidos exógenos mediante transformación. La transformación de células competentes se suele producir a través de electroporación o choque térmico de células competentes tratadas químicamente.

A continuación se identifican y seleccionan las bacterias transformadas en función de la resistencia adquirida a los antibióticos, impartida por el ADN plasmídico recombinante, o utilizando cribado «azul-blanco» para identificar las bacterias recombinantes que expresan β-galactosidasa como marcador. Las levaduras también pueden transformarse utilizando electroporación y otros métodos para análisis mediante la técnica del doble híbrido en levaduras o del gen reportero para estudiar la expresión proteica y las interacciones entre proteínas.

Cultivo para el aislamiento y la identificación microbianos

Los cultivos microbiológicos son importantes desde el punto de vista médico para el aislamiento, la detección y la diferenciación de bacterias y otros microbios que producen enfermedades infecciosas. La caracterización y la identificación utilizando métodos de cultivo dependen del fenotipo y el genotipo microbianos. Las células pueden aislarse a través de inoculación en placa en estrías para producir colonias puras. Se utilizan medios selectivos para inhibir el crecimiento de ciertos grupos de microorganismos y permitir el de otros. Los medios diferenciales contienen compuestos que permiten a los microorganismos ser distinguidos visualmente por el aspecto de la colonia o cambios en los medios circundantes producidos como consecuencia de diferencias en la actividad metabólica o hemolítica. Estos medios contribuyen a la identificación de las bacterias y otros microorganismos mediante diferenciación y eliminación.

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