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CRIF1 deficiency induces p66shc-mediated oxidative stress and endothelial activation.

PloS one (2014-06-07)
Harsha Nagar, Saet-byel Jung, Sun Kwan Kwon, Jung-Bum Park, Minho Shong, Hee-Jung Song, Byeong Hwa Jeon, Kaikobad Irani, Cuk-Seong Kim
RESUMEN

Mitochondrial dysfunction has been implicated in the pathophysiology of various cardiovascular diseases. CRIF1 is a protein present in the mitochondria associated with large mitoribosomal subunits, and CRIF1 knockdown induces mitochondrial dysfunction and promotes ROS production. p66shc is a redox enzyme implicated in mitochondrial ROS generation and translation of oxidative signals and, therefore, is a key factor for oxidative stress in endothelial cells. In this study, we investigated whether mitochondrial dysfunction induced by CRIF1 knockdown induces p66shc stimulation and plays any role in mitochondrial dysfunction-induced endothelial activation. Knockdown of CRIF1 decreased the expression of mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) complexes I, III and IV, leading to increased mitochondrial ROS (mtROS) and hyperpolarization of the mitochondrial membrane potential. Knockdown of CRIF1 also stimulated phosphorylation of p66shc and increased cytosolic ROS in endothelial cells. Furthermore, the expression of vascular cell adhesion molecule-1 and endoplasmic reticulum stress proteins were increased upon CRIF1 knockdown in endothelial cells. However, p66shc knockdown blunted the alteration in mitochondrial dynamics and ROS production in CRIF1 knockdown endothelial cells. In addition, p66shc knockdown reduced the CRIF1 knockdown-induced increases in adhesion between monocytes and endothelial cells. Taken together, these results suggest that CRIF1 knockdown partially induces endothelial activation via increased ROS production and phosphorylation of p66shc.

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Cloruro de sodio, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Cloruro de calcio solution, BioUltra, for molecular biology, ~1 M in H2O
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Sodium chloride solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Cloruro de sodio, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Sodium chloride solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Calcium chloride, anhydrous, BioReagent, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥96.0%
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SAFC
Sodium chloride solution, 5 M
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Sodium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Cloruro de sodio, 99.999% trace metals basis
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Calcium chloride, anhydrous, powder, 99.99% trace metals basis
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Peróxido de hidrógeno solution, contains ~200 ppm acetanilide as stabilizer, 3 wt. % in H2O
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Cloruro de sodio, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Calcium chloride, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.9% trace metals basis
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Cloruro de sodio, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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Millipore
Peróxido de hidrógeno solution, 3%, suitable for microbiology
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Cloruro de sodio, BioPerformance Certified, ≥99% (titration), suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture
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Cloruro de sodio, AnhydroBeads, −10 mesh, 99.999% trace metals basis
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Sodium chloride-35Cl, 99 atom % 35Cl
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Cloruro de sodio, meets analytical specification of Ph. Eur., BP, USP, 99.0-100.5%
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Sodium chloride solution, 5 M
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Cloruro de sodio, random crystals, optical grade, 99.9% trace metals basis
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Cloruro de calcio dihydrate
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Calcium chloride, AnhydroBeads, −10 mesh, ≥99.99% trace metals basis
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Sodium chloride solution, 0.85%
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Cloruro de sodio, reference material for titrimetry, certified by BAM, >99.5%
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Cloruro de sodio, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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Cloruro de calcio solution, 0.1 M Ca, analytical standard (for ion-selective electrodes)
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Cloruro de sodio, tablet
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Cloruro de sodio, tested according to Ph. Eur.
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MISSION® esiRNA, targeting mouse Gadd45gip1
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